肿瘤相关巨噬细胞研究进展

巨噬细胞起源于骨髓造血干细胞和胚胎时期卵黄囊组织,根据其活化的状态、发挥的功能以及分泌因子的不同,将其分为经典活化的M1型巨噬细胞和选择性活化的M2型巨噬细胞。它们具有很强的可塑性,当局部微环境改变时,M1和M2之间可以发生相互转化。其中极化的M2型巨噬细胞被认为是肿瘤相关巨噬细胞(TAM),在肿瘤发生发展中起到重要作用,它通常由血液中单核祖细胞趋化至肿瘤组织,然后在肿瘤微环境的作用下诱导产生。而转录因子、细胞表面标记、分泌的细胞因子等标志物常被用来对其进行鉴定。近年来,TAM作为肿瘤研究中的热点,已经被证明在促进肿瘤生长、血管生成、肿瘤侵袭、抑制抗肿瘤免疫反应、耐药/耐放疗中发挥重要作用。

胶质瘤生物信息学研究资源与进展

胶质瘤是一种常见的原发性恶性脑瘤,尽管治疗方法不断更新,但患者预后仍然很差,其中最具侵袭性的胶质瘤生存期仅有几个月。生物信息学起源于20世纪70年代,随着分子生物学和计算机科学技术的进步,生物信息学发展很快,带动基因组、转录组、蛋白组、代谢组等组学概念应运而生,从而推动了胶质瘤等疾病诊疗技术的进步。例如胶质瘤分类得到细化,已将分子亚型融入胶质瘤分类体系。现常用于胶质瘤研究的数据库有:GEO数据库、TCGA数据库、CGGA数据库、REMBRANDT数据库等,利用这些数据库中上传的样本测序信息,能够从基因组、转录组、蛋白组、代谢组、甲基化组等多组学的角度阐明胶质瘤的发生发展机制,为胶质瘤诊疗技术的进步带来新的希望。

作者勘误

刊载于《现代肿瘤医学》2020年第28卷第3期508-512页,题为《肿瘤相关巨噬细胞研究进展》的文章,由于作者的疏忽,将通讯作者赵耀东的单位名称误为"上海交通大学附属上海市第一人民医院"现更正为"南京医科大学附属上海市第一人民医院",特此声明。

体外培养GFP裸小鼠颅骨细胞的表形分析

目的本研究建立的转绿色荧光蛋白基因近交系裸小鼠(GFP裸小鼠)已在示踪研究胶质瘤微环境方面起了重要作用,但在治疗自体颅骨成形术后骨吸收并发症的效果及机制方面未见报告,本文旨在分析体外培养GFP裸小鼠颅骨细胞的表形,为治疗颅骨吸收准备工具细胞奠定基础。方法取生后3 d的GFP裸小鼠,在无菌条件下解剖双侧顶骨,连同骨膜,将颅骨剪成1 mm2左右的小片,置于含有胎牛血清的1640培养基中,在5%CO2培养箱中作短期传代培养,收集从骨片上长出的细胞作相关检测。结果对原代(P0)和继代(P1、P2)细胞观察表明,在60 mm皿底长满90%的传代时间约6~8 d,抽样细胞计数约2.3×106~2.5×106个/皿,形态以纤维形为主,也有星形和树突状;在荧光显微镜下所有细胞全部发绿色荧光,形态与白光镜下一致;标志蛋白检测表明,在整个细胞群中同时存在BMP-6+的成骨祖细胞和CD206+、CD68+的巨噬细胞。结论基于颅骨再生,除了成骨祖细胞作为起始细胞,还必须有巨噬细胞参与维持环境稳态,培养成功的P0,P1和P2三代细胞因同时满足这个需要,有望作为工具细胞进一步用于颅骨再生的研究。

替莫唑胺治疗中枢神经系统淋巴瘤1例

目的探讨使用替莫唑胺治疗原发性中枢神经系统淋巴瘤的疗效。方法分析1例原发性中枢神经系统淋巴瘤病人的临床资料,行眶上外侧入路活检术,术后予替莫唑胺化疗。结果病理结果显示为(下丘脑)非霍奇金B细胞性淋巴瘤。化疗后病灶较前缩小。随访9个月,未见肿瘤得复发。结论原发性中枢系统淋巴瘤采用肿瘤活检术明确肿瘤病理结果,根据病理结果及病人基础条件,采用适合的化疗药物辅助治疗,可延长病人的生存期。

绿色荧光裸小鼠髓源巨噬细胞的极化培养及特征

目的探讨巨噬细胞为适应肿瘤微环境(tumor micro-environment,TME)需要而在其自身极化层面上发生谱系变化模型的特征,为进一步研究TME中巨噬细胞的可塑性提供参考。方法取绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)转基因并已建成近交系的Foxn1nu.B6-CAG-EGFP/SU裸小鼠骨髓细胞,分别在巨噬细胞集落刺激因子1(colony-stimulating factor 1,CSF-1)、IFN-γ+LPS、IL-4诱导下,培养出M0、M1和M2亚型,倒置荧光显微镜观察GFP。免疫细胞化学染色法检测巨噬细胞标志蛋白和极化蛋白,并进一步与人脑胶质瘤干细胞SU3共培养。结果倒置荧光显微镜下,原始骨髓细胞和条件培养基培养出的M0、M1和M2都发出强烈的绿色荧光。瑞氏-吉姆萨(Wright-Giemsa)染色后,普通显微镜下能观察到巨噬细胞固有的可塑性。免疫细胞化学染色检测CD11C和CD206标志蛋白表达都呈阳性,CD68只在M1巨噬细胞上为弱阳性,CSF-1和CSF-1R在各亚型细胞上都呈强阳性。在共培养的干细胞球体中观察到了绿色荧光细胞浸润,并发生了吞噬反应。结论本研究建立了绿色荧光裸小鼠的髓源性巨噬细胞谱系模型,包含M0、M1和M2亚型,都有巨噬细胞固有的可塑性,表达共同的标志蛋白和极化相关蛋白,具有巨噬细胞固有的吞噬功能,可用于与肿瘤细胞之间相生相克表征的研究,特别是需要示踪研究时,可通过巨噬细胞发出的绿色荧光进行识别。

人脑胶质瘤干细胞扩增球体模型的建立及其蛋白质和脂质含量检测

目的旨在体外建立一种具有自发成球和多向分化潜能的人脑胶质瘤干细胞三维球体扩增模型,并了解其蛋白质和脂质及其次级成分含量,为进一步研究球体的代谢奠定基础。方法分别将人脑胶质瘤干细胞GSC23和SU3在无血清干细胞培养液中培养,培养约2~3周收集细胞球。在多聚甲醛溶液中固定,脱水,石蜡包埋,切片,免疫组织化学染色检测胶质瘤相关标志蛋白,拉曼成像分析球体组织中的蛋白质和脂质及其次级成分含量。采用单因素方差分析比较大球体组、中球体组、小球体组的蛋白质、脂质和苯丙氨酸含量。结果两种干细胞均能在培养皿内形成类似实体瘤的干细胞扩增球体。免疫组织化学染色显示,多形性胶质母细胞瘤常见标志蛋白CD133、Nestin、表皮生长因子受体、S100、Olig2、p53、Ki-67、胶质纤维酸性蛋白、vimentin、CXC趋化因子受体4和CD34全部表达。拉曼成像显示,所构建的人脑胶质瘤干细胞扩增球体中含有蛋白质(2930、1685和1586 cm^(-1))、脂质(2845和1444 cm^(-1))、苯丙氨酸(1003 cm^(-1))和酰胺Ⅲ(1250 cm^(-1)),大球体组、中球体组、小球体组的蛋白质、脂质和苯丙氨酸含量差异无统计学意义(均P>0.05)。结论体外成功构建了人脑胶质瘤干细胞扩增球体模型,其不仅具有三维实体瘤的外形特征和无限扩增能力,还有稳定储存蛋白质和脂质等肿瘤细胞代谢必备能源的能力,有望作为体外人脑胶质瘤研究的工具。