海南地区产质粒介导AmpC酶和ESBLs大肠埃希菌的耐药性分析

目的分析海南地区产质粒介导AmpC酶和ESBLs大肠埃希菌的耐药性,指导临床合理使用抗生素。方法收集海南地区2009年8所医院临床分离不重复大肠埃希菌540株,通过表型筛选试验、三维试验和PCR扩增试验检测质粒AmpC酶基因型;用确证试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs);用K-B法进行药物敏感试验。结果 540株大肠埃希菌中,检测出6株(1.1%)产CMY-2型质粒AmpC酶,258株(47.8%)单产ESBLs,4株(0.7%)同产质粒AmpC酶及ESBLs。非产酶株与产酶株(单产质粒AmpC酶、单产ESBLs或同产质粒AmpC酶及ESBLs)对13种抗菌药物耐药率差异具有统计学意义(P<0.05)。结论产ESBLs和AmpC酶是大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因,建议对产酶菌株临床经验用药可选用碳青霉烯类抗生素。

2011年度海口市人民医院细菌耐药性监测

目的分析海口市人民医院2011年临床分离细菌对抗菌药物的耐药性。方法采用纸片扩散法(K-B法)对2011年度临床分离菌株进行药敏试验,结果按CLSI 2011年版标准判读,用Whonet 5.6软件进行耐药性分析。结果 2011年共收集非重复临床分离菌株3 978株,其中革兰阴性菌占79.2%(3 150/3 978),革兰阳性菌占20.8%(828/3 978)。MRSA和MRCNS检出率分别为36.3%和81.7%,未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药的葡萄球菌。检出万古霉素耐药的粪肠球菌3株和屎肠球菌1株,未发现利奈唑胺耐药株。肺炎链球菌中青霉素耐药株(PRSP)占16.0%。β溶血链球菌对万古霉素、青霉素、氨苄西林和左氧氟沙星均高度敏感。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌中ESBLs阳性率分别为69.8%、47.8%和25.4%,发现对亚胺培南和美罗培南耐药的大肠埃希菌9株和肺炎克雷伯菌9株。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为27.4%和21.1%。鲍曼不动杆菌对11种抗生素的耐药率均在30%以下。左氧氟沙星和复方新诺明对嗜麦芽窄食单胞菌有较好的抗菌活性(耐药率<10%)。结论 2011年该院分离的细菌以革兰阴性杆菌为主,临床分离细菌对常用抗菌药物呈不同程度的耐药,检出对万古霉素耐药的肠球菌和对碳青霉烯类抗生素耐药的肠杆菌科细菌,应引起重视。

海南地区多重耐药肠杆菌科细菌产NDM-1酶现状调查

目的了解海南地区多重耐药肠杆菌科细菌产新德里金属β-内酰胺酶1(NDM-1酶)现状,为临床做好预防和控制提供依据。方法收集海南地区2012年8月至2013年8月临床分离的多重耐药肠杆菌科细菌425株,采用Vitek 2 Compact全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定和药敏试验,对亚胺培南最低抑菌浓度(MIC)≥2μg/mL的菌株采用双纸片增效试验进行NDM-1表型确认,PCR特异性扩增blaNDM-1基因,并对扩增产物进行测序和BLAST比对分析。结果 425株多重耐药肠杆菌科细菌中,大肠埃希菌271株,占63.8%;肺炎克雷伯菌69株,占16.2%;阴沟肠杆菌41株,占9.6%;其他肠杆菌44株,占10.4%。经表型筛查对亚胺培南MIC≥2μg/mL的菌株有38株,双纸片增效试验有18株阳性,其中11株在约813 bp处扩增出blaNDM-1基因目的条带,经测序和比对结果证实为blaNDM-1基因。结论海南地区多重耐药肠杆菌科细菌中检到blaNDM-1基因,临床应加强合理用药并做好预防和控制工作。

海南地区产质粒介导AmpC酶大肠埃希菌基因型研究

目的了解海南地区产质粒介导AmpC酶大肠埃希菌基因型特点。方法收集来自海南地区8所医院2009年度不重复临床分离的大肠埃希菌540株,分别采用纸片扩散法和三维试验进行表型筛选和AmpC酶检测,用接合试验证实酶基因型的转移性,通过PCR检测及序列分析进行质粒AmpC酶基因型确定,用E-Test法对产质粒AmpC酶株进行MIC测定。结果 540株大肠埃希菌中,头孢西丁抑菌环直径≤17 mm的占22.8%(123/540),除五指山市菌株全部对头孢西丁敏感外,其他医院均有对头孢西丁的耐药株。酶提取物三维试验检测阳性的占1.9%(10/540),以PCR方法对10株三维试验阳性大肠埃希菌进行基因检测,结果6株在约462 bp处扩增出条带,经测序和比对结果证实为CMY-2型质粒AmpC酶。10株产AmpC酶大肠埃希菌接合试验有2株接合阳性,接合子均扩增出CMY-2型条带。药敏结果显示6株产质粒AmpC酶大肠埃希菌对3代头孢菌素、氨曲南和含酶抑制剂的敏感性极低,对亚胺培南和美罗培南均敏感。结论海南地区存在产质粒介导的CMY-2型AmpC酶大肠埃希菌,药敏结果显示对3代头孢菌素耐药率极高,但对亚胺培南和美罗培南均敏感。

845例尿路感染患者菌群分布及耐药性分析

目的分析尿路感染患者病原菌的分布特点及耐药现状,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法细菌鉴定采用法国生物梅里埃公司VITEK32细菌鉴定系统及配套试剂。药敏试验采用纸片扩散法(K-B法),结果按CLSI2010年版标准判读,用WHONET 5.4软件进行耐药性分析。结果 845例分离菌株中,革兰阴性杆菌占61.8%(522/845),革兰阳性球菌占29.6%(250/845),真菌占8.6%(73/845)。大肠埃希菌是尿路感染的主要致病菌,占35.3%(298/845),其次为肠球菌,占20.9%(177/845)。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs检出率分别为68.8%和49.1%,发现碳青霉烯类抗菌药物耐药的肠杆菌科细菌。检出万古霉素耐药的粪肠球菌5株和屎肠球菌2株。结论大肠埃希菌仍是尿路感染的主要病原菌,碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌和VRE的感染应引起重视。

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌分子生物学研究

目的对海南地区耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌进行碳青霉烯酶基因检测,为院内感染控制和流行病学研究提供依据。方法收集海南地区四家医院2012年8月-2013年8月临床分离的碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌33株,用VITEK 2 compact进行细菌鉴定和药敏试验,采用改良Hodge试验(MHT)和双纸片增效试验分别进行碳青霉烯酶表型确认,对于阳性菌株,设计通用引物行PCR检测KPC、NDM-1、IMP、VIM、SME、OXA-23和NMC 7种基因,并对扩增产物进行测序和BLAST分析。结果 33株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌中MHT试验有22株阳性,双纸片增效试验有18株阳性,经PCR方法对阳性菌株进行基因检测,11株携带NDM-1基因,3株携带KPC-2基因,1株携带IMP-4基因;其中有一株产酸克雷伯菌同时携带KPC-2、NDM-1和IMP-4三种基因,携带碳青霉烯酶基因的菌株对β-内酰胺类抗菌药物呈高度耐药,仅对阿米卡星的敏感性较高。未检测出VIM、SME、NMC和OXA-23基因。结论海南地区肠杆菌科细菌耐碳青霉烯类抗菌药物主要机制为产生NDM-1、KPC-2和IMP-4基因,临床上应引起重视,要严格做好预防和控制工作。

血培养阳性患者病原菌分布及耐药性分析

目的分析血液感染患者的病原菌分布特点及耐药特性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法收集临床血培养阳性患者560例,菌株用VITEK 2 compact鉴定到种,药敏试验采用纸片扩散法(K-B法),结果按临床实验室标准化协会(CLSI)2010年版标准判读,用WHONET 5.6软件进行耐药性分析。结果 560例患者共分离出568株菌,其中革兰阴性菌占68.0%(386/568),革兰阳性球菌占29.0%(165/568),真菌占3.0%(17/568)。大肠埃希菌分离率最高为34.9%(198/568);其次为肺炎克雷伯菌为16.9%(96/568);葡萄球菌中以凝固酶阴性葡萄球菌检出率最高为15.5%(88/568);金黄色葡萄球菌为9.0%(51/568)。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物100%敏感,对其他抗菌药物有不同程度的耐药;未发现对万古霉素耐药葡萄球菌。结论血液感染菌株以革兰阴性菌为主,大肠埃希菌是主要感染细菌,凝固酶阴性葡萄球菌的感染不容忽视。

海南地区类鼻疽伯克霍尔德菌感染特点及其耐药性

收集海南地区确诊类鼻疽伯克霍尔德菌感染病例82例,采用药敏纸片扩散法对菌株进行药敏试验。发现类鼻疽感染病例中,以败血症多见(占41.5%),其次是肺部感染、肝脓肿,还可见肾脓肿、溃疡感染、尿路感染等。类鼻疽伯克霍尔德菌对亚胺培南和美洛培南的耐药率最低,其次为头孢他啶、哌拉西林/三唑巴坦等。提示类鼻疽伯克霍尔德菌是引起败血症、肺部感染和肝脓肿的主要致病菌,其对多种常用抗菌药物耐药率较高,必须引起临床的高度重视。

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率及其耐药率,为临床合理使用抗生素提供依据。方法收集2007年1～12月海口市人民医院临床各类标本中分离出(非重复)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,采用CLSI推荐的K-B法和表型确证试验分别对其进行药敏试验和ESBLs检测。采用WHO推荐的Whonet5.4软件进行耐药率统计分析。结果2007年海口市人民医院共分离出278株大肠埃希菌和220株肺炎克雷伯菌,其中产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别为69.1%(192/278)和45.9%(101/220),ES-BLs阳性的菌株对同一类抗生素的耐药率均高于ESBLs阴性的菌株(P(0.05),其中产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢噻肟的耐药率分别为81.7%和64.4%,对头孢西丁的耐药率分别为39.6%和31.8%,未发现对碳青酶烯类药物(亚胺培南、美洛培南)耐药的菌株。结论开展检出菌产ESBLs的检测,以便临床根据药敏试验结果合理使用抗生素,对预防和控制ESBLs的产生及传播十分重要。

氧净(Oxyplates^(TM))厌氧菌培养法的实验室应用

目的 了解氧净 (OxyplatesTM)厌氧菌培养法对厌氧菌的分离情况。 方法 比较氧净 (OxyplatesTM)厌氧菌培养法和厌氧袋培养法分离检测正常人群肠道中的厌氧菌。 结果 氧净 (OxyplatesTM)厌氧菌培养法分离到厌氧菌2 62株 ,厌氧袋培养法分离到厌氧菌 2 60株 ,两种方法比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。 结论 氧净 (OxyplatesTM)厌氧菌培养法能较好地分离出厌氧菌 ,易于实验室使用和保存 。

重症监护病房患者细菌感染分布与耐药性分析

目的了解院重症监护中心(ICU)细菌检出率、分布及耐药特点,为临床治疗和合理使用抗生素提供依据。方法用VITEK32全自动微生物分析仪鉴定细菌,用纸片扩散法(K-B法)对常用抗菌药物进行耐药性测定。结果在254份检出细菌阳性标本中共培养出287株细菌,其中革兰阴性杆菌225株(78.4%),革兰阳性球菌41株(14.3%),念珠菌21株(7.3%),检出菌来自呼吸道标本占63.4%,其他标本各占5%左右;细菌检出占构成比前三位的依次为铜绿假单胞菌19.5%、肺炎克雷伯菌16.7%、大肠埃希菌14.3%;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌和耐万古霉素的肠球菌的发生率分别为88.2%、70.0%和11.1%;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检出率分别为68.6%和65.2%,铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率为40.2%;白色念珠菌对氟康唑的耐药率为81.3%,对两性霉素的耐药率为3.2%。结论ICU病房革兰阴性杆菌感染仍占主导地位,革兰阴性杆菌对氨苄西林耐药率最高,对亚胺培南耐药率最低(嗜麦牙窄食单胞菌除外),产ESBLS多重耐药;革兰阳性球菌对阿齐霉素耐药率最高,对万古霉素耐药率最低。

2012年度海口市人民医院细菌耐药性监测

目的分析海口市人民医院2012年临床分离细菌对抗菌药物的耐药趋势。方法用VITEK 2compact鉴定仪对细菌进行鉴定,采用纸片扩散法(K-B法)、仪器法和E-test法对2012年度临床分离菌株分别进行药敏试验,结果按CLSI 2012年版标准判读,用WHONET5.6软件进行耐药性分析。结果 2012年共收集非重复临床分离菌株3746株,其中革兰氏阴性菌占78.8%(2950/4746),革兰氏阳性菌占21.2%(796/3746)。MRSA和MRCNS检出率分别为35.4%和69.9%,未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药的葡萄球菌和肠球菌。肺炎链球菌中青霉素耐药株(PRSP)为26.7%。β溶血链球菌对万古霉素、青霉素、氨苄西林和头孢吡肟均高度敏感。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs阳性率分别为59.0%和35.8%,发现对亚胺培南和美罗培南耐药的大肠埃希菌3株和肺炎克雷伯菌2株。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为17.6%和14.5%。鲍曼不动杆菌对11种抗生素的耐药率均在30%以下。左氧氟沙星和复方新诺明对嗜麦芽窄食单胞菌有较好的抗菌活性(耐药率<10%)。结论 2012年该院分离的细菌主要以革兰氏阴性杆菌为主,临床分离细菌对常用抗菌药物呈不同程度的耐药,未检出对万古霉素耐药的肠球菌和葡萄球菌,肠杆菌科细菌对碳青霉烯类药物呈较低水平耐药状态,应继续做好对该类药物的保护。

慢性前列腺炎患者病原菌检出分布及其耐药性

目的了解慢性前列腺炎患者病原菌分布情况及其耐药性。方法用Mears2Stamey四杯法[1]采集患者的前列腺液进行细菌培养和药敏试验。结果208例慢性前列腺炎患者中115例分离出细菌119株,阳性率为55·3%,4例为混合感染。细菌种类有14种,其中革兰阳性菌占82·4%,以凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)为主占52·9%;革兰阴性菌占17·6%,以大肠埃希菌占优势(10·9%)。细菌对临床常用抗菌药物的耐药率普遍较高,葡萄球菌属中耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRSCN)高达77·8%,对万古霉素、克林霉素、左旋氧氟沙星和复方新诺明的敏感性较好;大肠杆菌仅对亚胺培南和阿米卡星显示较好的敏感性。结论及时了解慢性前列腺炎患者病原菌的分布及其耐药性,对诊断和治疗慢性前列腺炎具有重要的意义。

海南地区类鼻疽伯克霍尔德菌的药物敏感性分析

目的探讨海南地区类鼻疽伯克霍尔德菌(BP)对常用抗生素的敏感性。方法以2008年1月—2013年3月在海南地区患者中分离的101株非重复类鼻疽伯克霍尔德菌作为研究对象,采用E-test法对目前国际上常用于治疗类鼻疽的抗生素进行药物敏感试验分析。结果本实验收集的101株类鼻疽菌中主要是以败血症为主,共有60人(59.4%),其次是肺部感染22人(21.8%),伤口及皮肤软组织感染有17人(16.8%),尿路感染2人(2.0%),受试者总死亡率为17.8%(18/101),其中72.2%(13/18)的死亡患者见于败血症患者。体外药敏试验结果显示,本次分离的所有类鼻疽对美罗培南、亚胺培南、左氧氟沙星、头孢他啶和阿莫西林/克拉维酸均显示良好的敏感性,敏感率分别为100%、100%、94.4%、92.1%和90.1%。对四环素和复方磺胺甲噁唑的敏感率分别为85.1%和84.2%。结论本研究和其他地区的报道都证实了类鼻疽伯克霍尔德菌对目前国际上常用于治疗该疾病的抗生素呈现良好的敏感性,其中以亚胺培南和美罗培南的敏感性最好,可作为治疗的首选。

海南地区类鼻疽病流行病学调查和耐药性研究

目的了解海南地区类鼻疽病流行病学特点和耐药性。方法采用回顾性分析方法,总结类鼻疽病的流行病学特点、临床表现、特征以及耐药性情况。结果类鼻疽病在海南以散发为主,各地区的发病率无显著性差异。好发于多雨秋季,接触疫水、免疫功能低下为易感因素。感染以败血症多见,多伴有基础性疾病。类鼻疽伯克霍尔德菌对亚胺培南和美洛培南最敏感。结论类鼻疽伯克霍尔德菌在海南地区广泛存在,加强对本病的认识程度,早期进行细菌培养确诊,及时选用有效的抗生素治疗具有重要意义。

海口市流感嗜血杆菌感染流行病学与病原学特征分析

目的分析海口市流感嗜血杆菌(Hi)感染流行病学与病原学特征。方法对海口各医院送检的咽拭子、痰、脑脊液标本进行Hi培养和鉴定,并对分离的菌株进行血清和生物学分型、β-内酰胺酶和耐药性检测。结果 238例标本中Hi的阳性率为26.1%(62/238),其中咽拭子、痰、脑脊液的阳性率分别为35.7%(45/126)、18.6%(13/70)、9.5%(4/42),差异有统计学意义(P<0.05)。男、女患者阳性率分别为24.3%(25/103)、27.4%(37/135),差异无统计学意义(P>0.05)。≤14岁、14～30岁、31～50岁、≥50岁年龄组Hi阳性率分别为48.4%(45/93)、17.1%(6/35)、14.7%(5/34)、7.9%(6/76),差异有统计学意义(P<0.05)。分离出的62株Hi中有45株(72.6%)为不可分型菌株,其余17株(27.4%)为可分型菌株。在可分型的17株菌株中,以d、e两种血清型为主,分别为23.5%(4/17)和47.1%(8/17)。共检出8个生物型,以Ⅱ、Ⅲ两种生物型为主,分别占35.5%(22/62)和30.6%(19/62)。62株Hi对氨苄西林的耐药率最高,其耐药率为25.8%(16/62),而对头孢唑林和氧氟沙星敏感,敏感率均为100.0%(62/62)。62株Hi的β-内酰胺酶阳性率为16.1%(10/62)。结论海口市Hi感染在儿童中常见,分离的菌株以不可分型、d、e血清型和Ⅱ、Ⅲ生物型为主,对头孢唑林和氧氟沙星敏感。