高迁移率族蛋白B-1(high mobility group box-B1,HMGB1),是一种非组蛋白染色体蛋白质,在正常情况下位于细胞内,参与多种生物学过程,包括维持核小体结构、调节基因转录、核糖核酸形成、DNA修复、V(D)J重组、分化和发展等。HMGB1主要参与...高迁移率族蛋白B-1(high mobility group box-B1,HMGB1),是一种非组蛋白染色体蛋白质,在正常情况下位于细胞内,参与多种生物学过程,包括维持核小体结构、调节基因转录、核糖核酸形成、DNA修复、V(D)J重组、分化和发展等。HMGB1主要参与炎症反应,并与肿瘤细胞的生长、浸润和转移有密切关系。HMGB1可能是一种抗凋亡结合蛋白,其过表达可抑制细胞凋亡,从而导致肿瘤的发生、生长。另外,HMGB1与纤维蛋白溶酶催化剂系统、基质金属蛋白酶的活化和促进黏附细胞迁移有关,这些与细胞侵袭、转移有关。拮抗HMGB1能起到抑制肿瘤生长、浸润及转移的作用。展开更多
目的:探讨HMGB1基因过表达和沉默对子宫内膜癌增殖与侵袭能力的影响及其机制。方法:构建含有HMGB1重组质粒和HMGB1 sh RNA的慢病毒载体并转染人子宫内膜癌HEC-1A,建立过表达和沉默HMGB1基因的HEC-1A细胞株。采用细胞增殖/毒性活性检测...目的:探讨HMGB1基因过表达和沉默对子宫内膜癌增殖与侵袭能力的影响及其机制。方法:构建含有HMGB1重组质粒和HMGB1 sh RNA的慢病毒载体并转染人子宫内膜癌HEC-1A,建立过表达和沉默HMGB1基因的HEC-1A细胞株。采用细胞增殖/毒性活性检测试剂盒(cell counting kit-8)、Transwell小室、细胞划痕实验分析HMGB1过表达和沉默对子宫内膜癌HEC-1A细胞生长、增殖、侵袭及转移的影响。采用Western印迹和反转录PCR(reverse transcriptionPCR,RT-PCR)检测过表达和沉默HMGB1后HEC-1A细胞中NF-κB,VEGF及基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP2)的表达情况。结果:过表达HMGB1能够促进子宫内膜癌HEC-1A细胞增殖、侵袭与转移,且HEC-1A细胞中NF-κB,VEGF及MMP2表达上调;干扰HMGB1表达抑制HEC-1A细胞增殖、侵袭与转移,HEC-1A细胞中NF-κB,VEGF及MMP2表达下调。结论:HMGB1与子宫内膜癌增殖、侵袭与转移密切相关,且可能通过NF-κB,VEGF及MMP2影响子宫内膜癌的侵袭与转移;HMGB1可能成为治疗子宫内膜癌的一个重要靶点。展开更多
目的:探讨小干扰RNA抑制高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1,HMGB1)表达后对p38MAPK通路的影响,从而了解HMGB1影响子宫内膜癌侵袭与转移的机制。方法:运用RNA干扰技术,设计合成4条HMGB1sh RNA,将HMGB1沉默效果最好的HMGB1 sh ...目的:探讨小干扰RNA抑制高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1,HMGB1)表达后对p38MAPK通路的影响,从而了解HMGB1影响子宫内膜癌侵袭与转移的机制。方法:运用RNA干扰技术,设计合成4条HMGB1sh RNA,将HMGB1沉默效果最好的HMGB1 sh RNA转染子宫内膜癌HEC-1A细胞,通过RT-PCR和Western印迹技术检测转染后细胞HMGB1及p38MAPK在基因和蛋白水平的表达情况,MTT实验检测转染后细胞生长活力状态。结果:RTPCR和Western印迹结果均证实HMGB1 sh RNA载体成功抑制HMGB1和p38MAPK在HEC-1A细胞中m RNA和蛋白的表达(P<0.05);MTT结果显示HMGB1 sh RNA转染后HEC-1A细胞生长明显受抑(P<0.05)。结论:HMGB1表达下调可有效抑制子宫内膜癌细胞HEC-1A的增殖、侵袭和转移,此过程可能通过p38MAPK信号通路进行调节。展开更多
目的:探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1,HMGB1)对宫颈癌细胞化学治疗敏感性的影响及其机制。方法:采用Western印迹法检测宫颈癌细胞HeLa和CaSki经不同药物浓度顺铂处理后LC3,Beclin1及P62的表达水平,检测使用自噬抑制剂...目的:探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1,HMGB1)对宫颈癌细胞化学治疗敏感性的影响及其机制。方法:采用Western印迹法检测宫颈癌细胞HeLa和CaSki经不同药物浓度顺铂处理后LC3,Beclin1及P62的表达水平,检测使用自噬抑制剂和/或顺铂处理后宫颈癌细胞HeLa和CaSki中LC3,Beclin1及P62的表达水平;采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖水平。构建HeLa-sh HMGB1,CaSkish HMGB1,HeLa-CTR及CaSki-CTR的稳定细胞系。以CCK-8检测上述细胞系顺铂半数抑制浓度(half maximum inhibitory concentration,IC50)水平;Western印迹法检测上述细胞系中HMGB1,LC3,Beclin1及P62的表达水平。结果:在一定浓度范围内,随着顺铂药物浓度的增加,宫颈癌细胞HeLa和CaSki中LC3及Beclin1的表达增加,P62表达降低。与单用顺铂组相比,顺铂联合自噬抑制剂组细胞存活率更低(P<0.05)。在宫颈癌细胞中,HMGB1的表达与顺铂药物敏感性有关(P<0.05),与LC3,Beclin1表达呈正相关,与P62表达呈负相关。结论:HMGB1可能通过调控宫颈癌细胞内自噬的水平,影响其对顺铂的敏感性。铂类药物结合自噬抑制剂可能成为宫颈癌治疗的新策略。HMGB1可能成为预测化学治疗药物敏感性的分子标志物。展开更多
文摘高迁移率族蛋白B-1(high mobility group box-B1,HMGB1),是一种非组蛋白染色体蛋白质,在正常情况下位于细胞内,参与多种生物学过程,包括维持核小体结构、调节基因转录、核糖核酸形成、DNA修复、V(D)J重组、分化和发展等。HMGB1主要参与炎症反应,并与肿瘤细胞的生长、浸润和转移有密切关系。HMGB1可能是一种抗凋亡结合蛋白,其过表达可抑制细胞凋亡,从而导致肿瘤的发生、生长。另外,HMGB1与纤维蛋白溶酶催化剂系统、基质金属蛋白酶的活化和促进黏附细胞迁移有关,这些与细胞侵袭、转移有关。拮抗HMGB1能起到抑制肿瘤生长、浸润及转移的作用。
文摘目的:探讨小干扰RNA抑制高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1,HMGB1)表达后对p38MAPK通路的影响,从而了解HMGB1影响子宫内膜癌侵袭与转移的机制。方法:运用RNA干扰技术,设计合成4条HMGB1sh RNA,将HMGB1沉默效果最好的HMGB1 sh RNA转染子宫内膜癌HEC-1A细胞,通过RT-PCR和Western印迹技术检测转染后细胞HMGB1及p38MAPK在基因和蛋白水平的表达情况,MTT实验检测转染后细胞生长活力状态。结果:RTPCR和Western印迹结果均证实HMGB1 sh RNA载体成功抑制HMGB1和p38MAPK在HEC-1A细胞中m RNA和蛋白的表达(P<0.05);MTT结果显示HMGB1 sh RNA转染后HEC-1A细胞生长明显受抑(P<0.05)。结论:HMGB1表达下调可有效抑制子宫内膜癌细胞HEC-1A的增殖、侵袭和转移,此过程可能通过p38MAPK信号通路进行调节。
