利用实时荧光PCR方法检测转Bt基因大米

应用实时荧光PCR技术对转基因大米进行了定性和定量检测研究。本研究以转基因Bt63大米为材料,采用TaqMan探针技术,对大米中的内源基因蔗糖磷酸合酶SPS和转基因水稻中普遍存在的外源基因CaMV35S启动子、NOS终止子以及苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简写为Bt)杀虫晶体蛋白基因Cry1Ac进行了实时荧光PCR研究,并对外源基因Cry1Ac进行了定量检测和敏感性分析。该实时荧光PCR方法检测结果和常规PCR结果一致,同时不用进行凝胶电泳,更为快速、简便,降低了污染机会,可用于转Bt基因大米的定性和定量检测。

CNAS实验动物机构认可与AAALAC认证的比较分析

中国合格评定国家认可委员会(China National Accreditation Service for Conformity Assessment,CNAS)实验动物机构认可是我国实验动物管理的重要制度,是致力于保障我国实验动物质量和福利的一项具有中国特色的第三方评价制度。美国实验动物饲养管理评估认证协会(Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care,AAALAC)认证是为全球实验动物管理和使用机构提供动物福利和伦理认证服务的一种评价活动。本文从CNAS与AAALAC的性质、CNAS认可和AAALAC认证本质、评价依据和文件、评审流程、评审人员管理、结果采信等方面进行了比较分析,探讨两项实验动物机构评价制度的差异与特点。

CNAS实验动物机构认可进展

中国合格评定国家认可委员会(China National Accreditation Service for Conformity Assessment,CNAS)实验动物机构认可制是既与国际接轨又符合中国国情的第三方评价制度,与实验动物许可证制度互为补充,是我国实验动物机构管理的一项重要制度。本文介绍了CNAS实验动物机构认可的起源、发展历程、认可现状,以及面临的问题与挑战,并提出了完善实验动物机构认可制度的对策和建议。

流通环节食品安全风险监测工作初探

流通领域食品安全风险监测主要是发现流通领域中主要的食品安全风险,确认不安全食品和风险因子,监测项目包括致病性微生物、农药残留、兽药残留、重金属、过敏原物质以及其他危害人体健康的物质。重点针对婴幼或儿童食品、消费者关注或反映问题较多的食品,以及使用范围广、消费量大的食品。通过对这些食品进行系统、持续的监测,找出其中的带有共性和突出性的规律,为制定食品安全标准及其他相关政策提供依据。我国应建立全国统一的流通领域食品安全风险监测网络体系。

用于转基因检测的番木瓜基因组DNA提取方法的比较

本研究以番木瓜果实的不同部位,果皮、果肉和种籽为材料,比较了改进CTAB法和试剂盒法两种提取基因组DNA的方法。分别对植物叶绿体基因rbcL和番木瓜特异基因Papain进行了普通PCR和荧光PCR扩增,检验提取DNA的质量。结果显示改进CTAB法和试剂盒法都能提取得到纯度较高的DNA,适合普通和荧光PCR反应的要求,适用于外源基因的检测。改进CTAB法提取的DNA浓度要高于试剂盒法,而试剂盒法提取DNA所用的时间较短,更为方便,但成本较高。同时材料取样部位最好是果皮和果肉,果皮和果肉为材料提取得到的DNA纯度很高,适用于荧光PCR的要求。

医学媒介生物领域能力验证现状分析及对策

通过分析医学媒介生物领域能力验证活动的现状,找出存在的问题及原因并提出解决对策,以提高医学媒介生物领域能力验证活动的专业性、实用性和可操作性,提升医学媒介生物领域实验室检测水平。

水稻花药绒毡层特异表达基因RA39的克隆与表达特性分析(英文)

利用cDNA减法杂交、差异杂交筛选和RACE等技术 ,从水稻 (OryzasativaL .ssp .japonica)中克隆了一个新的绒毡层特异性cDNA ,其编码基因被命名为RA39。该cDNA长 10 13bp ,编码由 2 98个氨基酸残基组成的多肽。RA39是一个单拷贝基因 ,在绒毡层细胞中特异性表达 ,在小孢子母细胞减数分裂期的绒毡层细胞中有较高的表达活性。用PSORT和PPSEARCH软件进行的结构分析揭示出RA39蛋白的N端是一个由 17个氨基酸残基组成的信号肽 ,该蛋白包含一个跨膜区和一个胞质尾区两个主要结构域以及多个蛋白激酶的磷酸化位点。

超分枝滚环扩增技术结合试纸法检测食品中多种转基因组分

目的:建立一种基于超分枝滚环扩增技术的试纸检测方法,用于对食品中存在的转基因成分进行定性检测,以实现多组分同时检测。方法:以转基因和非转基因大豆、转基因玉米、转基因马铃薯按比例混合配制的多组分转基因复合材料为研究对象,考察固定有特异性检测探针的硝酸纤维素膜试纸,能否有效检出经连接和滚环扩增获得的反应产物中的转基因组分。结果:3种转基因组分中,无论是采取单组分,还是两两混合或3种同时混合,固定有特异性检测探针的硝酸纤维素膜试纸均可将其检出,准确性为100%;试纸可从基因组DNA中检出100pg/μL的转基因组分,灵敏度满足常规检测要求。结论:初步建立了多组分转基因成分试纸检测方法,其准确性和特异性能够满足常规检测要求。

Julia和R软件在多介质动力学模型建模中的比较

多介质动力学模型在环境风险评估中正得到越来越多的研究和应用。为了选择合适的建模软件,通过构建不同复杂程度的EQC(平衡判据)动力学模型,使用开源软件Julia和R编写模型求解程序,对算法选择、计算效率、模型分析工具和便捷性进行比较。结果表明,在多介质动力学模型计算中,Julia的计算效率是R的至少10倍,且提供了丰富的算法和模型分析工具,对于复杂模型,建议使用Julia计算;但由于目前Julia应用的便捷性不如R,对于简单模型,建议使用R计算。化学物质性质不影响模型的运行时间。lsoda是Julia中求解多介质动力学模型的首选算法,而lsoda和bdf是R中的首选算法。

分析仪器验证机构能力评价研究

本文对分析仪器验证机构的能力评价开展方式进行研究,从我国检验检测机构的能力评价制度现状人手,深入剖析分析仪器验证的适用性;并从分析仪器验证活动的性质展开分析,形成分析仪器验证机构的能力评价的方向和方式,最终提出依据ISO/IEC 17025检测和校准实验室能力的通用要求,结合分析仪器验证的特殊属性,制定分析仪器验证的能力评价技术文件,综合对我国验证机构的技术能力做出评价。

顶空被动加标系统的多介质动力学模型

使用多介质模型建模方法,构建了针对疏水性液体物质的顶空被动加标系统的动力学模型,以浮萍生长抑制试验系统和鱼类胚胎毒性试验系统为例,得出了3种不同性质的疏水性液体物质正壬烷、十甲基环五硅氧烷(D5)和邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)在顶空被动加标系统中的浓度变化,并使用实测浓度对模型进行验证.结果表明,正壬烷和D5在两类系统中平衡24h后,水中浓度便已达到完全平衡时浓度的80%以上,而DEHP的平衡时间很长,不适合使用顶空被动加标系统开展试验,原因是DEHP的挥发性极低.实测浓度和模型预测结果偏差较小.敏感性分析表明,试验系统参数中容器直径对待测物质在水中浓度影响较大,因此可通过调整容器直径来缩短平衡时间,或提高平衡后化学物质在水中的浓度.使用所构建的模型可确定试验系统平衡时间、水中待测物质浓度和待测物质添加体积是否满足试验需求,并可通过敏感性分析来优化试验系统参数,提升试验效率和质量.以上结果完善了顶空被动加标系统应用的理论基础.

关于缺陷食品召回后续处理监管的思考

近年来,我国在食品召回制度建设方面取得了长足进步,已逐步建立起完整的食品召回体系,但由于对召回的缺陷食品后续处理的监管方面还不完善,使得这一制度在保护消费者权益时存在很大的漏洞,很多缺陷食品被召回后往往得不到正确有效的处理,甚至有的不法企业还将召回的缺陷食品"改头换面"后又重新流入市场,危害消费者。北京市工商局技术中心、北京市食品安全监控中心的几名同志撰写的《关于缺陷食品召回后续处理监管的思考》,通过对三聚氰胺毒奶粉"回炉"事件的反思,探讨如何加强对缺陷食品召回后续处理的监管,具有一定的实践指导意义。

生态毒理良好实验室机构的计算机化系统数据完整性管理措施探讨

研究国际重要数据完整性法规的管理要求,为生态毒理良好实验室(GLP)机构的数据质量和可靠性提供合规性管理思路。通过梳理国际主要数据完整性法规的要求,介绍数据完整性监管现状和数据完整性不足引发的管理风险,讨论数据完整性管理措施的建立、验证、使用和维护方法。导致数据完整性问题的根源包括过于依赖人员操作、使用未正确配置和管理的计算机化系统、未充分审核和管理原始数据与记录,GLP机构应从程序管理、行为管理和技术手段3个方面来建立数据完整性管理措施。计算机化系统验证中融入数据完整性管理不仅是未来监管的重点,也是确保数据符合完整性原则的关键。

定量食品微生物能力验证统计方法比较研究

本文针对定量食品微生物能力验证的特点,分析了确定指定值和能力评定标准差的各种方法,包括利用中位值、标准化四分位距、尺度化绝对中位差、算法A和测量方法精密度的统计方法。同时以APLAC T097能力验证结果为例,比较了经典统计和各种稳健统计方法计算结果分散性,以及Z值和经验值进行能力评定的差异。通过各种统计方法的比较研究,提出了适合定量微生物能力验证的统计方法。

流通环节食品安全风险监测工作初探

今年6月1日正式实施的《食品安全法》最大亮点之一就是建立食品安全风险监测评估制度。在本法第二章对该制度进行了详细的规定:国家建立食品安全风险监测制度,对食源性疾病、食品污染以及食品中的有害因素进行监测;国家建立食品安全风险评估制度,对食品、食品添加剂中生物性、化学性和物理性危害进行风险评估;要求各地政府"组织制定、实施本行政区域的食品安全风险监测方案"。由于食品安全贯穿生产、市场、消费等许多环节,跨越多个政府管理部门,通过开展风险监测与评估,预控食品质量,预防食品安全事故,是解决当前食品安全问题的主要途径之一。针对此项新制度,本期杂志集中刊载系统内的相关思考与建议,以期为工商机关开展工作提供思路上的借鉴。

化学品安全评价实验室仪器验证实施探讨

随着人类健康和环境安全越来越受到重视，各国化学品（包括药品、化妆品、食品添加剂、农药、兽药和工业化学品等）登记和监督管理部门对从事化学品安全评价实验室（以下简称安评实验室）的数据质量和有效性提出了更高的要求。安评实验室仪器性能的可靠性和稳定性对于确保数据质量至关重要。

定量微生物能力验证统计方法探讨

一、引言 能力验证作为一种重要的质量控制手段，目前在检验检测领域得到广泛的接受和利用。参加能力验证不仅是国际实验室认可合作组织（ILAC）对认可实验室的要求，也被我国实验室管理部门作为实验室资质认定和监督的手段。

水稻花药发育相关基因OsPRP1的克隆和特性分析

利用减法杂交和RACEs从水稻颖花中克隆了一个编码富含脯氨酸残基多肽的cDNA,并将其相应的基因命名为OsPRP1.OsPRP1由2个外显子和1内含子组成,编码的蛋白由224个氨基酸残基组成,其中脯氨酸含量最高,占14.29％.该蛋白由一个21个氨基酸残基组成的信号肽,一个N-端结构域和一个C-端结构域组成.C-端含有2个18个氨基酸长的、嵌合PEPK基元(motif)的富含脯氨酸的重复序列.Southern blot及序列分析结果表明,水稻基因组中存在4个拷贝的OsPRP1,它们定位在第10染色体的20 kb的DNA片段上.RT-PCR表明,OsPRP1在幼芽和颖花中表达量较高,在根和叶中有少量表达.用花和幼芽进行原位杂交分析证明在花中,OsPRP1在花粉母细胞、绒毡层细胞和花器官的维管束细胞中表达;该基因的表达有明显的时间特异性,在花粉母细胞中表达量最高,在单核期的小孢子中几乎不表达;在芽中,该基因在胚芽鞘和叶原基的表皮细胞中表达.从该基因编码蛋白的特点可以看出它极可能是一种细胞壁蛋白.

我国工业化学品良好实验室规范体系建设探讨

“良好实验室规范”英文为“Good laboratory practice”,通常简称为GLP,GLP的定义是“一种有关非临床人类健康和环境安全试验的设计、实施、查验、记录、归档及报告等的组织过程和条件的质量体系”。GLP规范适用于法规所要求的所有非临床健康和环境安全研究,包括医药、农药、食品添加剂与饲料添加剂、化妆品、兽药和类似产品的注册或申请许可证,以及工业化学品管理,主要目的用于确保GLP实验室向登记管理部门提交的安全性评价数据的真实性和完整性,防止数据造假。