龟鹿二仙胶含药血清介导大鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化

背景:在研究骨髓间充质干细胞增殖的基础上揭示其分化机制是防治骨质疏松症研究的热门课题之一。目的:探讨龟鹿二仙胶含药血清诱导骨髓间充质干细胞成骨分化以防治骨质疏松症的分子机制与激活细胞外信号调节激酶1/2/E26转录因子1信号通路因子之间的相关性。方法:购买商品化第3代SD大鼠骨髓间充质干细胞,根据加入不同成分培养基分为胎牛血清组、空白血清组、龟鹿二仙胶含药血清组、经典诱导组以及通路抑制剂组、龟鹿二仙胶含药血清+通路抑制剂组,根据分组条件进行成骨诱导分化,每3 d换液1次,干预7 d时采用碱性磷酸酶活性检测试剂盒测定前4组骨髓间充质干细胞的成骨分化水平;干预14 d时采用茜素红染色观察前4组骨髓间充质干细胞的成骨矿化水平,实时荧光定量PCR检测前4组骨髓间充质干细胞中碱性磷酸酶、Runt家族相关转录因子2、过氧化物酶体增殖物激活受体γ和E26转录因子1的基因表达水平,Western blot法检测6组骨髓间充质干细胞中Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶、Runt家族相关转录因子2、过氧化物酶体增殖物激活受体γ、E26转录因子1、细胞外信号调节激酶1/2和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白表达。结果与结论:①与空白血清组比较,龟鹿二仙胶含药血清组碱性磷酸酶、Runt家族相关转录因子2、E26转录因子1 mRNA的表达水平均明显升高,成脂分化特异性指标过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA的表达水平则受到抑制;②与胎牛血清组和空白血清组比较,Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶、Runt家族相关转录因子2、E26转录因子1、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2等成骨分化相关蛋白表达水平明显升高,过氧化物酶体增殖物激活受体γ蛋白表达水平同样受到抑制,使用MAPK信号通路抑制剂PD98059可下调上述成骨分化相关蛋白表达水平,上调过氧化物酶体增殖物激活受体γ蛋白表达水平;③与胎牛血清组和空白血清组比较,龟鹿二仙胶含药血清组骨髓间充质干细胞的碱性磷酸酶活性(P<0.05)和钙化能力(P<0.05)明显提高;④结果表明,龟鹿二仙胶含药血清可能通过调节细胞外信号调节激酶1/2/E26转录因子1信号通路因子介导骨髓间充质干细胞成骨分化,这可能是其防治骨质疏松症的重要机制之一。

miR-381-3p通过靶向ERK1/2/ETS1信号通路影响MC3T3-E1细胞成骨分化

目的探讨miR-381-3p对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响和作用机制。方法慢病毒转染细胞后实验分为NC mimic miR-381-3p组、mimic miR-381-3p组、NC inhibitor miR-381-3p组和inhibitor miR-381-3p组;运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测不同组miR-381-3p的表达水平以验证转染效率;诱导MC3T3-E1细胞成骨分化后,检测各组细胞中碱性磷酸酶(ALP)活性水平;茜素红染色法检测各组细胞的成骨矿化能力;qRT-PCR测定各组细胞中ALP、Runx2、PPARγ和ETS1 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法测定各组细胞中collagenⅠ、ALP、Runx2、PPARγ、ETS1、P-ERK1/2水平;并用MAPK/ERK通路抑制剂(PD98059)干预各组细胞后进行目的蛋白检测。结果与NC mimic miR-381-3p组、mimic miR-381-3p组及NC inhibitor miR-381-3p组比较,inhibitor miR-381-3p组中细胞中ALP、Runx2、ETS1 mRNA的水平均明显升高,并且collagenⅠ、ALP、Runx2、ETS1、P-ERK1/2蛋白的表达水平也明显升高,但是PPARγmRNA和蛋白表达水平是下调的;与其他3组对比,inhibitor miR-381-3p组中细胞的ALP活性和钙化能力检测显示均显著高表达。MAPK通路抑制后蛋白实验结果也佐证了miR-381-3p参与调控MC3T3-E1细胞的成骨分化过程。结论miR-381-3p通过下调ERK1/2/ETS1信号通路表达水平进而抑制了MC3T3-E1细胞的成骨分化能力。

互联网金融下银行网点分布特征

随着互联网金融的发展,越来越多的银行网点正在转变其原始的运营方式,向更新的方式转型。通过对中国工商银行数据研究,发现其机构网点数量以递增的速度减少,员工数也大量减少。分析其变化原因,主要来源于线下网点盈利能力的减弱、互联网金融的冲击和国家政策的影响。并对未来银行网点发展进行展望,认为未来银行网点转型的总体方向应当是把握客户行为的变化,顺应时代趋势,逐步将银行网点向智能化、体验化、专业化、轻型化方向转型。

利用Label-free技术筛选MC3T3-E1细胞中miR-381-3p介导的靶蛋白和差异蛋白生物学功能分析

目的比较小鼠前成骨细胞(MC3T3-E1)实验组(MC3-E1-in)与对照组(MC3-E1-NC-in)的蛋白质组学差异水平,以初步探究miR-381-3p所介导的靶蛋白和相关信号通路以及差异蛋白生物学功能分析。方法通过细胞慢病毒转染构建实验模型,分为实验组与对照组;实时荧光定量PCR验证miR-381-3p在细胞中的转染效率;收集细胞样品并采用非标记定量蛋白质组学技术进行鉴定、筛选与分析;进行组间比较得到差异蛋白(differentially expressed proteins,DEPs)表达结果,绘制火山图与表达聚类分析图以及功能富集分析差异蛋白质谱,重点分析基因本体论(geneontology,GO)富集结果、KEGG富集结果以及string-db软件预测可能的蛋白质-蛋白质相互作用结果,并对差异显著的蛋白质进行生物信息学整合分析。结果共鉴定到4764种差异表达蛋白,其中527种差异显著并具有统计学意义,表达上调的有357种,有170种则是表达下调;GO富集结果分析显示差异蛋白主要参与生物过程的跨膜转运、蛋白水解、细胞内蛋白质转运,还参与了细胞骨架、内质网、线粒体的分子功能过程以及参与钙离子结合、蛋白激酶活性、RNA结合等细胞组分过程。结论己糖激酶2、驱动蛋白样蛋白22、cAMP调节的磷酸化蛋白19和脂滴包被蛋白2等差异蛋白可能参miR-381-3p调控肌肉-骨骼系统代谢疾病的发生发展过程。

基于个性化手术导航模板辅助的人工全膝关节置换

基于计算机辅助设计技术以及医学图像三维重建技术指导下的个性化手术导航模板(PSI),近年来随着精准医学的快速发展在人工全膝关节置换术中逐渐得到广泛应用。与传统全膝关节置换术相比,PSI可术前构建模型并提高关节假体位置及其尺寸的准确性,明显减少术后脂肪栓塞综合征发生率和术中失血量,缩短手术时间,并且在术后功能恢复结果方面也有改善,但在术后并发症以及中远期生存率方面并未体现明显优势。本文将从PSI的优劣势对其进行全面综述。

淮阴:“四化”推进镇(街)社工站建设试点

2019年,江苏省淮安市淮阴区民政局结合实际,以“标准化、专业化、精准化、规范化”建设为目标,按照“一年全面试点、两年拓展延伸、三年深化完善、四年固化模式”的工作步骤,精心谋划,扎实推进镇(街道)社工站试点建设。截至2020年6月,全区13个镇(街道)社工站已全部建成,配备社工22名,初步构建起社工站规范运行的工作体系。