新生树鼠句海马神经干细胞的体外培养与鉴定

目的分离培养树鼩海马神经干细胞,并对其进行鉴定。方法应用加有B27添加剂、碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子的培养液对新生树鼩海马部脑细胞进行体外培养,并进行传代。采用免疫组织化学及免疫荧光法对培养细胞的Nestin抗原进行鉴定。结果从新生树鼩海马部分离的细胞可连续传代和不断增殖形成神经球,神经球在含血清培养基中具有多向分化能力,Nestin表达阳性。结论采用特定的培养液可以在体外培养树鼩海马神经干细胞。

牛磺酸对急性染锰大鼠空间学习记忆能力的改善作用

目的探讨急性染锰对大鼠学习记忆能力的影响及牛磺酸的干预作用。方法 (1)牛磺酸预防实验:染锰组大鼠每日ip给予MnCl2.4H2O15 mg·kg-1,连续4周。染锰+牛磺酸预防组大鼠染锰的同时ip牛磺酸200 mg·kg-1,持续4周。(2)牛磺酸治疗实验:每日ip给予MnCl2.4H2O15 mg·kg-1染锰,4周后再ip牛磺酸200 mg·kg-1,持续4周。水迷宫实验检测逃避潜伏时间及平台搜索次数。分离大鼠海马组织并测定乙酰胆碱酯酶(AChE)活力及胆碱O-乙酰转移酶(ChAT)活力。结果 (1)牛磺酸预防实验:与正常对照组逃避潜伏时间(29.5±2.5)s相比,染锰对照组明显延长为(39.8±2.3)s,与染锰对照组相比,牛磺酸预防组逃避潜伏时间明显缩短为(29.4±2.3)s(P<0.05)。与正常对照组相比,染锰对照组海马组织AChE活力无显著性差异,但牛磺酸预防组酶活力则显著下降(P<0.05)。三组间ChAT活力无明显差异。(2)牛磺酸治疗实验:与染锰对照组逃避潜伏时间(56.6±3.0)s相比,牛磺酸治疗组显著缩短为(27.8±2.3)s(P<0.05),平台搜索次数无显著性差异。与染锰对照组AChE和ChAT活力显著增加(P<0.05)。结论牛磺酸预防或治疗可明显改善急性染锰诱导大鼠空间学习记忆能力下降,其机制可能与海马内乙酰胆碱含量有关。

亚砷酸钠诱导HaCaT细胞恶性转化实验

目的探讨低浓度亚砷酸钠(NaAsO2)对人永生化但无致癌性的皮肤角质细胞株(HaCaT)的影响。方法 (1)细胞培养:HaCaT细胞株常规培养,隔日换液,4 d传代;(2)细胞毒性实验:MTT法检测细胞毒性,确定最佳染毒剂量;(3)细胞转化实验:HaCaT细胞在含0.05 ppm NaAsO2培养液中连续传代培养40代(约160 d),细胞培养期间,倒置显微镜下观察每代细胞形态的变化并采集图片,MTT法检测细胞增殖能力,半固体琼脂实验检测细胞克隆形成率。结果 NaAsO2处理细胞形态学、增殖能力及非停泊依赖性能力均发生变化,主要表现为多核巨细胞,倍增时间缩短,在半固体琼脂培养基上形成集落及克隆形成率明显增加。结论 NaAsO2处理的细胞发生恶性转化,砷诱导体外细胞恶性转化模型建立成功。

以有限元、临床及实验研究论髌骨及其张力带内固定术

本文以平面应力问题建立髌骨有限元计算模型。指出髌骨骨折应于矢状面1/2处或中1/3移行区前半部穿针建立张力带环。钢丝捆扎罗紧才能发挥抗张效能。过紧、过松均不利获取最佳应力。经比较各类型木式,以“双弓型”最为合理。试验采用新鲜截肢标本。证实髌骨表面张应力主要来源于股四头肌肌力,其次为膝关节屈曲度。张力带弹性内固定作用足以维持术后摒弃外固定及徐缓伸屈。测试提示手术后近期不宜做超过90°的剧烈伸屈。本组四年间83例患者,随访57例。优良率91.23％,临床验证了改良“双弓法”内固定的可靠性及推广价值。

急性染锰对大鼠基底前脑VDB、HDB区乙酰胆碱转移酶表达的影响及牛磺酸的干预研究

目的研究急性染锰对大鼠基底前脑斜角带垂直臂核(VDB)、斜角带水平臂核(HDB)区乙酰胆碱转移酶(ChAT)表达的影响及牛磺酸的干预作用。方法无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠随机分为:对照组,染锰组,预防组,治疗组,治疗对照组。ChAT免疫组化染色观察基底前脑VDB、HDB区乙酰胆碱能神经细胞形态与数量变化。结果 VDB区:染锰组ChAT阳性细胞数低于对照组,差异有统计学意义(P 0.05);预防组ChAT阳性细胞数与对照组相比,差异无统计学意义(P 0.05);预防组、治疗对照组ChAT阳性细胞数均高于染锰组,差异均有统计学意义(P 0.05);治疗组ChAT阳性细胞数高于治疗对照组,差异有统计学意义(P 0.05)。HDB区:染锰组、预防组ChAT阳性细胞数均低于对照组,差异均有统计学意义(P 0.05);预防组、治疗对照组ChAT阳性细胞数均高于染锰组,差异均有统计学意义(P 0.05);治疗组ChAT阳性细胞数与治疗对照组相比,差异无统计学意义(P 0.05)。结论大鼠急性染锰后,VDB、HDB区ChAT表达显著减少,牛磺酸预防能有效提高VDB、HDB区ChAT表达,牛磺酸治疗能有效提高VDB区ChAT表达。治疗对照组VDB、HDB区ChAT表达有所提高,说明短期染锰停止以后,大鼠基底前脑可能会逐渐修复损伤。