枯草芽孢杆菌α-淀粉酶基因在大肠杆菌中的表达及其产物的分泌

大肠杆菌为革兰氏阴性菌。细胞壁有细胞质膜、肽聚糖、外膜三层结构。细胞质膜与外膜之间称细胞周间。外源蛋白从细胞中分泌到胞外的主要障碍在于外膜。在大肠杆菌中带有信号序列的外源蛋白一般能通过细胞质膜进入细胞周间,但通常不能分泌到胞外。这对基因工程产物的工业化生产不利,所以目前各国都很重视细菌分泌的研究。我们在大肠杆菌中克隆枯草芽孢杆菌α-淀粉酶基因时,得到一株具有较强分泌能力的亚克隆菌株H150。其外源基因表达的淀粉酶大部分被分泌到细胞外培养基中。本文报道该菌株的分泌现象及机制初步研究结果。

嗜热脂肪芽孢杆菌α-淀粉酶基因的亚克隆和表达

α-淀粉酶是芽孢杆菌产生的一种胞外多糖酶（Stephen AO等,1983）,在酒精、啤酒酿造、制糖和纺织工业上广泛使用。国内外科学家相继报道了α-淀粉酶基因的克隆（Palva I,1982; Mielenz JR,1983;Tsukagushi N 等,1984;周建华等,1986;任大明等,1987）,但尚未能结合传统遗传育种方法得到高产的生产菌株。为了进一步研究α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达,本实验将α-淀粉酶基因以很高转化率转化到枯草芽孢杆菌和大肠杆菌中,并能在两种宿主菌中复制和表达四环素抗性功能的穿梭质粒pHY300为载体,α-淀粉酶基因的亚克隆,在大肠杆菌HBl01中获得了表达,并将重组穿梭质粒pLE24转化到枯草芽孢杆菌168中。 1 材料和方法 1.1 材料 含有2.8Kb嗜热脂肪芽孢杆菌α-淀粉酶基因插入片段的质粒Pα 102系本实验室以质粒pUC 19为载体,利用鸟枪法从嗜热脂肪芽孢杆菌（As1999）中克隆得到的。穿梭质粒pHY 300,购自日本宝酒造株式会社。大肠杆菌HB101(hsdR,hsdM,recAl3,supE-44,lacY,leuB6,thi-1)

基于面心立方设计的多翼离心风机性能优化

为提高油烟机的气动性能,基于计算流体力学(CFD)的方法对其内置的多翼离心风机进行多工况优化设计。选取叶轮进口角β_(1)、叶轮出口角β_(2)、蜗舌相位角φ和蜗舌半径R这四个设计参数,以最大流量和最高效率工况下的风机静压和风机效率为优化目标,采用面心立方设计方法进行四因素三水平的抽样来获取一组样本数据,并结合响应面模型和单纯形算法求得约束范围内的最优解。研究表明,优化后的叶轮靠近蜗舌上游区域的出口速度明显增大,蜗壳出口段扩压能力增强,风机静压最大提升幅度接近10Pa,全压效率在两工况下提升幅度在1.2%~2.4%之间。

鸡马立克氏病三价苗的免疫效果观察

用中国农科院哈尔滨兽医研究所研制的马立克氏病冷冻三价疫苗分别对1988年发病率为82％及42％的两个鸡场11000只鸡进行了免疫效果观察,同时与部分应用国产HVT疫苗及进口HVT疫苗的鸡群作了对比。结果,应用三价疫苗的鸡群发病率为0.2％,应用国产及进口HVT疫苗的鸡群发病率分别为64％和11％。两年来,在我省7个市县329万只鸡应用了三价疫苗,未出现不良反应,总的发病率为0.47％左右,基本控制了疫情,说明三价疫苗对马立克氏病的预防效果极为显著。

世纪兵戈——海上巨霸(一)

航空母舰是海上活动机场,是有史以人类建造的最为庞大的兵器。它的分类目有以下几种。 第一种是按排水量大小来划分:排水量6万吨以上的叫大型航母,3万吨到6万吨属于中型航母,3万吨以下属于小型航母。 第二种方法是按飞机起飞方式划分:即弹射器起飞方式航母、滑跃起飞方式航母、短距离垂直起飞方式航母。 第三种方法是按动力装置划分:即核动力航母、常规动力装置航母,其中常规动力包括蒸汽动力装置、燃汽动力装置、柴油动力装置。

世纪兵戈——海上巨霸(二)

唐剑新年寄语 亲爱的《环球军事》读者朋友,新年好!《军事天地播报》栏目得到许多热心观众、读者的厚爱与支持。我在这里表示衷心的感谢。 展望新的一年,请允许我借表栏目一隅邀请活跃在绿色军营、得到广大解放军指战员和人民群众喜爱的军旅艺术家像李双江、阎维文、彭丽媛、刘斌、宋祖英、蔡国庆、克里木、黄宏以及奋斗在国防战线的军事理论家、杰出青年代表等来此作客,与大家作心连心的沟通。 我们展示的这些军旅著名人士风采仅仅是一个缩影,但从他们身早我们能看到整个绿色军营强大的开拓精神家园的创造力。