医学八年制分子生物学教学改革的报告

通过课程体系优化与教学内容更新,创新教育教学方法,改革教学模式,完善评价考核方法,建立全过程评定体系等教学改革措施,分子生物学在教学中落实实施卓越医生教育培养计划,以八年制医学教育为基础开展拔尖创新医学人才培养综合改革试点,进一步提升教学水平和教学质量。

利用菊粉产山梨醇酵母融合菌株的构建

介绍高产菊粉酶的克鲁维酵母 (K luyveromyces sp.) Y85菌株与产山梨醇的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) E15菌株 ,通过属间原生质体融合构建直接利用菊粉产山梨醇的酵母融合菌株 .结果认为 ,以 0 .1% EDTA-巯基乙醇为脱壁预处理剂 ,蜗牛酶浓度 2 % (W/V) ,酶解温度 30℃ ,E15和 Y85两菌株细胞酶解时间分别为 4 0 min和 30 min,原生质体形成率和再生率分别达90 %和 2 5 %以上 .融合的适宜条件为 :添加 30 % (W/V) PEG和 10 mmol/L Ca Cl2 ,融合时间为 30min,融合率可达 2 .64× 10 -6 以上 .利用两亲株自然性状差异检出融合菌株 ,并经 DNA含量、菊粉酶活性、细胞形态与大小、菌落形态等测定加以确证 .其中 F2 7融合菌株在适宜条件下 ,山梨醇摇瓶发酵产量可达 4 .87g/10 0 m L。

稻瘟菌诱导的水稻WRKY基因OsWRKY52的分离和鉴定(英文)

WRKY蛋白参与植物对生物或非生物胁迫反应和一些发育、代谢过程,在植物中组成一个转录因子大家族.从水稻cDNA文库中分离到一个新的WRKY基因——OsWRKY52cDNA,包括一个1719bp的开放读码框,推测编码一个由572个氨基酸组成的蛋白质,与燕麦(Avenasativa)AsWRKY1具有54%的氨基酸一致性.该基因被非亲和性稻瘟菌快速诱导.凝胶阻滞实验结果表明,原核表达的OsWRKY52能与水稻PR1a启动子上的W盒元件特异结合.采用酵母单杂交体系的方法证明了OsWRKY52具有转录激活活性,其丝氨酸岛、苏氨酸岛和C端的富酸性氨基酸区是负责转录激活的区域.这些结果提示OsWRKY52作为一个转录激活子,可能参与植物对稻瘟菌的应答反应.

八年制医学生早期科研训练模式的探索与思考

八年制医学教育是一种精英教育,目的在于培养具有国际竞争力的高素质临床医学专门人才。培养八年制医学生的科研能力和创新精神,对其适应二十一世纪的挑战至关重要。在基础医学阶段,积极开展多种形式的早期科研训练,提高八年制医学生的科研素养、创新思维和转化医学科学研究能力,为其未来的发展打下坚实基础。

酵母属间融合菌株F27山梨醇发酵适宜条件的研究

报道了酵母属间融合菌株F2 7利用菊粉进行山梨醇发酵适宜条件的研究结果。其适宜的发酵培养基组成为 (% ) :菊粉 (以总糖计 ) ,10 ;酵母膏 ,2 .5 ;葡萄糖 ,1.0 ;MnSO4 ,0 .1。适宜的发酵条件为 :培养基初始 pH5～ 6 ,接种量 10 % (V/V) ,温度 35℃。该菌株经摇瓶发酵 72h后 ,山梨醇产量可达 4 .87g/ 10

MYETS1基因的原核表达及其在多发性骨髓瘤细胞系中的缺失分析

目的:初步探讨MYETS1基因在多发性骨髓瘤细胞系ARH-77及KM3中表达下调机制及进行MYETS1基因原核表达分析。方法:运用FISH技术检测两株ARH-77和KM3细胞系染色体13q14.3区域缺失情况;RT-PCR扩增MYETS1基因,并构建pGEX-4T-MYETS1重组载体。结果:ARH-77和KM3细胞系中MYETS1基因所在染色体13q14.3区域获得未缺失阳性信号;生物信息学分析MYETS1基因与LECT1基因序列同源,但通过RT-PCR实验证实MYETS1基因开放阅读框与LECT1基因开放阅读框不一致;成功获得MYETS1基因原核表达蛋白产物。结论:ARH-77和KM3两株骨髓瘤细胞系中MYETS1基因所在染色体13q14.3区域未发生缺失,其在多发性骨髓瘤细胞中表达下调可能存在其他机制。

AB血清对人体外终末期红系分化进程的影响

目的:探究体外诱导造血干细胞向红系分化过程中AB血清对终末期红系分化进程的影响。方法:从脐带血中用免疫磁珠法分离提取CD34+细胞,体外诱导其向红系分化。根据培养体系中是否添加AB血清,设置实验组为添加AB血清组,对照组为不添加AB血清组。通过检测细胞表面红系分化标志分子糖化血红蛋白A(glycophorin A,GPA)、人红细胞阴离子交换蛋白Band3及整合素α4(α4-integrin)的表达反映终末红系分化进程,用流式细胞术检测红系细胞终末分化脱核情况。结果:与对照组相比,实验组GPA阳性细胞百分率较高,Band3表达较高,而α4-integrin表达较低(P<0.05)。实验组细胞脱核百分率明显高于对照组(P<0.05)。结论:在体外红系发育培养体系中,AB血清对终末期红系分化进程有一定的促分化、促脱核作用。

水稻WRKY89中的亮氨酸拉链结构增强蛋白与W盒元件的相互作用

WRKY蛋白是一类参与植物生物和非生物胁迫反应、代谢、发育等过程的转录调节因子.水稻WRKY89与其他的WRKY成员同源性较低,推测由263个氨基酸组成,其N端带1个可能的亮氨酸拉链结构.采用pET-29b载体原核表达了OsWRKY89和其3个N端缺失的衍生物,并采用Ni柱的方法对表达的蛋白进行了纯化.凝胶阻滞结果表明,OsWRKY89能与含顺式元件W盒的DNA序列特异结合,而缺失N端亮氨酸拉链的OsWRKY89与该元件的结合能力显著下降.酵母双杂交结果表明,亮氨酸拉链样结构参与OsWRKY89蛋白的同源相互作用.进一步缺失OsWRKY89至部分WRKY结构域导致表达的蛋白完全丧失与上述元件的结合活性,表明WRKY结构域是DNA结合中不可缺少的.这些结果说明亮氨酸拉链结构在蛋白质与蛋白质互作和DNA与蛋白质中起重要作用.

表达Cryptogein基因的烟草抗病性和耐盐性增强

隐地蛋白(cryptogein, Crypt)是由隐地疫霉(Phytophthora cryptogea)分泌的一种分子量约为10 kD的蛋白类激发子. 用农杆菌介导的叶盘转化法获转Crypt (PAL::Crypt)和CryK13V (CaMV35S::CryK13V) 基因的烟草植株. 接种试验结果表明, T2代转基因烟草株系对黑胫病菌(Phytophthora parasitica var nicotiana, Ppn)、赤星病菌(Alternaria alternata)和野火病菌(Pseudomonas syringae pv tabaci)的抗性显著增强. Northern杂交和RT-PCR分析结果表明, 低水平的表达转化基因Crypt和CryK13V就足以激活PR-1a和PR-5等防卫反应相关基因的表达; 在PAL::Crypt转化系统中, 病原菌Ppn能快速和高水平诱导PR-1a等病程相关基因的表达, 表明诱导型PAL启动子对入侵病原菌能及时识别并快速、有效地激活防卫反应, 从而赋予转基因植株抵抗病原菌侵染的能力. 研究还发现, 表达Crypt和CryK13V基因的烟草植株耐盐性比对照明显提高, 转化株系中高水平组成型表达PR基因和转录因子可能与耐盐性增强有一定正相关性. 上述结果表明, 植物对生物和非生物逆境的抗性途径和机制存在着交叉.

Ⅲ型胶原基因COL3 A1多态性与脑梗死的相关性

目的 探讨湖南人群中COL3A1基因多态性与脑梗死疾病有无相关性。方法 收集脑梗死患者血样标本110例（包括散发和脑梗死家系的患者）及健康对照血样标本70例。采用聚合酶链反应-简单序列长度多态性（PCR-SSLP）及产物测序分析检测COL3A1基因的多态性。结果 湖南地区汉族脑梗死患者COL3A1基因多态位点基因分布与对照组相比，等位基因片段分布的频率不同，COL3A1基因等位基因型COL3A1-3基因频率分布（0．93）显著高于健康对照组（0．43），差异有统计学意义（χ^2=20．487，P〈0．01）。散发组脑梗死患者和家系组患者各基因分布差异无统计学意义。结论 COL3A1多态分布无明显年龄性别差异，COL3A1基因25号内含子VNTR多态可能与脑梗死的发病有关。

国内生物科学本科专业培养方案比较研究

对国内某些高校而言,生物科学专业是产生大量科研成果与培养高层次人才的热门专业,但该专业的全国平均就业率却很低。针对此现状,作者对比研究了目前国内就业情况良好、科研产出较多的5所高校的生物科学专业的本科培养方案。研究表明,合理的学分分布与较多的专业选修课等是生物科学专业可持续发展的坚实基础。同时,本文还指出了5大高校现行培养方案中的不足。

医学八年制分子生物学双师讨论课堂初探

为了实现临床医学拔尖创新人才的培养目标,中南大学医学八年制的分子生物学教学多年来一直坚持以学生为中心的讨论式和案例式小班教学。鉴于分子生物学与现代精准医学的交叉融合发展,现打破专业限制,围绕"分子生物学在精准医学中的应用与发展"主题,我校为医学八年制学生开设由"分子生物学基础课程教师"和"临床医学专业教师"同台授课的双师讨论课堂。从教学内容、教师组合、课前组织到课堂实施,每一环节都精心安排。双师讨论课堂教学模式体现了学生主体的特点,实现了不同专业背景教师同台授课,突出了精准医学特点,推动了学生从"分子生物学基础课学习"跨度到"专业能力和创新意识培养",最大程度提升了教学效果。

高校重点学科在八年制医学生早期科研训练中的作用

高校重点学科在八年制临床医学专业学生实验技能与科研创新培养方面具有重要的作用.本文就如何运用、发挥分子生物学重点学科研究基地、人才培养基地的资源优势与科研平台优势,构建适合八年制医学生的创新型人才培养的开放管理模式与具体实施方案进行了探讨,并在八年制医学生早期科研训练实践中加以更新完善.

丝氨酸蛋白酶抑制剂亚家族在免疫调节中的作用

丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine proteinase inhibitor,SERPIN)是一类分布广泛的蛋白酶抑制剂超家族,在体内生理及病理过程中起重要的调节作用。细胞外SERPIN主要是SERPINA亚家族,其中SERPINA1在体内可抑制TNF-α介导的细胞死亡、调节脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的促炎症因子及抗炎症因子的表达和释放来调节天然免疫,SERPINA3可抑制组织蛋白酶G、MMP-9等抑制过度免疫损害,SERPINA3N可抑制颗粒酶B使宿主细胞介导的免疫反应失活。本文主要以这三个亚家族成员为代表,探讨A亚家族在免疫调节过程中的作用。