植物雄激素在治疗良性前列腺增生中的作用

良性前列腺增生(Benign prostatic hyperplasia,BPH)是老年男性常见的泌尿系统疾病。体内包括睾酮(testosterone,T)和双氢睾酮(dihydrotestosterone,DHT)在内的雄激素水平升高,与BPH的发生和发展密切相关。目前,临床上治疗BPH的药物主要包括5α-还原酶抑制剂和α-受体阻滞剂两种类型,在降低异常雄激素信号通路水平的同时,也会带来一些不可忽视的副作用。最近,多种天然草药,如补阳类的中药(traditional Chinese medicine,TCM),被证实具有雄激素样的活性能有效治疗BPH。本文综述了植物雄激素的雄激素活性及其在BPH中的治疗作用,进一步总结其作用机制,为植物雄激素作为选择性雄激素受体调节剂的研究提供了证据。

基于实验和网络药理学探讨丹知青娥方改善下尿路症状的作用和分子机制

[目的]明确丹知青娥方(DZQE)是否具有调节膀胱功能改善男性下尿路症状(LUTS)的潜在作用,并预测可能的靶点和通路。[方法]用膀胱灌流法检测DZQE对正常雄性Wistar大鼠排尿参数的影响;分离正常大鼠膀胱逼尿肌肌条,用肌条张力实验检测DZQE对膀胱逼尿肌舒缩的调节作用;在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)和中医百科全书(ETCM)筛选DZQE中的活性成分和靶点信息;通过GeneCards和DisGeNET数据库获取LUTS疾病靶点;筛选DZQE与LUTS的共同作用靶点,并归属其蛋白质类型;通过Cytoscape_v3.7.1软件构建中药-活性成分-作用靶点网络;通过富集分析数据库(DAVID)v6.8对相关靶点进行基因本体论(GO)分析和京都基因与基因组百科全书通路富集分析(KEGG)信号通路富集分析。[结果]DZQE能够降低雄鼠膀胱漏尿点压(DLPP)和最大排尿压(MVP);促进大鼠膀胱逼尿肌收缩,同时抑制氯化钾(KCl)诱导的肌条过度收缩,呈现双向调节效应。筛选得到DZQE中102个活性成分,共对应258个药物潜在靶点,LUTS疾病靶点246个,其中共同作用靶点47个,DZQE可能作用于LUTS的活性成分59个;GO富集分析涉及平滑肌收缩、血管收缩、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联、雌激素应答等生物过程;KEGG分析后得到包括磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKt)、甲状腺激素、钙离子、雌激素、肿瘤坏死因子(TNF)、ErbB、MAPK、转化生长因子β(TGF-β)信号通路等88条信号通路。[结论]DZQE可以通过多条信号通路调节膀胱平滑肌舒缩,改善雄鼠下尿路症状。

丹知青娥方抑制大鼠下尿路症状

目的探究补阳调阴兼活血化瘀的丹知青娥方(DZQE)是否有抑制下尿路症状的作用,并探讨其可能的作用机制。方法用膀胱灌流法检测DZQE对正常雄性Wistar大鼠排尿参数的影响;分离正常大鼠膀胱逼尿肌肌条,用体外张力法检测对本底水平和KCl诱导的肌条收缩舒张的调节作用;通过TCMSP和ETCM数据库获取并分析DZQE的主要活性成分及其作用靶点,通过GeneCards和DisGeNET数据库收集下尿路症状的作用靶点,通过Cytoscape软件构建中药-活性成分-作用靶点网络,通过DAVID 6.8数据库对相关靶点进行基因本体(GO)分析和信号通路富集分析(KEGG),预测DZQE抑制下尿路症状的可能作用靶点和通路。结果DZQE可以明显降低大鼠膀胱漏尿点压(DLPP)和最大排尿压(MVP);增加大鼠膀胱逼尿肌肌条本底水平肌条张力,但抑制KCL诱导的肌条收缩,呈现双向调节效应。经筛选得到DZQE的102个化合物进行靶点预测,其中有28个直接或间接与下尿路症状有关,进一步分析表明DZQE可主要通过调节肾上腺信号通路、钙离子信号通路、雌激素信号通路等发挥调节作用。结论DZQE可以抑制下尿路症状,可能与调节细胞内信号转导抑制平滑肌收缩通路有关。

豆甾醇通过抑制钙离子内流抑制大鼠前列腺间质细胞收缩

[目的]检测豆甾醇对前列腺间质细胞收缩的抑制作用。[方法]体外培养大鼠原代前列腺间质细胞,通过鬼笔环肽染色法对前列腺间质细胞进行表型鉴定;用细胞增殖及乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测豆甾醇对前列腺间质细胞活力和毒性的影响;用胶原凝胶收缩实验检测对前列腺间质细胞收缩功能的影响;运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法研究豆甾醇对收缩相关的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)的mRNA水平表达的影响;用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测豆甾醇对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的α-SMA表达的影响;流式细胞术检测豆甾醇对乙酰胆碱(ACh)诱导的细胞内钙离子浓度的影响。[结果]大鼠原代前列腺细胞培养获得的细胞以间质平滑肌细胞为主;浓度低于10μmol/L的豆甾醇对前列腺间质细胞的活力无明显影响,且无明显毒性;胶原凝胶实验结果显示,血清可以使前列腺间质细胞收缩,差异具有统计学意义(P<0.01),10μmol/L的豆甾醇可显著抑制该收缩作用,抑制率可达到77.1%,差异具有统计学意义(P<0.05);RT-PCR结果显示,豆甾醇显著降低大鼠前列腺间质细胞中α-SMA和CollagenⅠmRNA水平的表达,差异具有统计学意义(P<0.01);Western Blot结果显示,豆甾醇可以抑制TGF-β1诱导的α-SMA蛋白的表达;流式细胞实验发现ACh刺激导致的钙离子浓度明显增加可以被豆甾醇显著抑制。[结论]豆甾醇可抑制前列腺间质收缩,其机制与抑制其钙离子内流有关。