缬氨酸对猪原代肝细胞脂质代谢调节基因PPARα、FASN表达的影响

【目的】研究旨在探究缬氨酸调节猪肝脏脂质代谢相关基因及其参与的调控途径,为揭示缬氨酸调控猪肝脏脂质代谢的分子作用机制提供试验数据和理论依据。【方法】以5日龄三元杂(杜洛克×长白×大白)仔猪原代肝细胞为试验对象,采用0,0.1,1,10 mmol/L缬氨酸(Val)分别处理原代肝细胞24 h及48 h,通过蛋白免疫印迹(Western-blot)技术检测不同浓度缬氨酸对脂质代谢重要调控基因PPARα及FASN的影响,同时将10 mmol/L缬氨酸处理24 h组与对照组的肝细胞样品进行RNA-Seq转录组测序,结合GO功能与KEGG通路富集分析,筛选出缬氨酸调控肝脏脂类代谢的潜在关键基因及信号通路,最后应用实时荧光定量(qPCR)技术验证差异表达基因。【结果】(1)与对照组相比,10 mmol/L缬氨酸处理原代肝细胞24 h和48 h均显著降低PPARα、FASN基因的蛋白表达(P<0.05);(2)与对照组相比,10 mmol/L缬氨酸处理原代肝细胞24 h组共筛选出418个差异表达基因,其中181个上调,237个下调。(3)GO功能分析发现,差异基因在分子功能方面主要参与蛋白质结合过程、催化活性、分子转导活性和转运蛋白活性。(4)KEGG分析发现,差异基因富集在代谢、疾病、生物系统、细胞信号调控、基因调控、环境调控等6个生物过程。其中脂质代谢是参与代谢生物过程的主要信号通路之一,富集到脂肪酸代谢的FASN、SCD、FADS2、FADS1、HSD17B12等5个差异基因主要参与胰岛素信号通路、AMPK信号通路、PPAR信号通路。【结论】10 mmol/L缬氨酸可显著下调猪原代肝细胞中PPARα及FASN的蛋白表达,调节脂质代谢关键基因的表达及信号通路活性,研究结果为进一步解析支链氨基酸调控脂代谢提供了理论基础。

PARP-1在染料木素作用小鼠卵泡发生进程中的表达特征

【目的】旨在探究PARP-1信号及其介导的PAR化修饰水平在染料木素促进卵泡发育和抑制卵泡闭锁进程中的相关性,丰富染料木素等类雌激素物质作用于雌性哺乳动物卵巢卵泡发生的作用机制,以期为种畜高产日粮配方的研制提供科学指导。【方法】以21 d雌性昆明小鼠为试验动物,采用腹腔注射25,50,100 mg/kg不同剂量染料木素,每日定点注射1次,连续7 d,采集卵巢组织和血清,采用免疫组织化学法检测PARP-1蛋白在卵巢组织内的表达特征,并运用Western blot对卵巢组织内PARP-1蛋白及pADPr进行定量。结合凋亡指示蛋白Cleaved-caspase3、雌二醇(E2)水平、类固醇合成酶CYP19A1和HSD17B1,综合分析PARP-1信号及其介导的PAR化修饰信号是如何参与染料木素抑制卵泡闭锁、促进卵泡发育进程。【结果】免疫组织化学染色显示,PARP-1阳染主要发生在原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡、有腔卵泡中的健康颗粒细胞核和卵母细胞,卵泡膜细胞次之,但在Cleaved-caspase3阳染的凋亡细胞中PARP-1不表达。Western blot结果显示,50 mg/kg染料木素处理组PARP-1解离片段(89 ku)的表达量较对照组显著降低(P<0.05),但PARP-1全段(116 ku)表达量在各剂量组无显著差异(P>0.05)。其次,50 mg/kg染料木素处理组的pADPr的表达量在15 ku以下、25 ku以及35~45 ku这3个区域内均显著低于对照组、25 mg/kg和100 mg/kg剂量组(P<0.05),100 mg/kg剂量组的pADPr仅在25 ku区域处表达量较对照组和25 mg/kg剂量组显著降低(P<0.05)。然而,较对照组,Cleaved-caspase3的表达量在25 mg/kg和50 mg/kg染料木素处理组呈现剂量依赖性下降,且在50 mg/kg剂量组差异显著(P<0.05);E2水平较对照组亦呈现剂量依赖性上升且差异显著(P<0.05),但雌激素合成酶CYP19A1和HSD17B1的表达无显著变化(P>0.05)。【结论】PARP-1广泛存在于哺乳动物卵巢内健康的颗粒细胞、卵泡细胞和膜细胞中,可能通过催化pADPr的合成,介导卵巢内的能量代谢、细胞凋亡以及类固醇激素合成等胞内活动,参与染料木素等类雌激素物质干扰卵巢卵泡发生进程。

经鼻腔蝶窦入路切除垂体瘤患者的护理干预研究

探究经鼻腔蝶窦入路切除垂体瘤护理方法。方法 选取医院收治的60例行经鼻腔蝶窦入路手术治疗垂体瘤的患者作为研究对象,对照组实施常规护理,观察组联合围术期护理。结果 观察组患者的全身状况评分高于对照组、焦虑以及抑郁评分低于对照组。观察组患者的手术时间、住院时间均短于对照组,护理满意度评分高于对照组?。与对照组相比,观察组患者的并发症发生率较低。结论 在经鼻腔蝶窦入路切除垂体瘤患者治疗中,围术期护理应用效果理想。

艾滋病合并肺结核患者的CT表现分析

目的研究分析艾滋病合并肺结核病的CT表现特征及其与CD_4^+T淋巴细胞的相关性。方法选取我院2012年4月到2014年10月收集的94例肺结核患者进行回顾性分析,将其分为两组,其中观察组50例,为艾滋病合并肺结核病患者,选择同期单纯性肺结核44患者作为对照组。结果观察组累及多个肺叶多见,主要表现为淡薄片状、结节融合状及弥漫性粟粒影。两组累及肺叶部位差异有统计学意义(均P<0.05);观察组与对照组进行CD_4^+T淋巴细胞检测,结果分别为(5.1±6.3)个/μl与(66.7±1.8)个/μl,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对CD_4^+T淋巴细胞计数<100个/μl、100-200个/μl、>200个/μl分层后,艾滋病合并典型与不典型肺结核患者的病例数分布情况,CD_4^+T淋巴细胞计数<100个/μl和>200个/μl两组之间差异有统计学意义(均P<0.05);<50个/μl和50-100个/μl在淡薄片状影、粟粒结节影、胸腔积液、肺外结核分布两组之间差异有统计学意义(均P>0.05)。结论艾滋病晚期患者影像表现多不典型,往往与CD_4^+T淋巴细胞计数明显减低有关。了解艾滋病合并肺结核的影像特征与CD_4^+T淋巴细胞的相关性,有助于艾滋病患者的早期诊断。

艾滋病合并卡氏肺孢子菌肺炎影像表现分析

目的探讨艾滋病病人合并卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)的X线和CT表现。方法收集临床诊断艾滋病病人合并卡氏肺孢子虫菌肺炎胸部X片及CT片8例,分析其影像学表现。结果 8例患者胸部X线和CT片均表现为弥漫性病变,其中两肺磨玻璃样改变5例;两肺间质性改变2例;两肺多发实变影1例。结论艾滋病患者合并卡氏肺孢子虫肺炎其胸部影像学表现有一定的特征性,影像学对本病的诊断具有一定的价值。

原发性肝癌经TACE术后螺旋CT表现

目的探讨原发性肝癌经TACE术后的螺旋CT表现及其临床指导价值。方法收集临床诊断原发性肝癌并行1次及以上TACE术的患者46例,分析其CT平扫及双期增强扫描的影像表现,了解其术后CT强化特征。结果 46例患者中有病灶62个,其中16个(25.8%)病灶TACE术后平扫碘油呈完全填充型,肿瘤有不同程度缩小,双期扫描均未见明显强化;41个(66.1%)病灶在CT平扫表现为部分填充型,增强双期扫描后其中30个病灶动脉期见斑片状、结节状强化,呈"快进快出"特征强化;8个病灶动脉期及门静脉期均见斑片状强化;3个病灶门静脉期见斑片状强化;5个(8.1%)病灶在CT平扫碘油沉积表现为稀少型,增强扫描动脉期见肿瘤边缘轻度强化,门脉期无明显强化。结论 CT平扫及双期增强扫描表现可反映肝细胞癌TACE术后的血供变化及治疗效果,对指导临床后续治疗方案选择有重要价值。

带交易费的证券组合选择模型的一种化简求解方法

带交易费的最优证券组合选择问题可以表示为一类不可微非线性规划模型。为了求解这类模型,一些学者通过引进大量的辅助变量经过多次变换将其转换为一个线性规划问题。本文提出一种新的化简方法,一次变换即可将该类不可微非线性规划模型转化为一个线性规划模型,不仅简化了求解过程,而且还减少了最终的线性规划问题的变量个数。

多层疏松砂岩气田气井合理配产

多层疏松砂岩气田储层岩性疏松，气水层交互，边水环绕。若配产不合理，将导致气井大量出水出砂，仅仅考虑气井无阻流量的单因素配产方法已经不能满足需要。根据系统试井产能分析、生产数据动态分析、单井控制储量和临界出砂状态的计算，结合最小携液产量和最大冲蚀产量的计算，考虑采气速度均衡、压降均衡、出砂安全、携液安全进行多因素配产方案研究，并运用气藏数值模拟技术，结合水侵动态和稳产年限对气井配产方案进行调整，建立了一套针对该类型气田的科学合理的气井配产模式。模拟结果表明：实例数值模拟调整后气井产水得到有效控制，气田稳产年限达到13 a以上。

慢性重型肝炎合并侵袭性肺真菌感染患者胸部CT表现

目的总结分析慢性重型肝炎合并侵袭性肺真菌感染患者胸部CT表现。方法以本院2013年5月-2016年6月期间收治的经病理诊断确诊的60例慢性重型肝炎合并侵袭性肺真菌感染患者为研究对象,所有患者均进行胸部CT,回顾分析患者的临床影像资料表现。结果在病原菌方面,34例为假丝酵母菌(56.7%),19例为曲霉菌(31.7%),4例为组织胞浆菌(6.7%),3例为肺孢子菌(5.0%);在CT影像表现方面,存在着结节、胸腔积液、实变、网格以及膜玻璃影等,其中以结节最多,不同征象之间差异较小(P>0.05),不具有统计学意义。结论对于慢性重型肝炎合并侵袭性肺真菌感染患者胸部CT表现征象较多,没有特异性的表现,因而在临床诊断过程中应综合多项因素进行诊断。

稠油有杆泵电加热井的井筒温度场预测

根据传热学原理，对稠油从井底流出井筒过程中热交换机理进行研究，建立稠油有杆泵电加热井的井筒温度场预测模型。用有限差分法求解数学模型，并综合考虑导热系数、液体密度、比热等热物性参数的影响。对井筒温度的模拟预测可为稠油开采分析和电加热参数的选择提供参考。

基于支持向量机算法的注水管道剩余寿命预测

支持向量机是在统计学习理论的基础上发展而来的一种新的模式识别方法, 在解决有限样本、非线性及高维模式识别问题中表现出许多特有的优势。鉴于此, 针对注水管道的使用寿命和腐蚀影响因素之间复杂的映射关系, 在注水管道的剩余寿命预测研究中引入基于统计学习理论的支持向量机算法。研究了胜利油田某实验区注水水质腐蚀的影响因素, 应用LibSVM软件建立了注水管道的剩余寿命预测模型, 从而提供了一种预测注水管道剩余寿命的新方法。实际应用结果表明, 用支持向量机算法预测注水管道剩余寿命在样本有限的情况下具有明显优势。

采油工程专业生产实习有效途径的探索

应用型创新人才培养的基础在于实践能力的形成,生产实习是应用型本科院校锻炼实践能力的重要环节。目前,很多高校的生产实习遇到了许多新问题,急需探索出一条有效途径,以保证实习的质量和效果。本文以重庆科技学院石油与天然气工程学院采油工程专业为例,从目前生产实习现状和存在的不足之处入手,根据应用型本科院校和采油工程专业的具体实际情况,探索生产实习的有效途径。

原发性小肝癌经射频消融后的CT表现

目的探讨CT对RFA治疗小肝癌的效果评价。方法 22例原发性小肝癌(病灶直径≤30mm),共22个病灶,经RFA治疗后3d-12个月复查CT,分析肝内病灶术后的大小、密度、形态、强化方式等变化情况。结果小肝癌经RFA治疗后CT平扫表现主要为治疗区域较原灶范围更大的低密度影,形态不规则或呈类圆形。3d-1个月内增强扫描治疗区整体呈均匀低密度,无强化17例;2例治疗区随时间推移范围略变小;1例见治疗区内壁不规则形小片状强化;2例见周边薄壁环状强化。3个月-12个月复查CT平扫4例范围略缩小,增强3例见内壁不规则结节样或小片状强化;3例周边环状强化,其中2例4个月后复查,环状强化消失。结论小肝癌经RFA治疗后的CT表现方式多样,用CT对RFA术后的原发性小肝癌患者进行评价可以了解射频消融效果。

稠油油田蒸汽吞吐动态预测方法研究

通过对稠油油田蒸汽吞吐动态与常规油田注水开采动态的类比统计分析,提出一种类似于水驱特征曲线预测蒸汽吞吐动态的方法。通过对实际蒸汽吞吐动态拟合和预测,认为该方法简单实用,其结果可作为稠油蒸汽吞吐工程设计或动态分析的依据。

染料木素对性成熟前小鼠卵巢卵泡发生动力学的影响

【目的】旨在探究染料木素对性成熟前小鼠卵巢卵泡发生动力学的影响,为畜牧生产尤其是种猪饲养过程豆粕型日粮的合理饲喂以及黄酮类替抗产品的科学应用提供参考。【方法】将40只21日龄昆明小鼠随机分为4组,其中对照组处以0.1 mL的溶剂(含5%DMSO的玉米油),试验组分别处以等体积不同浓度的染料木素(25 mg/kg、50 mg/kg和100 mg/kg),连续腹腔注射7 d。处理结束后,对部分小鼠进行PMSG-HCG促排并记录输卵管壶腹部的卵子数量,评估卵巢排卵潜能;剩余小鼠采集卵巢制成组织切片进行HE染色,统计分析卵巢内各级卵泡生长和闭锁状态。【结果】输卵管壶腹部成熟卵子数统计显示,染料木素处理组的卵子数量较对照组均显著增加(P<0.05),其中50 mg/kg染料木素组卵子排出数量最多,且显著高于25 mg/kg和100 mg/kg剂量组(P<0.05),而25 mg/kg和100 mg/kg剂量组之间差异不显著(P>0.05)。卵泡计数结果显示,染料木素处理组生长卵泡总数较对照组均无显著差异,但健康生长卵泡显著高于对照组(P<0.05),闭锁生长卵泡则反之(P<0.05)。另外,3个剂量的染料木素处理组中正常原始卵泡的数量均高于对照组,且50 mg/kg和100 mg/kg剂量组较对照组增加显著(P<0.05);而异常原始卵泡的数量在染料木素处理组中均显著下降(P<0.05)。再者,50 mg/kg和100 mg/kg染料木素处理组的多卵母卵泡数量显著高于对照组和25 mg/kg剂量组(P<0.05)。【结论】染料木素以剂量依赖性方式抑制原始卵泡消亡和生长卵泡闭锁,促进生长卵泡发育成熟,从而提高卵巢排卵潜能,其中以50 mg/kg剂量的染料木素效果最佳。

蜜蜂脑的神经解剖结构

蜜蜂是继果蝇之后又一新兴的模式生物。其中,蜜蜂脑的研究已成为全球脑科学研究专家的焦点。系统阐述了蜜蜂脑的组成,神经器官的解剖结构及其功能。

稠油油田蒸汽吞吐动态预测方法研究

本文通过对稠油油田蒸汽吞吐动态与常规油田注水开采动态进行类比统计分析研究,建立应用一种类似于水驱特征曲线预测蒸汽吞吐动态的简单方法。通过对实际蒸汽吞吐动态拟合和预测表明,该方法简单实用,可作为稠油蒸汽吞吐过程中工程设计或动态分析的依据。

油气开采技术专业生产实习的现状与思考

针对油气开采技术专业生产实习时学生生源复杂、基础差、学习积极性不高、指导教师年轻化和指导经验不足以及高等教育大众化带来的教育环境退化等问题,本文从生产实习的重要性、实习内容、实习方式、考核方式、质量保障等方面进行思考,就就业和发展两个方面阐述了生产实习的重要性。结合毕业后的就业单位和就业岗位,确定生产实习的内容;依托校内和校外两个实习基地,确定实习方式;按照"选拔优秀、合理分级、兼顾就业"的原则,确定以现场口试为中心的考核体系;将健全的制度、切实可行的实习方案、稳定的实习基地、强干的指导队伍、合理的实习质量评价指标、完善的实习质量评价方法以及完善的校企合作机制,作为生产实习质量的保证。通过实施上述想法,保证油气开采技术专业的生产实习效果,提高人才培养质量。

甲状腺素对猪卵巢卵泡颗粒细胞类固醇激素合成及增殖的影响

[目的]本试验旨在探究甲状腺素对猪卵巢卵泡颗粒细胞类固醇激素合成功能以及增殖的影响。[方法]首先采用免疫组化法鉴定甲状腺素受体(TRα/β)在猪卵巢组织的表达情况,随后体外培养猪卵巢原代颗粒细胞,选取低(10-8mol·L^(-1))、中(10-7mol·L^(-1))、高(10-6mol·L^(-1))3种浓度的甲状腺素(T4)孵育24 h,采用酶联免疫法检测细胞培养液中孕酮(P4)和雌二醇(E2)水平,并采用蛋白印迹法检测颗粒细胞内激素合成相关酶蛋白(3β-HSD、CYP19)的表达情况。采用MTT法检测各浓度甲状腺素对细胞活力的影响,利用增殖细胞核抗原(PCNA)免疫荧光染色验证不同浓度甲状腺素对颗粒细胞增殖的影响。[结果]免疫组化结果显示:TRα/β在猪卵巢不同发育阶段卵泡的颗粒细胞、膜细胞中有广泛表达,在卵母细胞的胞质中也有分布,在闭锁卵泡中也见明显表达。猪卵巢原代颗粒细胞经甲状腺素处理后,细胞培养液中的孕酮和雌激素水平都显著低于空白对照组(P<0.05),并且各剂量处理组间孕酮呈现出剂量依赖性降低趋势;雌激素在低浓度和高浓度甲状腺素处理组较中浓度处理组高。蛋白免疫印迹结果显示:与对照组相比,3β-HSD和CYP19蛋白在较高浓度甲状腺素(10-7和10-6mol·L^(-1))处理组的表达量均显著降低(P<0.05);而在低浓度甲状腺素(10-8mol·L^(-1))处理组,CYP19蛋白表达量显著降低(P<0.05),但3β-HSD蛋白表达无显著差异。此外,MTT细胞毒性和增殖试剂盒检测结果显示:不同浓度甲状腺素处理并不影响细胞活力,这与PCNA免疫荧光强度统计结果一致,进一步证实了甲状腺素对原代颗粒细胞增殖没有影响。[结论]甲状腺素能够作用于卵巢颗粒细胞,干扰类固醇激素的合成,其作用机制可能是通过改变激素合成相关蛋白3β-HSD和CYP19的表达来完成的。而甲状腺素对颗粒细胞激素合成的干扰效应并不影响细胞增殖状态。

丁酸钠与沸石混合添加对蛋鸡盲肠内容物体外发酵的影响

为探究丁酸钠与沸石混合添加对蛋鸡盲肠内容物体外发酵过程中产氨量及微生物群落变化的影响。试验选取10只30周龄、体重(1.5±0.1)kg的白来航蛋鸡,取其盲肠内容物获取体外发酵菌源,将发酵菌源与发酵底物添加到发酵瓶中,随后依据质量比将试验分为4组:对照组(无任何添加,CT组),添加0.15%丁酸钠组(A组),添加1.5%沸石组(B组)及添加0.15%丁酸钠+1.5%沸石组(C组),每组4个重复,每个重复1个发酵瓶。通入CO_(2)排净空气后,39℃环境下进行12 h体外发酵模拟试验,发酵结束后比较各组之间的氨气产量、尿素含量、脲酶活性以及微生物群落差异。试验结果表明:混合添加组发酵产物中氨气产量为10.84μg,显著低于其他3组(P<0.05);脲酶活性为0.45 mg/mL·24 h,显著低于其他3组(P<0.05)。尿素含量为0.175 mmol/L,显著高于其他3组(P<0.05)。与对照组相比,混合添加组属水平中拟杆菌属相对丰度增加6.8个百分比,乳酸杆菌属增加2.48个百分比。综上所述,与单一添加丁酸钠或沸石相比,丁酸钠与沸石混合添加在体外发酵条件下可更有效减少氨气产生,同时改善盲肠内容物中微生物结构。