王瓜根抗癌糖蛋白的生理生化特征及其对肺腺癌细胞杀伤作用初步研究

经电泳分析,王瓜根活性蛋白可分为两种:其一是酸性蛋白,具细胞毒作用,等电点测定 P^I 为3.2,PAGE 电泳测定分子量为6.76×10~4道尔顿;其二是碱性蛋白,等电点为9.3,PAGE 电泳测定分子量为1.58×10~4道尔顿;微具细胞毒作用。王瓜根活性蛋白属糖蛋白,经纸层析和薄层硅胶 H 层析证实含半乳糖和木糖。扫描电镜观察和光镜连续观察,显示酸性蛋白对肺腺癌细胞的体外培齐有杀伤作用,当培养液含120μg/ml 时杀伤率达58%,对正常肺细胞作用弱;碱性蛋白对肺腺癌细胞杀伤作用较差,在同样剂量时只有47.6%杀伤率。新鲜王瓜根原汁有很强的杀伤肺腺癌细胞作用,剂量在26g/ml 时,杀伤率达60%;当提高到105g/ml 时,杀伤率达74%。试验结果提示:王瓜根活性抗癌物质,除指三萜—葫芦素之外,可能还存在另一种活性物质。这种活性抗癌物质对肺腺癌细胞表面微绒毛无作用,经处理24小时后,癌细胞开始变形,表现为不同程度内陷,32小时癌细胞膜开始溶解,48小时癌细胞溶成团块。

海芋凝集素的理化性质鉴定

采用葡聚糖凝胶１００（ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００）从天南星科植物海芋（Ａｌｏｃａｓｉａｏｄｏｒａ（Ｒｏｘｂ）Ｃ．Ｋｏｃｈ）中分离出了一种凝集素（简称ＡＯＬ）．ＡＯＬ对兔血有较强的凝集效果，而对各类型人血的凝集活力较弱，在３种糖蛋白中，猪甲状腺球蛋白对ＡＯＬ的凝血活力抑制最强；ＡＯＬ对培养人外周血白细胞的转化率高达７９％，超过对照ＰＨＡ的转化率；用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱测得ＡＯＬ的相对分子质量为３１５００；用癌细胞体外培养的方法证明了ＡＯＬ对肺腺癌细胞株Ｐ１８具有较强的直接杀伤能力．此外还发现ＡＯＬ对温度（８０℃以下）、变性剂（盐酸胍和脲）有较高的稳定性，在ｐＨ６～１０的范围内相当稳定．

尖尾芋凝集素的纯化及性质研究

报道了从天南星科植物尖尾芋（Ａｌｏｃａｓｉａｅｕｃｕｌａｔａ（Ｄｏｕｒ）Ｓｃｈｏｔ）中分离出了一种凝集素（简称ＡＥＬ）．ＡＥＬ对兔血有较强的凝集效果，而对各型人血没有凝集作用；在３种糖蛋白中，粘液素胃粘蛋白对ＡＥＬ的凝血活力抑制较强；ＡＥＬ对培养人外周血白细胞的转化率高达８８％，超过对照ＰＨＡ的转化率；用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱（９４ｃｍ×１．６ｃｍ）测得ＡＥＬ的相对分子质量为３６６００；用癌细胞体外培养的方法证明了ＡＥＬ对肺腺癌细胞株Ｐ１８没有直接杀伤能力．此外，还探讨了各种ｐＨ、温度、变性剂等理化因子对ＡＥＬ凝血活力的影响．

王瓜根有效活性成份对鼻咽癌细胞的杀伤作用

本实验通过对王瓜根的提取、分离和鉴定，证实王瓜根含有葫芦素结晶Ｂ和Ｅ。通过观察王瓜根提取物在体外对人淋巴细胞及鼻咽癌细胞的作用，发现用王瓜根分离的葫芦素Ｂ，Ｅ２０μｇ／ｍｌ，对癌细胞的杀伤率为８２．６％，浓度提高至８０μｇ／ｍｌ时，其杀伤率达９４．１％，而对正常人淋巴细胞转化率的影响则分别为９０．６％及８９．５％，表明王瓜根葫芦素Ｂ，Ｅ对鼻咽癌细胞具有较强的杀伤作用，是王瓜根抗癌的有效活性成分，它同时能促进正常淋巴细胞的转化功能，因而有较好的临床应用价值。王瓜根原汁对鼻咽癌细胞的杀伤力较葫芦素Ｂ，Ｅ强，但对淋巴细胞也有明显的杀伤作用。加热后的王瓜根原汁杀癌细胞作用较原汁低，表明王瓜根毒蛋白也是一种抗癌有效成份。

蜂胶抗菌作用的研究

用蜂胶进行体外抑菌试验表明，蜂胶对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌有明显的抑制作用。

三峡库区奉节县移民安置区土地资源及其开发利用

三峡大坝建成后，奉节县将淹没土地３２６０ｈｍ２，涉及农业人口３．６５万人。奉节县境中部定为该县移民安置区。安置区土地面积４．６４６万ｈｍ２．其中耕地面积１．５４万ｈｍ２，园地面积０．３４万ｈｍ２，主要的成土母质共５类７３个土种，质地以壤土为主，养分含量中等，土壤呈酸性至弱碱性。现有宜农荒山８００ｈｍ２，宜园荒山４６７ｈｍ２，宜竹荒山０．４２万ｈｍ２，低产田土０．８４万ｈｍ２。开发利用的措施是：挖掘后备土地资源潜力，综合利用土地；加强农田基本建设和水土保持工作，以坡改梯为中心，改田治土，培肥地力；调整布局，稳定粮食产量，发展以柑桔为主的经济林和以蔬菜、油料为主的经济作物。

双盲交叉筛选分泌抗直肠腺癌神经节苷脂单克隆抗体杂交瘤细胞株PG 10

采用改良脾内免疫的方法,比较分析了甲、乙两组,经不同方法处理的直肠腺癌细胞株HR-8348的免疫效果(甲组未经酶处理;乙组用0.25％胰蛋白酶,37℃孵育20分钟)。实验结果表明:乙组对正常直肠和直肠腺癌神经节苷脂的阳性杂交瘤细胞集落数远远高于甲组。用分别分离、纯化自同一个体的正常直肠和直肠腺癌的神经节苷脂作检测抗原,交叉筛选出分泌抗直肠腺癌特异神经节苷脂单克隆抗体的PG10杂交瘤细胞株,经三次克隆,二次达百分之百阳性,培液中抗体的最高O.D.值(490nm)为1.85。描述了用双盲交叉法筛选抗直肠腺癌特异的神经节苷脂单克隆抗体的新方法。

结肠腺癌与正常结肠神经节苷脂的比较研究

我们对成人结肠腺癌和同一个体的远端正常结肠,分别分离、纯化出细胞膜神经节苷脂(GLS),经GLS定量分析,结果表明:癌组织中GLS的含量较正常结肠显著增加,结肠腺癌平均每克湿重组织含GLS39.7nmol,正常结肠平均为16.5nmol。高效薄层层析图谱显示,癌组织中,在含有单唾液酸GLS区段,存在二条肿瘤“特异”的条带,位于通常的GM2和GM1条带之后,它们分别占总神经节苷脂的3.9—6.0％、3.9—7.5％;在含有二唾液酸GLS区段,发现一条异常的GLS条带,位于GDla与GDlb之间,占总GLS5.1—6.7％,而5例正常对照中,有一例存在痕量,一例占总GLS的1.4％。比较结肠腺癌和正常结肠的不同GLS的百分含量可知:癌组织中GM3、GM2增加;GD3、GDla减少,同时GDlb和含三唾液酸以上的GLS呈减少的趋势。

基因工程菌株产生含人类绒毛膜促性腺激素抗原的研究 Ⅱ.β—galactosidase—hCG聚体蛋白免疫原性

基因工程菌株产生的含人类绒毛膜促性腺激素(hCG)β亚单位C末端36肽的β-半乳糖苷酶杂交蛋白(简称β-galaclosidase-hCG),在未经解聚处理前免疫新西兰种白兔和昆明种小白鼠,其抗血清在免疫双扩散试验和对流免疫电泳中对hCG没有形成沉淀线作用。而此杂交蛋白经解聚处理后,其抗血清与hCG相作用,在对流免疫电泳和免疫双扩散试验中都出现抗原抗体反应的免疫沉淀线。从多种蛋白质解聚系统中,经过反复试验,筛选出对β-galactosidase-hCG杂交蛋白有良好解聚作用的解聚剂为2M脲、0.9MSDS、0.005M巯基乙醇;解聚作用最适温度是60℃,最适时间为40分钟。

神农架及三峡地区农作物野生和近缘种质资源

一 神农架及三峡地区地处湖北西部、四川东部,位于东经108°～112°、北纬29°～32°。该地区系我国西部高原向东部丘陵延伸的过渡地带,是温带植物区系分化、发展和集散的重要地区,素有“华中植物宝库”之誉。境内山峦起伏,沟壑纵横,海拔高差悬殊(最低只有38m,最高达3105m),生态环境多样。特殊的地理位置,复杂的生态环境,加之这一带悠久的农业历史,孕育了丰富的作物种质资源。长期以来,该地区的作物种质资源一直是个谜,吸引着国内外有关专家学者。“七五”期间国家下达了“

玻璃酸钠联合中医中药治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效观察

将收治的86例膝关节骨性关节炎患者按不同治疗方法分为试验组(45例,玻璃酸钠关节内注射+中药外敷)和对照组(41例,仅给予玻璃酸钠关节内注射),对两组治疗效果进行综合比较。治疗2个疗程后,试验组总有效率为73.33%,对照组为51.22%,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。玻璃酸钠关节内注射联合中药外敷治疗膝关节骨性关节炎效果显著,值得临床推广应用。

中药外敷联合化瘀舒筋汤治疗血瘀型腰椎间盘突出症78例疗效观察

目的：探讨中药外敷联合化瘀舒筋汤治疗血瘀型腰椎间盘突出的临床疗效,为保守治疗腰椎间盘突出提供治疗方案。方法：选取我院2014年1月～2015年1月收治的符合血瘀型腰椎间盘突出的患者共78例,按照随机数字表法将78例患者随机分为对照组与观察组,对照组采用中药外敷治疗,观察组采用中药外敷联合化瘀舒筋汤治疗。比较对照组与观察组临床治疗效果、治疗前后疼痛VAS评分、JOA评分。结果：观察组治疗总有效率为92.1%,明显高于对照组总有效率（70%）,差异有统计学意义（P〈0.05）。两组患者治疗前VAS、JOA评分差异无统计学意义（P〉0.05）,但治疗结束后,观察组VAS、JOA评分均优于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：中药外敷联合化瘀舒筋汤治疗血瘀型腰椎间盘突出有较好的临床效果,能有效缓解疼痛,安全有效,值得临床推广。

射频消融突出物靶点联合臭氧盘内外注射治疗腰椎间盘突出的术后疗效评价及长期随访效果分析的随机对照试验

目的:探究射频消融突出物靶点联合臭氧盘内外注射治疗腰椎间盘突出的临床疗效并分析随访效果。方法:选取我院2013年1月-2015年1月腰椎间盘突出手术患者100名,随机分为对照组和实验组,每组50人,对照组采取臭氧盘内外注射治疗腰椎间盘突出。实验组在对照组的基础上联合射频消融突出物靶点治疗腰间盘突出,观察两组患者术后恢复效果和疼痛程度。结果:实验组患者的显效率明显大于对照组(P<0.05),对照组患者有效率明显小于实验组(P<0.05),实验组患者在术后6个月的腰腿疼痛感明显低于对照组(P<0.05),实验组患者在术后1d、5d腰腿疼痛感与对照组无明显差异(P>0.05)。结论:射频消融突出物靶点联合臭氧盘内外注射治疗腰椎间盘突出非常有效果,能提高治疗的有效率和降低疼痛感,值得于临床治疗中推广。

臭氧联合射频靶点热凝术加活血健腰汤治疗血瘀型腰椎间盘突出症的临床研究

目的:探究联合射频靶点热凝术加活血健腰汤治疗血瘀型腰椎间盘突出症的临床疗效。方法:选取2015年6月~2016年6月我院收治的腰椎间盘突出症患者(LDH患者)160例,随机平均分为4组,A组:臭氧联合射频靶点热凝术加中药活血健腰汤组;B组:臭氧联合射频靶点热凝术组;C组:单纯臭氧消融术组;D组:单纯射频靶点热凝术组。随访3~6个月,观察和比较各组临床疗效、疼痛评分和安全性。结果:A组总有效率为95.00%,B、C、D组总有效率分别为87.5%、75.00%和70%,A组与其他三组有效率比较差异具有统计学意义(P<0.05);A、B、C、D组治疗后疼痛强度均有不同程度的减轻(P<0.05);同时期疼痛强度比较,A组较B、C、D组明显缓解,A组与其他三组差异具有统计学意义(P<0.05);A、B、C、D组治疗后均有不同程度的术后并发症,A组术后并发症发生率明显低于B、C、D组,A组与其他三组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:臭氧联合射频靶点热凝术加活血健腰汤治疗血瘀型腰椎间盘突出症具有很好的临床疗效,值得临床推广。

中西医结合治疗高位腰椎间盘突出症临床疗效分析

目的:探讨中西医结合治疗高位腰椎间盘突出症的临床疗效。方法:选取2009年2月-2011年2月来笔者所在医院就诊的高位腰椎间盘突出症患者24例。全部采取中西医结合治疗,对疗效进行观察和分析。结果:平均治疗时间(14.5±5.8)d,治疗总有效率为91.7%。结论:采取中西医结合方法对高位腰椎间盘突出症患者进行治疗,疗效显著,值得临床推广。

神农架及三峡地区稻种资源考察报告

根据国家“七五”科技攻关专题“神农架及三峡地区作物种质资源考察”的安排,1987～1989年,我们对该地区的稻种资源进行了考察,范围包括湖北省西部的神农架、房县、竹山、竹溪、保康、宜昌、兴山、秭归、长阳、五峰、枝城、恩施、利川、巴东、建始、宣思、鹤峰、咸丰、来风和四川省东部的奉节、巫山、巫溪等22个县市(林区)。共搜集到稻种材料311份(鄂西288份,川东23份),经整理归并,编入目录为212份。1989～1990年,在湖北宜昌和武昌对这批材料进行了种植观察和初步鉴定。这次考察基本查清了本区域水稻生产概况和稻种资源类型。

基因工程菌株产生的含人类绒毛膜促性腺激素抗原的研究 Ⅲ.β—Galactosidase—hCG 免疫和生物活性的初步探讨

基因工程菌株产生的含人类绒毛膜促性腺激素(hCG)β亚单位 C 末端36肽的β-半乳糖苷酶杂交蛋白(简称:β-Galactosidasc-hCG),主动免疫昆明种小白鼠,能诱发特异抗 hCG 抗体的产生。其抗体滴度的高低与免疫原用量有关。通过对小鼠子宫增重抑制试验,表明其抗血清能中和 hCG 的生物活性。

神农架及三峡地区作物种质资源

1986～1990年考察并初步鉴定了神农架及三峡地区作物种质资源,收集各种作物种质资源样本9526份,从中发现一些新物种(变种、变型)和一大批珍稀材料,其中有些已提供生产、育种、科研和教学利用,并初见成效。发现湖北省新记录种29个,神农架林区新记录种116个。根据考察结果和已有资料,对某些作物的起源地和分布中心以及一些植物的分类地位提出了新见解。

神农架及三峡地区豌豆种质资源考察

通过对神农架及三峡地区22县(市)进行豌豆种质资源考察,搜集种质材料138份,并在武昌进行了田间鉴定。考察、鉴定结果表明,该地区豌豆种质资源丰富,水平分布广泛,垂直分布上限达海拔2000米,且类型多样;据不同方法可分成2个变种、组群或类型。经初步筛选,发现了一些优良种质资源,如高蛋白资源,矮秆资源等。当前对这批资源的利用宜从3方面着手,即提纯复壮综合性状好的地方品种直接用于生产、发展以城郊为主体的蔬菜豌豆生产以及利用优良基因资源促进豌豆育种。性状评价结果,该地区豌豆地方品种的主要性状都不很理想,应尽快改良和更换;相关分析和通径分析,揭示了该地区豌豆资源产量因素间的关系,提出了育种应注意的问题。