全氟化合物内分泌干扰作用研究

全氟化合物(Perfluoroalkyl substances,PFASs),是一类庞大的脂肪烃类化合物,属持久性有机污染物(Persistent Organic Pollutants,POPs)范畴。其中最典型、应用广泛的是全氟辛烷磺酸(Perfluorooctane sulfonic acid,PFOS)与全氟辛酸(Perfluorooctanoic Acid,PFOA),也是大部分高分子PFASs聚合物的最终转化产物之一。PFASs因疏水、疏油和耐高温等特性,已被广泛应用于纺织、印染、皮革、防粘涂料、消防灭火、等民用和工业领域[1]。PFASs具有难降解、远距离迁移性以及易在体内富集并沿食物链传播的特性,不仅在我国境内,在世界范围内也广泛存在,例如在北极狐体内已发现PFASs的蓄积[2]。普通人群流行病学资料显示,PFASs物质不仅可在普通成人血液中检出,在孕期女性的体内同样被发现,导致孕期女性的雌激素水平升高,被认为可能是影响新生儿的生长发育的一种危险因素[3]。

PFOS-K通过MAPK通路抑制GH3细胞LH转录的机制研究

目的探索全氟化合物干扰垂体分泌促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)的机制。方法本研究以大鼠腺垂体瘤GH3细胞系为模型,以全氟辛烷磺酸钾(perfluorooctane sulfonate sulfonate,PFOS-K)为受试物连续处理14 d,采用细胞活力检测试剂盒(CCK-8)分析细胞活性;采用蛋白质印迹法检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中c-Jun氨基末端激酶(JNK,包括非磷酸化JNK及磷酸化JNK,p-JNK)的蛋白表达情况;采用彗星实验的方法检测DNA损伤情况;采用实时荧光定量PCR方法检测促黄体生成素基因(LH)的转录水平。结果PFOS-K浓度低于10^(-6) mol/L不影响细胞活性;根据细胞活性试验确定机制研究受试物PFOS-K剂量分别为10^(-8)、10^(-7)和10^(-6) mol/L;与对照组相比,10^(-8) mol/L剂量组p-JNK 54KD亚基表达升高(P<0.05),各剂量组p-JNK 46 KD亚基表达均明显升高(P<0.05),各剂量组非磷酸化JNK46 KD亚基表达均明显降低(P<0.01),10^(-7)和10^(-6) mol/L剂量组处非磷酸化JNK54 KD亚基表达降低(P<0.01);受试物组Olive尾距、尾DNA含量、尾/头(长)均明显增加(P<0.05);受试物组LH基因的转录水平均明显降低(P<0.05);除p-JNK之外的所有指标,均呈剂量—反应关系。结论PFOS-K暴露可激活MAPK通路,造成DNA氧化损伤,抑制LH基因的转录。