肠出血性大肠杆菌O157∶H7的紧密黏附素基因eae的测序及生物信息学分析

目的克隆编码肠出血型大肠杆菌O157∶H7的紧密黏附素eae基因,并对其进行测序及生物信息学分析,为研究EHEC与宿主细胞相互作用奠定基础。方法利用PCR技术扩增eae基因,经过纯化,将其定向插入克隆载体PMD19-Tsimplevector并进行测序,应用生物信息学软件分析其生物学特性。结果用PCR方法扩增eae基因,大小为2802bp,编码934个氨基酸,用DNAstar5.0软件分析紧密黏附素(Intimin)蛋白的生物活性,在202～210、510～520、716～735个氨基酸残基的肽链上,显示该蛋白具有良好的亲水性,在175～220、300～315、550～610、710～780、825～880个氨基酸残基的肽链上具有良好的柔韧性,在220～300、615～710个氨基酸残基的肽链上,显示该蛋白具有良好的抗原性。结论本研究用PCR法扩增出了O157∶H7的eae基因,成功构建了肠出血性大肠杆菌O157∶H7紧密黏附素eae基因的重组质粒,并分析了黏附素蛋白的亲水性、柔韧性、抗原性,为进一步研究大肠杆菌O157∶H7黏附素的致病机制奠定了基础,为下一步表达出Intimin蛋白,进一步研究该蛋白与宿主细胞的粘附、免疫原性、抗原抗体反应提供了理论依据。

电针对原发性痛经模型大鼠血清中SP及PGF2α的影响

目的观察电针对痛经模型大鼠血清中SP及前列腺素（PGF2α）含量的影响,探讨电针对痛经的作用机理。方法以4月龄未孕动情间期SD雌性大鼠40只随机分为空白对照组、盐水组、模型组、针刺组,每组10只,观察药物对模型大鼠30min内扭体潜伏时间、次数的影响,测定大鼠血清中P物质（SP）和前列腺素（PGF2α）含量。结果针刺组与模型组比较有显著性差异（P〈0.05～0.01）,与空白对照组、盐水组无明显差异（P＞0.05）,治疗后针刺组均可降低小鼠扭体潜伏时间与扭体次数（P〈0.05）,针刺后能够显著升高大鼠血清中SP水平,能够有效降低PGF2α的含量（P〈0.01）。结论电针治疗原发性痛经效果显著,其治疗原理可能是通过升高血清中SP水平及降低PGF2α含量完成的。

大肠杆菌O157:H7 IntC300 B细胞抗原表位的综合预测

目的预测肠出血型大肠杆菌O157∶H7 IntiminC端300氨基酸片段(IntC300)的B细胞抗原表位。方法采用计算机软件和网络服务器分析IntC300的亲水性、β-转角、柔韧性、表面可及性和抗原指数,判断其B细胞抗原表位。结果B细胞抗原表位可能在20-36、76-88、189-198、262-279和284-296残基或其附近。结论对EHEC O157∶H7 IntC300 B细胞抗原表位的综合预测,为研究诊断性单克隆抗体及多肽疫苗提供了理论工具。

灵芝合剂的体内外抗肿瘤作用研究

目的观察灵芝合剂抗肿瘤作用及其可能机制。方法采用体外细胞培养方法观察灵芝合剂对人肝癌细胞株QGY7703、大鼠肝癌细胞株CBRH7919、人胃癌细胞株BGC823的增殖抑制作用;体内试验将50只小鼠随机分为正常对照组、模型组、环磷酰胺组、灵芝合剂组和联合组各10只,除正常对照组外建立S180荷瘤小鼠模型,环磷酰胺组以30mg/kg腹腔注射环磷酰胺,灵芝合剂组以50mg/kg灵芝合剂灌胃,联合组给予灵芝合剂和环磷酰胺,正常对照组及模型组灌胃等量生理盐水,各组连续给药14天。计算各组小鼠抑瘤率、脾脏指数、胸腺指数,检测小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的水平。结果灵芝合剂组0.4～6.4mg/ml药物浓度对CBRH7919、BGC823肿瘤细胞株具有明显的增殖抑制效果,且有一定的浓度依赖性(P<0.05)。灵芝合剂组、环磷酰胺组和联合组抑瘤率分别为47.90%、69.57%、78.67%。灵芝合剂组及联合组小鼠的脾脏指数和胸腺指数与环磷酰胺组比较明显提高(P<0.05)。除环磷酰胺组IL-6含量与正常对照组比较差异无统计学意义外,3个给药组TNF-α、IL-6的含量均高于正常对照组(P<0.05)。结论灵芝合剂有一定的抗肿瘤活性,其作用机制可能与增强荷瘤小鼠免疫力,提高其血清TNF-α、IL-6含量有关。

复合营养素对雌性小鼠抗疲劳和抗氧化作用的研究

目的:探讨复合微量营养素对雌性小鼠的抗疲劳和抗氧化作用,为探讨其对女性的健康作用提供依据。方法:实验选取雌性小鼠,随机分为给药组及对照组,灌胃给予实验组小鼠不同剂量的复合营养素,选择测定小鼠负重游泳时间、血清尿素氮和肝糖元3个指标,确定复合微量营养素的抗疲劳效果;通过检测小鼠体重、血清和肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)浓度,确定其抗氧化效果。结果:抗疲劳实验表明,实验组小鼠负重游泳时间明显延长(P<0.01),血清尿素氮含量明显降低(P<0.05),肝糖元含量增加(P<0.05),并且具有一定的剂量效应关系;抗氧化实验表明,实验组能明显促进小鼠体重的增长(P<0.01),降低MDA含量(P<0.05),提高雌性小鼠SOD活力。结论:复合营养素对雌性小鼠具有抗疲劳及抗氧化作用。