补骨脂素对环磷酰胺抑制小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的恢复作用

背景:补骨脂素具有很强的抗骨质疏松活性,可能对化疗导致的骨质疏松具有恢复作用。目的:探讨补骨脂素对环磷酰胺抑制小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的恢复作用及机制。方法:分离培养C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,以MTT法检测补骨脂素对骨髓间充质干细胞活力的影响,以成骨诱导结合碱性磷酸酶染色确定补骨脂素对环磷酰胺抑制骨髓间充质干细胞成骨分化恢复作用的最佳剂量。采用RT-qPCR法检测补骨脂素干预不同时间点成骨分化标志基因Runx2、ALP、Osteocalcin、骨保护素及Wnt/β-catenin信号通路相关基因Wnt1、Wnt4、Wnt10b、β-catenin、c-MYC的mRNA表达;采用Western blot法检测补骨脂素干预不同时间点成骨特异性转录因子Runx2及Wnt/β-catenin信号通路相关基因Activeβ-catenin、DKK1、c-MYC、Cyclin D1的蛋白表达。结果与结论:(1)不同浓度补骨脂素对骨髓间充质干细胞活力没有显著影响;200μmol/L补骨脂素干预后对环磷酰胺诱导骨髓间充质干细胞成骨分化抑制的恢复作用最佳;(2)补骨脂素可以逆转环磷酰胺条件培养基导致的骨髓间充质干细胞成骨标志基因Runx2、ALP、Osteocalcin、骨保护素mRNA表达和Runx2蛋白表达的降低;(3)补骨脂素可以逆转环磷酰胺条件培养基导致的骨髓间充质干细胞Wnt/β-catenin通路相关基因Wnt4、β-catenin、c-MYC mRNA表达和Activeβ-catenin、c-MYC、Cyclin D1蛋白表达的降低以及DKK1蛋白表达的升高;(4)结果表明,环磷酰胺能抑制小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化,补骨脂素对其具有恢复作用,且200μmol/L补骨脂素干预效果最佳,而这种保护作用可能与补骨脂素激活Wnt4/β-catenin信号通路有关。

补肺健脾法对伴有基础疾病的新型冠状病毒感染患者疗效分析

目的观察补肺健脾法对有基础疾病的新型冠状病毒感染老年患者的临床疗效及其对实验室检测指标的影响。方法符合纳入标准的确诊患者142例(治疗组),体检中心60岁以上有基础疾病的老年人108例(新型冠状病毒感染阴性)(对照组),治疗组患者常规西药对症治疗的基础上加用补肺健脾法,连续治疗10 d后,比较患者治疗前后及对照组的实验室血常规、炎症因子指标、肝肾功能指标、冠心病有关检测指标等,并观察患者治疗前实验室指标与性别的相关性。结果新型冠状病毒感染患者炎症指标显著升高,肝肾功能和心肌损害及凝血指标出现不同程度异常,男性患者的C反应蛋白(CRP)、血肌酐(Scr)、凝血酶原时间(PT)、国际标准比率(INR)明显高于女性患者。补肺健脾法治疗后,患者的血白细胞(WBC)、中性粒细胞(NEU)、淋巴细胞计数(LYM)、CRP、谷氨酸-丙酮酸转氨酶(ALT)、AST、Scr较治疗前明显下降;患者的肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白(MB)等指标较治疗前显著改善(P<0.05);患者的纤维蛋白原(FIB)、部分活化凝血酶原时间(APTT)、D-二聚体、纤维蛋白降解产物(FDP)等指标较治疗前显著下降(P<0.05)。经补肺健脾法治疗后,男性和女性的实验室检测指标无显著差异。结论老年男性和女性新型冠状病毒感染后实验室检测指标存在显著差异。补肺健脾法对于伴有基础疾病的老年新型冠状病毒感染患者疗效显著,可减轻患者的炎症反应,改善其免疫功能,改善肝肾功能和心功能,利于恢复,治疗后男女实验室指标无差异。

基于数据挖掘的围绝经期综合征中医证候分类算法分析

目的采用现代中医诊断技术结合人工智能分析方法进行围绝经期综合征中医辨证研究,以期建立最佳证候分类方法。方法门诊收集围绝经期综合征患者四诊信息,按照中医辨证标准进行证型分类,采用贝叶斯网络算法、K最近邻算法、支持向量机算法3种常用数据挖掘分类算法对围绝经期综合征四诊信息数据进行分析。结果分别得出在相同训练、测试样本数据下3种算法建立围绝经期综合征中医证候模型所需时间、分类准确性、覆盖率及margin曲线,分析了训练样本数量对3种算法的影响,并对3种算法所建立模型进行了评价。结论在围绝经期综合征证候分类效果方面,贝叶斯网络算法优于其他2种方法。

亚健康状态的面部光谱与五脏色色度特征

目的:观察健康人群和亚健康状态人群面部不同点位的光谱色度情况,为健康状态的评价提供客观依据。方法:用"健康状态评价问卷"H20V2009对470名无明确急慢性疾病者进行健康状态评估,根据主观量表得分分为健康状态、亚健康状态,并根据中医辨证对亚健康进行五脏定位分析。采用CM-2600D分光测色仪,观测额部、眉间部、鼻部、下颏、左颧部、右颧部、左眼胞及右眼胞8处的L、a、b、C值以及400～700nm不同波长段的面色反射率。结果:与健康组比较,亚健康组整体面部色度特征L值偏高(P<0.05),a、b、C值偏低(P<0.05),提示亚健康组面色较健康组浅淡、色度偏低;在400～560nm段波长反射率,亚健康组偏高(P<0.05),显示亚健康组面色偏青;亚健康组面部额部、眉间、鼻部a、b和C值差异明显。亚健康五脏分型各组L值较健康组升高(P<0.05);亚健康不同脏腑辨证组间色度值存在一定差异,其中肺型与其他各型差异最显著,a、b和C值较其他各型降低;亚健康不同脏腑辨证组间光谱反射率比较,肺型在400～520nm、脾型在420～600nm段与其他各组差异有统计学意义(P<0.05),肺型低于其他脏型,脾型高于其他脏型。结论:亚健康状态不同五脏辨证分型者的面部不同点位光谱色度不同,可以为健康的评价提供客观依据。

围绝经期综合征中医证候分布特点文献研究

目的研究围绝经综合征的中医证候分布特点,为规范本病的诊断和治疗提供依据。方法检索中国期刊全文数据库、中文科技期刊数据库、中国生物医学文献数据库、中国中医药数据库、万方数据资源系统1991-2011年发表的有关围绝经期综合征文献,进行文献整理分析。结果纳入分析文献191篇。围绝经期综合征常见中医证候有49个,其中肝肾阴虚、肾阳虚、肾阴虚、肾阴阳两虚、心肾不交、肝郁气滞、脾肾阳虚最多见;提取常见症状共65个,包括月经紊乱、头晕耳鸣、失眠、烘热汗出、腰膝酸软、心悸、易怒、纳呆等;病位以肾、心、肝、脾为主;病性以虚为主;脉象以细数、沉细、弦细为主,舌象以舌淡或舌红,苔薄或少苔为主。结论围绝经期综合征的中医证候分布比较集中,本研究为下一步临床科研工作奠定了基础。

基于文献的绝经综合征中医证候特征研究

目的研究绝经综合征中医证候特征分布规律,为临床治疗及后续研究提供依据。方法计算机检索中国知识资源总库(CNKI)、中文科技期刊数据库(重庆维普)、中国学术期刊数据库(万方数据)、中国生物医学文献数据库(CBM)、中国中医药数据库(TCMDS)1983年6月-2013年6月绝经综合征相关文献,将原始数据量化后录入计算机,建立相关数据库,采用聚类分析、因子分析、频数优势法相结合的方式进行数据分析。结果纳入文献270篇,涉及730例患者,包含证候42种、症状73种。提取频数分布前9位的证候四诊信息进行聚类分析,得到5类基本证型:肝肾阴虚证、肝郁气滞证、心肾不交证、心脾两虚证、脾肾阳虚证;因子分析结合频数优势法提取各证型核心症状,得到各证候的辨证要点。结论本研究采用3种方法并结合相关专家意见,初步建立了绝经综合征证候诊断方案,可为临床及后续研究提供参考。

张志枫运用更年安汤化裁治疗绝经前后诸证验案3则

绝经前后诸证以肾精亏虚为本，以心肝火旺为标。另外考虑到妇女在绝经前后由于其病理生理的变化，极易导致瘀血的产生，在治疗时除从心肝肾论治外，还要适当加用活血化瘀药物对症治疗。导师张志枫为上海中医药大学基础医学院副教授，学贯中西，临床经验丰富，他根据本病病机采用自拟更年安汤随证化裁治疗绝经前后诸证，疗效满意。

从心肝论治闭经浅析

闭经是指女子年逾十八周岁月经尚未来潮的，或既往曾有过正常月经而又中断达三个月以上的，称为闭经。前者称为原发性闭经，后者称继发性闭经，为临床所常见。原发性闭经多数由于染色体、性腺、性器官发育异常所致，往往非药物所能奏效。故本病临床治疗病例，主要为继发性闭经，笔者跟随导师临诊，治疗闭经有一得之见，探析如下。

剖腹产术后发热证治体会

目的:观察中医辨证治疗剖腹产术后发热临床疗效。方法:根据中医辨证论治,临床分为阴虚发热、食滞发热、血瘀发热3型辨证治疗。结果:患者全部治愈。结论:中医辨证治疗妇科剖腹产术后发热应以病因治疗,扶正祛邪,调整脏腑功能为主。

滋肾清肝法治疗经前乳房胀痛临床观察

目的观察滋肾清肝法治疗经前乳房胀痛的疗效。方法将99例经前乳房胀痛患者随机分为2组。治疗组79例运用滋肾清肝法治疗,对照组20例用乳核内消口服液治疗。2组均每个月经周期治疗10 d,主要观察经前乳房胀痛及伴随症状的变化。结果治疗组痊愈率、总有效率分别为7%和95%,对照组分别为50%和80%,2组比较有显著性差异(P<0.05)。结论滋肾清肝为主,结合辨证加减,是治疗经前乳房胀痛的有效方法。

医学院校ESA实验教学模式优化探索

探索改进和完善ESA实验教学模式,以提升中医院校医学生的实验技能。通过深入分析ESA模式(engage投入-study学习-activate活用)实验教学特色模式的基本结构,龙华医院科技中心实验室在教学实践中对实验教学内容、实验教学方法、实验教学评价体系等方面进行了优化和完善,并分析优化后的培训效果。优化后的实验教学模式可以提升医学生的实验技能,拓宽了医学生的研究思路,提高了科研思维能力。

亚健康状态人群的脉象图特征分析

目的:研究不同健康状态及亚健康各证型的脉象图参数,探求评价亚健康状态的特征性脉象图指标。方法:运用"健康状态评价问卷H20.V2009"对1275例无明确急慢性疾病者进行健康状态评估,并分为健康组和亚健康组,依据"亚健康状态辨证依据V2010",对亚健康者进行辨证分型。另设明确诊断的患有心血管疾病的患者121例作为对照。用YJJ-101亚健康脉象监测系统采集脉象,分析主波幅度(amplitude of main wave,h1),重搏波前波幅度(amplitude of front wave,h3),重搏波幅度(amplitude of repeat wave,h5),主波上1/3处宽度(1/3width of main wave,w1),主波上1/5处宽度(1/5width of main wave,w2),左心室快速射血期时值(time of rapid ejection phase,t1),脉动周期(period of pulse,t),脉象图总面积(square of pulse diagram,S)、收缩期面积(area in systole,As)、舒张期面积(area in diastole,Ad),采脉压力(pulse pressure,Pp)和h3/h1、h5/h1、w1/t、w2/t、h1/t1比值等。结果:健康组、亚健康组与疾病组3组比较:与健康组相比,亚健康组w1/t、w2/t增高,Pp、h1、h5、h5/h1、S、As、Ad降低;与疾病组相比,亚健康组Pp、h5/h1增高,h1、w2/t、S、As降低。健康组、实证组与虚证组3组比较:与健康组相比,实证组与虚证组均表现为h3/h1、w1、w1/t、w2/t增高,h1、h5、h1/t1、h5/h1降低。健康组与各证候组比较:各证候组间比较,脉象图参数h1、h5在肝郁组、阴虚组、气虚组、实热组依次降低,脉象图参数h3/h1、w1/t在肝郁组、实热组、阴虚组、气虚组依次升高,肾虚组脉象图指标h1显著高于健康组及其他证候组。结论:不同健康状态、亚健康不同类别及各证型的脉象图参数存在较明显差异,脉象图特征指标可作为客观评价不同健康状态、亚健康分类量化诊断、辨证分型研究的实验依据之一。

ESA模式医学科研型研究生阶梯式实验培训探索

秉承"素质教育和创新教育"理念,探索建立在ESA模式下开展对医学科学学位型研究生进行阶梯式科研实验培训。展开问卷调查明确培训方向、编写实验培训讲义、进行基础式岗前培训、系列式实验技术实训、依托科研项目的针对式指导,以及微课微信碎片式、在线虚拟仿真学习,并且举办系列科研讲座及沙龙活动。以阶梯式层次培养使研究生得到较为规范的生物安全、生物医学系列技能训练。

基于JCI理念的科研实验室生物安全管理实践

基于国际医疗机构认证联合委员会(JCI)的安全管理理念和《Joint Commission International医院评审标准》,结合世界卫生组织制定的《实验室生物安全手册》,进行了医院实验室设施管理与安全管理实践。在龙华医院科研实验室生物安全管理中,细化了文件管理、危险化学品管理、应急预案处置和生物安全培训。以通过"JCI国际学术型医学中心认证的中医医院"认证为契机,进一步加强科研实验室的生物安全管理。

体外循环搏动灌注对心肾功能及脉图参数的影响

目的:观察体外循环心脏手术搏动灌注对患者肝肾功能和脉图参数的影响。方法:在CPB下手术治疗的心脏病患者88例,主动脉阻断期间搏动灌注组应用人工心肺机自身的滚压泵通过转速改变形成搏动血流进行灌注,脉搏波为三峰(双峰)波形模式;于术前及术后24 h抽取静脉血检测肌酐、尿素氮、乳酸脱氢酶、谷草转氨酶等指标,并采集术前及术后脉搏图。对数据结果进行比较分析。结果:术后肌酐、尿素氮、乳酸脱氢酶、谷草转移酶显著高于术前,但均在正常范围之内,且血肌酐与血尿素氮的比值无显著差异(P>0.05),但术后比值与术前比较,呈下降趋势。手术后脉图参数h1显著高于术前,术后w/t显著低于手术前。结论:(1)搏动灌注可以明显改善患者的心肾功能,有助于减少术后并发症;(2)搏动灌注可以降低外周血管阻力,维持血液动力。

消痛通络方内服外用治疗膝骨关节炎的临床观察

目的:观察消痛通络方治疗膝骨关节炎的临床疗效。方法:采用随机、平行对照研究方法,将中医辨证为肝肾两虚合并瘀血痹阻证膝骨关节炎患者40例分为治疗组、对照组,治疗4周。观察记录各组治疗前后临床症状、膝关节功能活动及不良反应情况,进行统计分析比较。结果:经临床治疗4周后,两组患者膝关节晨僵时间、关节压痛、肿胀、疼痛与治疗前比较,均有明显改善(P<0.05);治疗组和对照组疗效相当,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:消痛通络方治疗膝骨关节炎临床效果良好,无明显不良反应。

急性子宫内翻2例报告

急性子宫内翻是产科罕见的危重并发症，常危及产妇生命，病死率高。本人自工作以来收治子宫内翻病人2例，现报告如下：

基于网络药理学和实验验证分析半枝莲-山慈菇治疗卵巢癌的分子机制

目的基于网络药理学和体外细胞实验,研究半枝莲-山慈菇治疗卵巢癌的主要活性成分和潜在作用机制。方法利用TCMSP、SwissTargetPrediction数据库检索半枝莲和山慈菇的活性成分和作用靶点,并通过GeneCards、OMIM、DrugBank、DisGeNET数据库收集卵巢癌相关作用靶点。筛选半枝莲-山慈菇干预卵巢癌的交集靶点,利用STRING数据库构建交集靶点PPI网络。利用DAVID数据库进行GO功能和KEGG通路富集分析;采用Cytoscape 3.9.0软件构建"活性成分-靶点-通路"网络。对关键靶点和通路进行体外实验验证,采用MTT法检测不同浓度槲皮素、谷甾醇对人卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制率。将人卵巢癌SKOV3细胞按随机数字表法分为对照组、槲皮素组和谷甾醇组,相应药物干预48 h后,采用克隆形成实验检测槲皮素、谷甾醇对SKOV3细胞克隆形成能力的影响,采用PCR检测各组细胞Akt1、VEGFA、Caspase-3 mRNA水平,采用Western blot法检测细胞PI3K、Akt、p-Akt、Caspase-3、VEGFA蛋白表达。结果得到半枝莲有效成分29个,山慈菇有效成分3个,其中共有成分2个;药物相关作用靶点291个;卵巢癌潜在靶点1969个;半枝莲-山慈菇与卵巢癌的交集靶点137个。通过GO功能富集分析得到930个条目,涉及生物过程722个、细胞组分76个、分子功能132个。KEGG通路富集涉及169条信号通路,涉及肿瘤通路、PI3K-Akt信号通路、p53信号通路、IL-17信号通路等。体外实验结果显示,槲皮素和谷甾醇组细胞增殖抑制率升高,细胞克隆能力降低;槲皮素组、谷甾醇组Akt1、VEGFA mRNA水平降低(P<0.01或P<0.05),Caspase-3 mRNA及蛋白表达升高(P<0.01),PI3K、p-Akt、VEGFA蛋白表达降低(P<0.01)。结论半枝莲-山慈菇通过多靶点、多通路协同作用抑制卵巢癌的发生发展,可通过调控AKT1、VEGFA、Caspase-3等关键基因和PI3K-Akt通路的表达诱导SKOV3细胞凋亡。