川东丘陵地区蚌蟹立体生态养殖试验

三角帆蚌(Hyriopsis cumingii),俗称珍珠蚌,是淡水双壳类软体动物,属双壳纲、蚌科、帆蚌属,广泛分布于湖南、湖北、浙江等地,是培育淡水优质珍珠的主要蚌种之一。随着长江十年禁渔政策正式实施,在天然水域挂蚌养殖被严令禁止,原珍珠蚌主产区养殖面积和珍珠产量均受影响,急需开拓珍珠蚌养殖新渠道。开江县地处川东丘陵地带。

川东丘陵地区稻虾生态综合种养技术及效益分析

借鉴潜江地区成熟的稻虾综合种养技术,结合开江县的自然条件并加以优化改良,在现代农业园区开展了稻虾共作+稻虾连作生态综合种养试验,后期进行了推广,均取得了成功。本文总结了川东丘陵地区稻虾生态综合种养技术,包括前期准备、小龙虾养殖、水稻种植、日常管理等方面内容,并分析了其经济效益,以期在实现粮食稳产的同时保持良好的经济效益和生态效益。

川东丘陵地区稻蛙生态综合种养试验

黑斑侧褶蛙(Rana nigromaculata)(以下简称黑斑蛙),是蛙科、侧褶蛙属的两栖动物,原产于中国、日本、韩国、朝鲜、俄罗斯等区域,生活在沿海平原至海拔2000 m左右的丘陵、山区,常见于水田、池塘、湖泽、水沟等静水或流水缓慢的河流附近。黑斑蛙在我国分布广泛,其生性凶猛,跳跃能力极强,是捕食害虫的能手,有“农田卫士”之称,肉质鲜嫩口感独特,养殖潜力巨大,具有良好的生态效益和经济价值[1]。四川省开江县地处川东,属丘陵地貌,农田不便于耕作,难以实现规模化种植,如何充分挖掘丘陵地区耕地潜力,提高稻田综合利用效率,成为亟待解决的问题。

大鲵源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及胞外酶活性研究

为了确定重庆武隆大鲵养殖场患病大鲵的病原菌,并进行菌种鉴定及胞外酶活性研究,从具有典型症状的病鲵肝脏分离出一株菌株TNL12,根据形态学特征、生理生化特性及16SrDNA分析对菌株进行种类鉴定,通过人工感染试验确定病原菌株的致病性,利用平板法检测胞外酶活性.结果显示,所获菌株为革兰氏阴性短杆菌,无芽孢,其生理生化特性与弗氏柠檬酸杆菌一致.16SrDNA分析表明,TNL12与弗氏柠檬酸杆菌的同源性为99%,在系统发育树上与弗氏柠檬酸杆菌聚为一支.该病原菌可引起健康青蛙、大鲵出现感染症状,且感染症状与自然发病症状相似.胞外酶活性检测发现该菌可产卵磷脂酶、淀粉酶,但不产脂酶、蛋白酶、明胶酶、脲酶等胞外酶.这些研究结果表明,从患病大鲵中分离出的病原菌为弗氏柠檬酸杆菌,且对大鲵有较强的致病性.

中草药体外抑杀大鲵致病性豚鼠气单胞菌的药效研究

筛选对大鲵致病性豚鼠气单胞菌有抑菌作用的中草药。采用琼脂打孔法,测定中草药在不同pH值时对大鲵致病性豚鼠气单胞菌的体外抑菌圈效果。使用二倍稀释法,测定中草药在不同pH值时对大鲵致病性豚鼠气单胞菌的最小抑菌质量浓度和最小杀菌质量浓度。试验结果表明,200种中草药对大鲵致病性豚鼠气单胞菌的抑菌效果各不相同,其中135种中草药具有一定抑菌作用,其余65种无抑菌作用,而不同pH值时抑菌效果亦有所不同。药液为酸性时,乌梅、五味子、五倍子及诃子的抑菌效果极强,抑菌圈明显。135种中草药对豚鼠气单胞菌的最小抑菌质量浓度和最小杀菌质量浓度亦有所差异,其中,诃子、五倍子、石榴皮、大黄及槐角的最小抑菌质量浓度小于1mg/mL,抑菌作用最强。本试验筛选出具有很强抑菌作用的中草药。

十六种中草药及其复方对大鲵致病性豚鼠气单胞菌的体外抑制作用

应用二倍稀释法测定了诃子、五倍子、石榴皮等16种中草药及其复方对大鲵(Andrias davidianus)致病性豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度,应用棋盘法设计16种中草药组合的120种双联复方和10种中草药组合的120种三联复方,评估了复方的体外抑菌作用。结果表明:16种中草药对大鲵致病性豚鼠气单胞菌均有一定程度的抑菌作用,抑菌作用强弱依次为诃子、五倍子、石榴皮、大黄、槐角、覆盆子、黄芩、金樱子、肉苁蓉、丁香、川牛膝、赤芍、知母、防风、天葵子及罗汉果;在120个中草药双联复方中,5.8%为显著协同作用,82.6%为协同作用,11.6%为相加作用;在120个中草药三联复方中,29.2%为显著协同作用,87.5%为协同作用。因此,合理的中草药配伍能提高对大鲵致病性豚鼠气单胞菌的体外抑菌作用。

一种检测大鲵致病性嗜水气单胞菌的四重PCR法

建立一种快速诊断致病性嗜水气单胞菌的PCR法。根据嗜水气单胞菌的16S rDNA、外膜蛋白、溶血素及丝氨酸蛋白酶基因设计4对引物,经PCR反应条件优化后进行检测。结果表明,仅嗜水气单胞菌呈阳性,其检测敏感性高,可检测100 fg的DNA模板。20株大鲵源嗜水气单胞菌经四重PCR法检测时,有18株呈阳性。其中,毒力基因种类较多的阳性菌株经人工感染试验和胞外产物活性检测时显示出较高的致病性。利用该PCR法进行的其他检测中,还发现33份人工感染样本全部呈阳性,34份疑似样本有21份呈阳性,说明四重PCR法可应用于临床检测。本研究建立的四重PCR法具有高度敏感性和特异性,可用于嗜水气单胞菌快速诊断。