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人表皮生长因子基因的化学合成和克隆及其在酵母中的表达
被引量:
5
1
作者
袁汉英
闵永洁
+7 位作者
石松
陶无凡
吴声积
李育阳
王启松
吕慧梅
张承圭
胡倩
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
1991年第4期300-306,共7页
用固相亚磷酰胺法合成了人表皮生长因子基因,全长为173个核苷酸,它被分成8个寡核苷酸,分别在DNA合成仪上合成。经分离纯化后的寡聚核苷酸进行酶促连接,然后被克隆到噬菌体M13mp18中,克隆经分子杂交、限制酶酶切以及DNA序列分析检测,证...
用固相亚磷酰胺法合成了人表皮生长因子基因,全长为173个核苷酸,它被分成8个寡核苷酸,分别在DNA合成仪上合成。经分离纯化后的寡聚核苷酸进行酶促连接,然后被克隆到噬菌体M13mp18中,克隆经分子杂交、限制酶酶切以及DNA序列分析检测,证明合成的人表皮生长因子基因和设计的完全一致。将人表皮生长因子基因的DNA片段插入酵母分泌型表达载体YFD59 HindⅢ位点中,建成表达人表皮生长因子基因的质粒YFD104,再将此质粒转化酿酒酵母,所得转化子经摇瓶发酵、发酵上清液用受体结合试验表明有人表皮生长因子表达。
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关键词
表皮生长因子
基因
化学合成
克隆
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职称材料
题名
人表皮生长因子基因的化学合成和克隆及其在酵母中的表达
被引量:
5
1
作者
袁汉英
闵永洁
石松
陶无凡
吴声积
李育阳
王启松
吕慧梅
张承圭
胡倩
机构
复旦大学遗传所
南京大学生化系
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
1991年第4期300-306,共7页
文摘
用固相亚磷酰胺法合成了人表皮生长因子基因,全长为173个核苷酸,它被分成8个寡核苷酸,分别在DNA合成仪上合成。经分离纯化后的寡聚核苷酸进行酶促连接,然后被克隆到噬菌体M13mp18中,克隆经分子杂交、限制酶酶切以及DNA序列分析检测,证明合成的人表皮生长因子基因和设计的完全一致。将人表皮生长因子基因的DNA片段插入酵母分泌型表达载体YFD59 HindⅢ位点中,建成表达人表皮生长因子基因的质粒YFD104,再将此质粒转化酿酒酵母,所得转化子经摇瓶发酵、发酵上清液用受体结合试验表明有人表皮生长因子表达。
关键词
表皮生长因子
基因
化学合成
克隆
Keywords
Chemical synthesis of the gene
human epidermal growth factor
secretory expression vector
yeast
分类号
R394.8 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人表皮生长因子基因的化学合成和克隆及其在酵母中的表达
袁汉英
闵永洁
石松
陶无凡
吴声积
李育阳
王启松
吕慧梅
张承圭
胡倩
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
1991
5
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