IL-35、Beclin-1在乳腺癌患者外周血中的水平及意义

目的探讨白细胞介素(IL)-35、自噬相关蛋白Beclin-1在乳腺癌患者外周血中的水平及意义。方法选取2022年5-10月在上海市嘉定区妇幼保健院诊治的原发性乳腺癌女性患者44例(乳腺癌组)、乳腺良性肿瘤女性患者40例(乳腺良性肿瘤组)及体检的健康者40例(健康对照组)作为研究对象。采用酶联免疫吸附试验检测并比较各组外周血中IL-35和Beclin-1水平,同时检测乳腺癌患者糖类抗原15-3(CA15-3),比较不同临床病理特征的乳腺癌患者IL-35、Beclin-1、CA15-3水平;分析乳腺癌患者外周血IL-35、Beclin-1、CA15-3水平之间的相关性。结果乳腺癌组和乳腺良性肿瘤组外周血IL-35水平均高于健康对照组(P<0.05),Beclin-1水平均低于健康对照组(P<0.05)。乳腺癌组外周血IL-35水平高于乳腺良性肿瘤组(P<0.05),Beclin-1水平低于乳腺良性肿瘤组(P<0.05)。不同病理分级、淋巴结转移情况的乳腺癌患者外周血IL-35、Beclin-1水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);不同雌激素受体(ER)检测结果的乳腺癌患者外周血IL-35水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),而Beclin-1水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌患者外周血IL-35水平与Beclin-1水平呈负相关(r=-0.484,P<0.05);IL-35、Beclin-1水平与CA15-3水平均无相关性(均P>0.05)。结论乳腺癌患者外周血IL-35水平升高、Beclin-1水平降低。不同病理分级、淋巴结转移情况的乳腺癌患者外周血IL-35、Beclin-1水平有明显差异。乳腺癌患者外周血IL-35水平与Beclin-1水平呈负相关,而IL-35、Beclin-1水平与肿瘤标志物CA15-3水平均无关。

孕中期孕妇血清3种维生素水平的年龄、季节变化及其对妊娠期糖尿病的影响

目的探讨孕中期孕妇血清25羟维生素D[25-(OH)D]、叶酸和维生素B 12水平的年龄、季节变化,以及其对妊娠期糖尿病(GDM)的影响。方法选择2021年1-12月于上海市嘉定区妇幼保健院产检的4830例孕妇作为研究对象。按年龄段分为≤25岁827例,>25~30岁2069例,>30~35岁1550例,>35岁387例;按照孕中期检测维生素水平时所处的季节划分,春季1137例,夏季1422例,秋季1149例,冬季1125例;根据孕中期口服葡萄糖耐量试验(OGTT)结果将孕妇分为对照组(健康妊娠,n=4015)和GDM组(n=815)。于孕中期检测血清25-(OH)D、叶酸和维生素B_(12)水平,比较不同年龄段、不同季节这3种维生素水平,并通过Logistic回归分析年龄及这3种维生素水平对GDM发病的影响。结果与其他年龄段相比,≤25岁孕妇血清中25-(OH)D、叶酸和维生素B_(12)水平均最低,差异均有统计学意义(P<0.05);四季中25-(OH)D、叶酸、维生素B 12水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。25-(OH)D水平在夏季最高,在冬季最低;叶酸水平在秋季最高,在冬春季节最低;维生素B 12水平在秋季最高,在春季最低。GDM组孕妇年龄大于对照组(P<0.05),25-(OH)D水平低于对照组(P<0.05),叶酸高于对照组(P<0.05)。Logistic回归分析显示,孕妇年龄及血清中25-(OH)D、叶酸水平均是发生GDM的影响因素(P<0.05)。结论不同年龄段、不同季节孕妇体内25-(OH)D、叶酸和维生素B_(12)水平不同,孕妇年龄及血清中25-(OH)D、叶酸水平均是发生GDM的影响因素,应根据孕妇年龄及季节及时调整维生素的补充,有利于降低GDM的发生。

化学发光免疫分析法检测孕妇抗TP抗体阳性判断值探讨

目的建立适合孕妇的抗梅毒螺旋体(TP)抗体化学发光免疫分析法(CLIA)阳性判断值。方法用科美东雅Chemclin CLIA系统检测13 974例孕妇血清抗TP抗体,对抗TP抗体筛查试验呈阳性反应[信号/临界值(S/CO)比值≥1.0]的样本,用免疫印迹法(WB)分析确认。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价CLIA的检测性能。结果 Chemclin CLIA系统检出抗TP抗体S/CO比值≥1.0的样本152例,初筛呈阳性反应的样本比率为1.09%;初筛呈阳性反应样本经WB确认,阳性119例,不确定7例,阴性26例,初筛呈阳性反应样本中假阳性率为17.11%。根据ROC曲线,约登指数最大时,抗TP抗体S/CO比值为3.32;Chemclin CLIA系统抗TP抗体筛查试验阳性预测值≥95%的S/CO比值为3.25。结论为既降低抗TP抗体筛查试验假阳性率,又减少须进行补充确证试验的样本数,各实验室应建立针对不同人群和检测系统(试剂)合适的界值,以确定筛查试验阳性样本需进行确证试验的S/CO比值范围。

HE4、CAl53联合检测在乳腺癌辅助诊断中的应用

目的研究血清人附睾上皮分泌蛋白4(HE4)、癌抗原153(CAl53)联合检测在乳腺癌辅助诊断中的价值。方法收集46例乳腺癌患者、52例乳腺良性疾病患者以及50名正常对照者血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清HE4含量、电化学发光法检测CAl53含量。采用受试者工作特征(ROC)曲线确定HE4和CA153的临界值。分别计算HE4和CA153单项检测和联合检测的敏感性和准确性并作比较。结果乳腺癌组HE4和CAl53水平分别是49.0(41.7～67.4)pmol/L和20.6(13.4～28.7)U/mL,均明显高于乳腺良性疾病组及正常对照组(P<0.01)。经ROC曲线确定HE4和CA153的临界值分别为62.5 pmol/L和21.6 U/mL,乳腺癌HE4、CAl53联合检测的敏感性为63.0%,准确性为82.4%,均高于单项检测。结论联合检测CAl53和HE4可以明显提高乳腺癌诊断的准确性及敏感性。

3132例临产妇宫颈分泌物细菌培养及药敏结果分析

目的探讨3 132例临产妇宫颈分泌物培养鉴定结果及药物敏感试验,了解生殖道常见致病菌的分布及耐药性。方法收集该院2013年1月至2014年12月3 132例临产妇,对其宫颈分泌物行细菌培养,同时进行细菌鉴定及药敏试验。结果 3 132例标本中分离出634例阳性标本,阳性检出率为20.2%;其中革兰阳性球菌108株,占16.8%;革兰阴性杆菌295株,占45.7%;真菌242株,占37.5%。革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌均对万古霉素敏感度最高。结论临产妇宫颈分泌物菌群分布广,细菌耐药品种有差异。

孕妇梅毒血清学筛查流程探讨

目的探讨孕妇梅毒血清学筛查流程。方法收集经化学发光法(CLIA)筛查抗梅毒螺旋体(TP)抗体S/CO值≥1.0的548例孕妇的血清样本。分别采用化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和免疫印迹法进行复检。以免疫印迹法的检测结果为标准,计算单一方法检测及多种方法联合检测的阳性预测值,并建立孕妇梅毒血清学筛查流程。结果548例孕妇血清样本中,免疫印迹法阳性494例、阴性43例、不确定11例(后续研究剔除这11例样本);TRUST阳性295例、阴性253例;CMIA阳性(S/CO值≥1.0)490例、阴性(S/CO值<1.0)58例。以免疫印迹法结果为标准,CLIA/TRUST/CMIA(+/-/-)、CLIA/TRUST(+/-)、CLIA/TRUST/CMIA(+/-/+)、CLIA/TRUST(+/+)和CLIA/TRUST/CMIA(+/+/+)的阳性预测值分别为22.4%、82.2%、97.4%、100.0%和100.0%。受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,CLIA/TRUST/CMIA(+/-/+)组合中CMIA的最佳S/CO临界值为2.31,此时敏感性为94.7%、特异性为100.0%。根据以上结果建立孕妇梅毒血清学筛查流程:先采用CLIA初筛,如结果呈阴性则报告阴性,如呈阳性则加做TRUST;TRUST阳性报告阳性,阴性则采用CMIA复检;复检阳性且S/CO值≥2.31则报告阳性,复检阴性或虽呈阳性但S/CO值<2.31则加做免疫印迹法检测,最后根据免疫印迹法结果出具报告。结论结合4种梅毒血清学试验方法建立了孕妇梅毒筛查流程,可在减少免疫印迹法复检的同时,提高孕妇梅毒诊断的准确性。

化学发光微粒法检测孕妇抗TP抗体的复检范围探讨

目的探讨基于化学发光法(CLIA)初筛抗TP抗体阳性的孕妇标本应用化学发光微粒法(CMIA)检测的复检范围。方法选取经科美Chemclin CLIA系统筛查抗TP抗体S/CO≥1.0的548例孕妇血清标本,采用CMIA检测548例孕妇血清标本的抗TP抗体,同时用免疫印迹法(WB)进行确认,以WB检测结果为标准,采用受试者工作特征(ROC)曲线评价CMIA检测孕妇抗TP抗体的性能。结果CMIA检出孕妇抗TP抗体的S/CO≥1.0的标本490例,经WB确认,阳性483例,不确定2例,阴性5例,根据ROC曲线,约登指数最大时(0.979),抗TP抗体S/CO为2.31,灵敏度为97.9%,特异度为100.0%;CMIA检出孕妇抗TP抗体的S/CO<1.0的标本58例,经WB确认,阳性11例,不确定9例,阴性38例,根据ROC曲线,约登指数最大时(0.921),抗TP抗体S/CO为0.22,灵敏度为100.0%,特异度为92.1%。结论根据ROC曲线计算的最佳截断值,CMIA检测孕妇抗TP抗体的复检范围S/CO设定为0.22~2.31,S/CO在此范围的孕妇标本须采用WB确认,以确保结果的准确性。

HPV-16 E7负载的DC-CIK对宫颈癌细胞的杀伤效应研究

目的研究HPV-16 E7抗原肽负载的树突状细胞(DC)与细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞共培养Ag-DC-CIK对人宫颈癌细胞siha的杀伤效应。方法采集健康人外周血,分离提取单个核细胞(PBMC),分别诱导生成DC和CIK细胞,观察细胞形态,流式细胞仪检测DC摄取能力及其表面分子CD83、CD86和CIK细胞CD3、CD8、CD56的表达。酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白细胞介素-12(IL-12)、干扰素-γ(IFN-γ)的水平。实验分为5组:效应细胞CIK、DC-CIK、Ag^1-DC-CIK、Ag^2-DC-CIK、Ag^M-DC-CIK,分别与靶细胞siha共培养,细胞计数试剂盒(CCK8)法检测效应细胞对siha活性的影响,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测效应细胞对siha的杀伤效应。结果DC成熟后,摄取能力减弱,CD86、CD83表达上调,上清液中IL-12水平增高;与DC共培养的CIK细胞,CD3^+CD8^+、CD3^+CD56^+细胞比例提高,分泌IFN-γ能力增强;与CIK细胞、DC-CIK组相比,Ag^1-DC-CIK、Ag^2-DC-CIK、Ag^M-DC-CIK组均表现出对siha细胞更强的杀伤效应。结论成功构建Ag-DC-CIK共培养体系,获得两组有效的HPV-16 E7蛋白抗原肽,为治疗宫颈癌提供了新思路。

妇女孕前至孕期血镉和脐血镉水平及其影响因素

目的探究妇女孕前、孕中期和孕晚期血镉及脐血镉水平的变化趋势及其影响因素。方法以复旦孕前队列研究(PLOTS)为基础,对来自上海市嘉定区的92名妇女,采用电感耦合等离子体质谱法检测孕前至孕期全血和脐血,共368份血样的镉浓度,并分析孕期血镉和脐血镉水平的影响因素。结果孕前、孕中期和孕晚期血镉及脐血镉的中位数浓度分别为1.32、0.94、1.65和1.16μg/L,所有血样镉浓度均未超过一般人群参考值(5μg/L)。血镉浓度比较:孕中期低于孕前,孕晚期高于孕中期,脐血低于孕晚期(P<0.01)。孕前血镉水平与孕期血镉和脐血镉水平呈正相关(P<0.01)。上海本地户籍、大学及以上文化程度和孕期喝纯果蔬汁至少每周1次的妇女孕期血镉和脐血镉浓度较低(P<0.05),孕期被动吸烟的妇女孕期血镉和脐血镉浓度较高(P<0.05)。结论建议妇女在孕前降低血镉水平,并在孕期避免被动吸烟。孕期喝果蔬汁可能是降低血镉浓度的保护因素。

干扰ADAM17抑制人宫颈癌细胞系HeLa细胞增殖

目的探讨干扰去整合素-金属蛋白酶17(ADAM17)对人宫颈癌细胞系HeLa细胞增殖的影响,并对其作用机制进行初步探索。方法在HeLa细胞中转染ADAM17干扰质粒,荧光定量PCR和Western blot验证转染效率;CCK-8法检测细胞增殖,划痕实验和Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭;Western blot检测ADAM17、PCNA、EGFR、p-EGFR、ERK和p-ERK蛋白表达。结果转染后HeLa细胞中ADAM17表达被抑制(P<0.05);干扰ADAM17不影响宫颈癌细胞迁移和侵袭,但显著降低了细胞的增殖(P<0.05);增殖相关蛋白PCNA表达水平和p-EGFR、p-ERK表达水平降低(P<0.05)。结论干扰ADAM17可抑制人宫颈癌细胞系HeLa增殖,其作用机制可能与调控EGFR/ERK信号通路有关。

miR-92a靶向PTEN促进宫颈癌细胞增殖

目的探讨微小RNA-92a(miR-92a)对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响,并对其相关的分子机制进行初步探索。方法采用脂质体瞬转法向宫颈癌细胞SiHa和HeLa分别转染miR-92a inhibitor(inhibitor组)及其阴性对照(NC组),设未处理的宫颈癌细胞为空白对照组。转染48 h后,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组细胞miR-92a和第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(PTEN)mRNA的相对表达量,CCK-8试验和流式细胞术分别检测各组细胞活率和凋亡率,Western blotting检测细胞通路蛋白PTEN和磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)表达情况。结果与空白对照组比较,inhibitor组miR-92a相对表达量明显降低(P<0.001),PTEN mRNA相对表达量明显升高(P<0.01);与空白对照组和NC组比较,inhibitor组在各时间点细胞活率明显下降(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.01);与空白对照组和NC组比较,inhibitor组PTEN蛋白表达增加,p-AKT蛋白表达降低。结论miR-92a通过负调控PTEN/AKT通路实现对宫颈癌细胞增殖与凋亡的影响。

人血清附睾蛋白与糖类抗原检测在卵巢癌诊断中的价值

(1)目的探讨人血清附睾蛋白(HE4)与糖类抗原(CA125)联合检测在卵巢癌诊断和预后评估的作用和价值。(2)方法收集上海市嘉定区妇幼保健医院HE4和CA125联合检测数据55例(包括:卵巢癌组30例、卵巢良性肿瘤组25例),采用SPSS 19.0软件分析数据,评估血清HE4、CAl25在鉴别诊断卵巢良恶性肿瘤中的意义。(3)结果 HE4与CA125联合检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数均要明显高于HE4和CA125单项检测数值;晚期(Ⅲ~Ⅳ期)22例卵巢癌患者血清中HE4和CA125水平明显高于早期(Ⅰ~Ⅱ期)8例卵巢癌患者,P<0.05,差异有统计学意义;浆液性癌及子宫内膜癌的血清HE4和CA125表达高于其他几组水平。将浆液性癌、粘液性癌、子宫内膜癌及透明细胞癌每两组之间的HE4和CA125水平经过比较分析,P<0.05,有统计学意义;对相同治疗阶段18例卵巢癌患者实施卵巢癌细胞减灭术后,血清HE4与CA125中位数均处于下降趋势,呈现正向关系。(4)结论 HE4和CA125联合检测对卵巢癌的检测有重要意义;卵巢癌治疗中HE4的诊断价值要优于CA125;HE4和CA125用于诊断浆液性癌方面可能更有价值;血清HE4和CA125联合检测对于卵巢癌的分期检测具有指导意义。

基于孕前队列的备孕夫妇生育力及其关联因素分析

目的分析育龄夫妇生育力及其关联因素。方法基于复旦大学孕前队列,选取2016—2021年参加嘉定区孕前检查的育龄夫妇,分析夫妇妊娠等待时间(TTP),采用Cox比例风险回归模型分析影响育龄夫妇TTP的关联因素;应用Kaplan-Meier法计算每个月经周期的累积妊娠率。结果本研究共纳入1095对孕前夫妇,TTP的M(Q1,Q3)为4.33(2.41,9.78)个月经周期。女性年龄(FR=0.90,95%CI:0.85~0.95,P<0.001)、女性孕前超重或肥胖(FR=0.36,95%CI:0.24~0.55,P<0.001)、女性孕前暴露于二手烟(FR=0.63,95%CI:0.44~0.92,P=0.016)、女性孕前住处或办公室近2年内装修有异味(FR=0.46,95%CI:0.26~0.81,P=0.008)与夫妇生育力受损有关;女性月经周期规律(FR=1.64,95%CI:1.16~2.31,P=0.005)、女性孕前经常饮茶/咖啡(FR=1.55,95%CI:1.11~2.17,P=0.011)以及男性孕前服用叶酸(FR=2.35,95%CI:1.38~4.23,P=0.002)与较好的夫妇生育力存在关联。女性3、6和12个月经周期的累积妊娠率分别为37.6%、64.4%和78.4%。结论夫妇双方年龄较大、女性孕前超重或肥胖、月经不规律、女性暴露于二手烟及装修污染物与生育力受损存在关联,女性孕前经常饮茶/咖啡、男性孕前服用叶酸与受孕时长缩短存在关联。

糖化血红蛋白检测诊断妊娠期糖尿病的应用价值

目的评估糖化血红蛋白(Hb A1c)用于诊断妊娠期糖尿病(GDM)的临床价值。方法选取2018年1月-2019年1月在上海市嘉定区妇幼保健院诊治的GDM患者247例作为观察组,另选择同期健康孕妇247例作为对照组,对其同时进行75 g口服葡萄糖耐量试验(OGTT)和Hb A1c检查,分析两组Hb A1c、FPG及OGTT结果。结果两组孕妇空腹血糖(FPG)、口服糖耐量(OGTT)及糖化血红蛋白(Hb A1c)指标比较,观察组各项指数明显大于对照组,两组差异有统计学意义(P<0.05)。Hb A1c、FPG、OGTT 1 h及2 h诊断GDM的受试者工作特征(ROC)曲线下面积分别为0.705、0.779、0.884及0.905,Hb A1c联合FPG诊断GDM的受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.808。当Hb A1c取5.45%作为诊断界点时,其阳性预测值为94.7%,特异度可达到99.6%。结论 Hb A1c的检测,患者依从性好,可成为GDM诊断的有力补充。

妇女孕前和孕期维生素D水平及影响因素

目的了解上海市嘉定区妇女孕前、孕中期和孕晚期体内维生素D(Vitamin D,VD)水平的现状,探讨孕中期和孕晚期VD水平的影响因素。方法选取2016年9月至2018年12月在上海市嘉定区妇幼保健院参加孕前检查并随访到分娩的94名妇女为研究对象,采用化学发光法检测孕前、中期和晚期血清中的VD水平,共检测282份血清。结果94名妇女的孕前、孕中期和晚期的VD缺乏率分别为:40.4%、57.4%和48.9%。混合线性模型结果显示,近1年内有过染发/烫发的妇女孕期血清VD水平较低(P<0.05),孕期经常喝牛奶和吃深海鱼的妇女在孕期VD水平较高(P<0.05)。结论上海嘉定区妇女孕前和孕期VD缺乏普遍,应该重视在孕前和孕期VD的补充。