应用激光扫描共聚焦显微镜观察骨组织微损伤的实验研究

目的:建立一种可以用于激光扫描共聚焦显微镜观察的骨微破裂荧光染色方法。方法:取8月龄猪髂骨1块,锯成0.90cm×0.81cm×1.89cm的规则矩形,沿长轴方向进行压缩疲劳损伤(负载大小40N,负载频率2.33Hz,负载次数30万次,湿度60%,工作温度28℃),锯成0.2cm厚骨片0.5mmol/L茜素红、吖啶橙、钙黄绿素、二甲酚橙、碱性品红和10g/碱性品红染色。另取人股骨头1个锯出1.5cm×1.0cm×0.25cm大小骨片3块,分别应用0.5mmol/L钙黄绿素、茜素红和10g/L碱性品红溶液进行染色。所有骨片常规塑料包埋,磨片至40～100μm,在激光扫描共聚焦显微镜下观察。结果:在疲劳损伤后的猪髂骨和未经疲劳损伤的人股骨头骨小梁上均可以观察到微破裂。所有荧光染料中,以钙黄绿素染色后观察效果为佳,在波长为522nm的激光扫描下发出绿色荧光。茜素红在波长为605nm的激光扫描下发出红色荧光。结论:应用钙黄绿素和茜素红染色可以对骨微破裂进行荧光染色,在激光扫描共聚焦显微镜下能够观察到清晰的骨微破裂图像。

miR-377-5p通过下调HIF-1α及其相关VEGF信号通路抑制肝细胞癌HepG2细胞的增殖和侵袭

目的:探讨miR-377-5p与缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)的靶向关系以及通过控血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)信号通路对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞增殖、侵袭和EMT的调控作用。方法:qPCR检测35例人HCC组织及癌旁组织标本中miR-377-5p的表达水平。将HepG2细胞分为对照组、mimic NC组、miR-377-5p mimic组,qPCR检测转染效率;EdU染色、Transwell和Western blotting(WB)检测miR-377-5p过表达对HepG2细胞增殖、侵袭及其增殖相关蛋白Ki-67、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志蛋白E-cadherin、N-cadherin表达的影响;qPCR、WB检测miR-377-5p过表达对HepG2细胞中,缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表达的影响。荧光素酶报告基因实验验证miR-377-5p与HIF-1α基因的靶向关系。结果:HCC组织中miR-377-5p表达水平较癌旁组织降低(P<0.01)。与对照组相比,miR-377-5p mimic组HepG2细胞中miR-377-5p水平明显升高,细胞的增殖、侵袭能力降低(均P<0.01),EMT、N-cadherin表达水平降低(均P<0.01)而E-cadherin表达水平显著升高(P<0.01);miR-377-5p mimic组中HIF-1αmRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.01或P<0.05)。miR-377-5p靶向抑制HIF-1α基因表达,并抑制VEGF通路的激活(均P<0.05)。结论:miR-377-5p通过靶向抑制HIF-1α基因表达和下调VEGF信号通路从而抑制HepG2细胞的增殖、侵袭和EMT。

LC-DCP经皮微创治疗胫骨多段骨折

目的 探索一种新的治疗胫骨多段骨折内固定方法。方法 应用LC—DCP经皮微创治疗胫骨多段骨折治疗胫骨多段骨折21例患者。于胫骨内侧建立皮下隧道，将钢板经隧道置于骨膜上，间接复位，低密度螺钉固定。结果 骨折全部愈合，愈合时问2．9～4．5个月，平均3．2个月。治疗效果参照Mechant评分标准，优ll例，良8例，可2例，总优良率达85．7％。结论 在胫骨多段骨折中，LC—DCP经皮微创内固定是一种能提供生物学固定，且并发症较少的新的内固定方法。