在骨科临床教学中进行专科影像学教学的探索和实践

通过设计骨科影像学教学课程,结合作者在教学中的实践经验,探讨骨科专科影像学教学方法,目的在于提高教学质量。

类鼻疽假单胞菌所致骨关节炎的诊治

目的总结类鼻疽假单胞菌所致骨关节炎的诊治经验。方法回顾性分析7例类鼻疽假单胞菌所致骨关节炎患者的临床资料。结果 3例保守治疗痊愈,2例手术治疗痊愈,1例治疗无效死亡,1例放弃治疗出院1周后死亡。结论选择敏感抗生素、恰当手术和支持治疗可取得良好疗效,抗生素治疗应持续3个月以上。

VEGF-165-GMs复合自体颗粒骨修复兔陈旧性桡骨缺损的实验研究

目的探讨VEGF-165-GMs复合自体颗粒骨修复兔陈旧性桡骨缺损的效果。方法 24只新西兰大白兔双侧桡骨均建立1.5 cm的陈旧性骨缺损实验模型,随机分为A、B、C三组,A组植入自体颗粒骨+VEGF-165-GMs 1mg;B组植入200 mg自体颗粒骨;C组VEGF-165-GMs 1 mg;分别于术后3、6、9周切取标本,通过X线摄片、骨密度测量、生物力学测试、组织形态学观察等手段,观察各个时期新骨形成的情况。结果 A、B组均能较好地修复陈旧性骨缺损,A组术后各时间点X线评分、骨密度测量、生物力学测试、组织形态学观察均明显优于B组。C组各时间点均无骨性愈合迹象,9周时可见骨断端完全硬化,髓腔封闭。结论 VEGF-165-GMs复合自体颗粒骨修复陈旧性骨缺损可以明显促进局部血运重建,促进新生骨形成,提高骨改建塑形的速度和质量。

血管内皮细胞在骨形成及修复中的作用及机制

随着近年研究的深入,发现血管内皮细胞(ECs)在骨形成和修复过程中起着重要作用。ECs通过组成血管组织,释放生长因子、炎症介质等内容物及直接与骨细胞接触,参与骨形成和修复的病理生理过程。本文主要综述了ECs的组织学特性,及其与成骨细胞、破骨细胞相互作用机制等几方面的研究进展。

牙髓干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的实验研究

目的:探讨牙髓干细胞移植治疗脊髓损伤的神经修复及运动功能恢复情况。方法:培养取材第2代来源于第三磨牙的人牙髓干细胞,鉴定其表面标记物,应用B27、碱性呈纤维细胞生长因子和胰岛素转铁蛋白硒进行神经诱导,并行免疫荧光染色检测。改良Allen′s法制作SD大鼠脊髓损伤模型,3d后随机分为实验组及对照组,每组各20只大鼠。分别于脊髓损伤处注入人牙髓干细胞及生理盐水,于造模后1d、治疗前1d、治疗后3d、治疗后7、14、28d进行动物后肢运动功能检测。28d时脊髓取材进行HE染色,观察脊髓空洞形成,计算空洞面积;Tunnel法检测两组细胞凋亡情况;免疫荧光双标法标记HuNu-NeuN和HuNu-GFAP,观察人牙髓干细胞体内生长分化情况。结果:细胞培养传代后呈长梭形,细胞形态均匀,胞浆丰富、胞核增大,细胞平行排列呈漩涡状或螺旋状。流式细胞仪分析人牙髓干细胞诱导分化后高表达CD44、CD90和CD146,低表达STRO-1,CD34、CD45表达阴性。人牙髓干细胞神经诱导14d,免疫荧光标记GFAP、NeuN呈阳性。细胞移植3d、7d,两组间BBB评分无统计学差异;细胞移植14d及28d实验组BBB评分分别为3.8±0.8、7.2±1.6,对照组BBB评分为2.2±0.8、3.6±1.1,两组间比较差异有显著性(P<0.05)。28d时HE染色两组均可见脊髓出血、炎性细胞浸润、小血管增生及空洞形成。实验组脊髓空洞面积百分比(26.75±2.50)%,对照组为(49.50±6.25)%,两组差异有统计学意义(P<0.05);Tunnel法检测实验组神经细胞凋亡百分比(32.33±1.54)%,对照组为(46.33±1.53)%,实验组显著减少神经细胞的凋亡(P<0.05)。免疫荧光双标法检测到部分细胞为带有HuNu-NeuN和HuNu-GFAP双抗体细胞。结论:人牙髓干细胞能够在体外特定条件下及移植入脊髓损伤大鼠体内可分化为神经细胞,用于治疗脊髓损伤时可减少神经细胞的凋亡,促进后肢运动功能的恢复。

脊柱胸腰段椎弓根钉断裂、松动原因及对策

目的探讨胸腰椎骨折椎弓根螺钉内固定术后,椎弓根螺钉断裂、松动的原因及对策。方法回顾性研究1999年1月—2005年5月本院脊柱外科实施胸腰椎骨折后路椎弓根内固定器械治疗的患者265例,其中有20例(21个椎体)术后椎弓根钉断裂或松动。其中13例螺钉断裂(18枚螺钉),2例螺母脱出、钉杆分离,3例螺钉松动,2例连接杆断裂。结果椎弓根螺钉内固定术发生问题的原因有:①骨折节段未形成有效的融合;②起撑开复位作用的椎弓根螺钉负荷过大;③螺钉位置不当或术中多次进钉;④椎间盘退变造成椎间盘高度丢失;⑤骨质疏松;⑥术后康复时间不足;⑦内置物取出过迟。结论术中有效地植骨融合,对合并有椎间盘损伤的患者合理选择手术适应证,提高手术技术,尽早取出内置物以及术后常规佩戴支具能有效地防止椎弓根螺钉断裂及松动等问题的发生。

全髋关节置换术后深静脉栓塞发生的相关因素研究

目的探讨影响全髋关节置换术后深静脉栓塞发生的相关因素,为提高全髋关节置换术后深静脉栓塞的诊断与治疗提供参考。方法选自我院2005年6月至2010年3月进行的全髋关节置换术患者共151例(151髋),根据患者术后有无并发深静脉血栓将患者分为血栓组及非血栓组。对两组患者性别、年龄、BMI、合并症、术前服用糖皮质激素、甘油三酯(TG)、CHOL、患髋既往手术、术中输血、术中出血总量、血红蛋白、白蛋白、骨水泥的使用、尿管留置时间、手术持续时间、抗生素使用时间、手术前后Harris评分等资料进行收集,对结果进行统计学对比。结果两组患者术前资料对比发现:血栓组患者年龄、性别以及TG与非血栓组对比有统计学差别,P<0.05。两组患者术中、术后各项资料对比显示:血栓组患者骨水泥的使用情况以及手术持续时间与非血栓组对比差异有统计学意义,P<0.05。两组患者DVT形成的Logistic回归分析表明性别、TG、骨水泥以及手术时间为影响血栓形成的独立危险因素。结论女性、G≥1.7mmol/L、使用骨水泥以及手术时间过长为导致全髋关节置换术后DVT发生的独立危险因素。

依达拉奉体外定向诱导人间充质干细胞向神经元样细胞的分化

背景:依达拉奉作为新型氧自由基清除剂,一般用于抑制脂质过氧化反应,减轻脑水肿,保护神经细胞。目的:观察依达拉奉体外定向诱导人骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的可行性。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-12/2008-09广东医学院附属医院中心实验室完成。材料:骨髓来源于创伤所致闭合性股骨骨折的成年患者,由广东医学院附属医院骨科提供。依达拉奉由南京先声药业生产,批号P2007123144254453。方法:无菌抽取的骨髓经肝素化后,采用密度梯度离心法及贴壁筛选法分离获得人骨髓间充质干细胞,传至第5代按1×108L-1接种于6孔板内,设立2组,依达拉奉组细胞达50%融合时用含碱性成纤维生长因子、胎牛血清的L-DMEM预诱导24h,PBS洗涤后再用20mg/L依达拉奉无血清L-DMEM诱导24h;空白对照组始终用含体积分数为10%胎牛血清的L-DMEM培养,不加任何预诱导剂和诱导剂。主要观察指标:诱导分化后细胞形态变化,SP法免疫细胞化学鉴定神经元烯醇化酶、巢蛋白、胶质纤维酸性蛋白及微管相关蛋白2的表达。结果:体外诱导1h后,依达拉奉组胞体收缩,2h后形成较长突起,5h后呈典型神经元样细胞;空白对照组细胞仍呈对称的梭形,无突起形成。免疫组化结果显示,诱导6h后依达拉奉组神经元样细胞的胞体及部分突起呈棕黄色,强表达神经元烯醇化酶,弱表达胶质纤维酸性蛋白和巢蛋白,不表达微管相关蛋白2;空白对照组上述4种特异性抗原均呈阴性表达。结论:人骨髓间充质干细胞经依达拉奉体外诱导后,所分化的细胞具有神经元表型,但还不够成熟,处于向成熟神经元分化的中间阶段。

颈椎肿瘤前后路联合全脊椎切除及稳定性重建

目的探索手术治疗颈椎肿瘤有效方法。方法 2006～2009年间,我院骨科15例同时累及脊柱前、中、后柱的颈椎肿瘤患者采用前后路联合全脊椎切除,并通过植骨及内固定重建脊柱稳定性。结果 15例均获随访,随访时间12～28个月,平均19.6个月。全部病例植骨均在3～6个月内获融合。术后颈肩剧烈疼痛症状消失。有神经症状者,神经功能均有不同程度恢复。结论前后路联合全脊椎肿瘤切除并通过植骨及内固定重建脊柱稳定性是治疗累及颈椎三柱的颈椎肿瘤的有效治疗方法 。

BMSCs和软骨细胞共培养并与纤维蛋白黏胶复合后移植修复关节软骨缺损

目的 探讨BMSCs和软骨细胞共培养并与纤维蛋白黏胶复合后移植修复关节软骨缺损的效果.方法 关节软骨损伤动物模型分A、B、C、D四组,A组：骨髓基质干细胞、软骨细胞、纤维蛋白胶复合体移植;B组：骨髓基质干细胞、软骨细胞移植;C组：单纯凝胶复合体移植;D组：空白对照,软骨缺损不作处理.分别于4、12周处死取材.进行修复软骨的大体观察、用透射电镜检查观察软骨细胞内结构和O＇Driscoll软骨组织形态学评分.结果 大体观察和电镜检查：软骨的修复A组优于B、C组,D组修复不良.各组的O＇Driscoll软骨组织形态学评分分别为：A组：（20.43±1.81）分;B组：（16.29±2.63）分;C组：（10.57±3.60）分;D组：（5.77±3.30）分,各组之间差异均有极显著性（P＜0.01）.结论 BMSCs和软骨细胞共培养并与纤维蛋白黏胶复合后移植能更好的修复关节软骨缺损.

关节镜下锚钉修复RockwoodIII型肩锁关节脱位术后并发症的防治

目的：分析关节镜下锚钉修复Rockwood III型肩锁关节脱位术后并发症的原因。方法：回顾分析2010年5月-2014年12月采用关节镜下锚钉修复肩锁关节脱位的15例病例,在肩关节镜下,用锚钉修复肩锁关节脱位。术后复查X线片,评估肩锁关节复位固定情况。术后随访评估肩锁关节功能评分。结果：15例得到随访,平均随访8.6个月（3∽16个月）。1例术后2个月肩关节僵硬,上举、外展受限。2例肩锁关节创伤性关节炎,肩锁关节疼痛,上举肩关节时明显。1例喙锁韧带钙化。优6例,良5例,差4例,优良率为73.3%。结论：关节镜下锚钉修复Rockwood III型肩锁关节脱位术后会出现一定程度的并发症,为避免并发症,严格掌握合适的手术适应证,按照先采取非手术治疗,非手术治疗失败,再考虑手术治疗,而且需注意手术的具体操作及术后的康复治疗。

不稳定型骨盆骨折的手术治疗

目的探讨不稳定型骨盆骨折的临床特征和手术治疗的效果。方法 2007-01～2011-01间,本院共收治19例经Tile分类确定为不稳定型骨盆骨折并行手术治疗,术中使用重建钢板14例,使用重建钢板联合拉力螺钉5例。结果术后随访5～28个月,平均15.2个月。骨折愈合,患者满意。根据Mcars的影像学评价标准,本组骨盆解剖复位15例,复位满意4例。结论手术复位,合理的内固定可有效复位固定骨折,矫正畸型,恢复骨盆的稳定性,减少后遗症的发生。

依达拉奉体外诱导大鼠骨髓基质干细胞分化为神经元样细胞的电生理研究

目的探讨新型氧自由基清除剂依达拉奉诱导大鼠骨髓基质干细胞分化为神经元样细胞的电生理特性。方法Ficoll-Paque分离液离心分离大鼠骨髓基质干细胞,体外扩增,含依达拉奉的无血清L-DMEM诱导。观察细胞形态变化,Western-blot检测分化前后细胞膜离子通道蛋白表达,全细胞膜片钳检测细胞电生理特性。结果分化的骨髓基质干细胞胞体收缩,突起伸出;钠、钾、钙膜蛋白分化前后均有表达,分化后钾、钠、钙膜蛋白表达上调;分化后细胞静息电位值增大,外向电流增大,尤以外向整流钾电流显著。结论依达拉奉诱导大鼠骨髓基质干细胞分化的细胞具有神经细胞电生理特性。

明胶和京尼平粘合自体颗粒骨修复兔桡骨缺损的实验研究

目的探讨以明胶和京尼平粘合自体颗粒骨修复新西兰大白兔桡骨缺损的效果,为临床应用提供依据。方法取24只新西兰大白兔制成双侧前臂桡骨中段骨缺损模型,并将切除的骨质磨成颗粒骨,随机分为A、B、C、D 4组,每组为6只,A组为空白组不填充任何材料;B组单纯填充明胶、京尼平;C组单纯植入400 mg自体颗粒骨;D组填充明胶、京尼平+200 mg自体颗粒骨。各组术后2、4、8周时各处死动物兔2只,取材检测,通过观察大体标本、X线片、组织学检查评估骨缺损修复能力。结果在术后各时期,A、B组骨缺损模型均无骨愈合迹象,形成陈旧性骨缺损。术后C、D组均有良好的骨修复效果,但D组在防止颗粒骨移位流失、骨融合程度、新骨形成量、骨塑形改建方面优于C组。结论明胶、京尼平具有粘合自体颗粒骨修复骨缺损的能力。

Edaravone体外诱导rBMSCs分化为神经元样细胞

目的:探讨新型氧自由基清除剂依达拉奉诱导大鼠骨髓基质干细胞(rat bone marrow stromalcells,rBMSCs)分化为神经元样细胞的可行性。方法:采用密度梯度离心法和贴壁法分离纯化1月龄SD rBMSCs,体外培养扩增与传代,实验分依达拉奉处理组和空白对照组,每组各10例。处理组用终浓度0.02g/L依达拉奉的无血清L-DMEM诱导6h,对照组继续用10%胎牛血清、L-DMEM培养。观察细胞形态变化,免疫细胞化学鉴定神经元烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白、巢蛋白、微管相关蛋白2的表达。结果:分化的rBMSCs胞体收缩,突起伸出;诱导后细胞神经元烯醇化酶阳性表达率(81.6±3.2)%,微管相关蛋白2阳性表达率(26.0±2.5)%,胶质纤维酸性蛋白阳性表达率(5.6±1.9)%,巢蛋白阳性表达率(9.0±2.8)%。对照组均阴性表达。两组NSE、GFAP、Nestin比较差异均有统计学意义(P<0.001),处理组NSE阳性表达明显高于MAP2、GFAP(P<0.005)。结论:依达拉奉可以诱导rBMSCs分化为神经元样细胞,从而为脊髓损伤的治疗提供种子细胞和理论基础。

积雪草酸对骨质疏松模型大鼠生物力学特性与骨小梁面积及Runx2蛋白的影响

背景:研究证实,积雪草酸以浓度依赖的方式促进成骨细胞分化,抑制成骨细胞凋亡,但目前关于积雪草酸对骨生物力学、Runx2蛋白的具体作用机制尚不明确。目的:探究积雪草酸对骨质疏松大鼠生物力学特征、骨小梁面积及Runx2蛋白的影响。方法:选用SD大鼠48只,随机分为假手术组、模型组、积雪草酸低剂量组和高剂量组各12只。除假手术组外其余大鼠双侧去卵巢建立骨质疏松模型,假手术组和模型组大鼠术后3 mL/(kg·d)生理盐水灌胃;积雪草酸低剂量组60 mg/(kg·d)积雪草酸灌胃;积雪草酸高剂量组120 mg/(kg·d)积雪草酸灌胃,各组大鼠均干预60 d。RT-PCR、Western blot检测检测骨保护素、Runx2的mRNA和蛋白水平,比较各组大鼠股骨生物力学特征、骨小梁面积及血清炎性因子水平的差异性。结果与结论:①大鼠最大载荷、刚度、总能量、弹性模量值假手术组高于模型组(P<0.05);与模型组相比,积雪草酸低、高剂量组上述指标均有所提高(P<0.05),且积雪草酸高剂量组高于积雪草酸低剂量组(P<0.05);②骨小梁面积假手术组高于模型组(P<0.05);模型组低于积雪草酸低、高剂量组(P<0.05);积雪草酸高剂量组高于低剂量组(P<0.05);③大鼠血清转化生长因子β1的水平模型组显著低于其他3组(P<0.05),积雪草酸高剂量组高于低剂量组(P<0.05);骨钙素、碱性磷酸酶、肿瘤坏死因子α水平模型组显著高于其他3组(P<0.05),积雪草酸高剂量组低于低剂量组(P<0.05);④骨保护素和Rnux2的mRNA表达水平假手术组高于模型组和积雪草酸低剂量组(P<0.05);积雪草酸高剂量组高于假手术组(P<0.05);⑤骨保护素、Rnux2蛋白表达水平模型组低于其他3组,积雪草酸高剂量组高于低剂量组;⑥结果说明,积雪草酸可改善骨质疏松模型大鼠骨生物学特征,提高骨小梁面积、降低炎性水平,其作用机制可能与促进Runx2表达有关。

依达拉奉联合表皮生长因子诱导人骨髓间充质干细胞神经元样细胞分化中端粒酶活性的变化

目的观察依达拉奉联合表皮生长因子(EGF)诱导人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)神经元样细胞分化过程中端粒酶活性的变化。方法依达拉奉联合EGF诱导hBMSCs,观察其形态变化。免疫细胞化学法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达,采用TRAP-ELISA和Western blotting分别检测诱导后hBMSCs端粒酶活性及端粒酶逆转录酶(TERT)变化。结果经诱导后,hBMSCs呈典型神经元样细胞分化,NSE阳性率为81.7%,GFAP阳性率为8.5%。端粒酶活性和TERT蛋白诱导4h后均无明显变化,但诱导6h后细胞端粒酶活性明显降低,诱导至24h时,细胞端粒酶活性已近阴性。Western blotting试验的结果与细胞端粒酶活性的改变一致。结论依达拉奉联合表皮生长因子体外可以诱导hBMSCs分化为神经元样细胞,端粒酶活性在诱导分化早期呈高表达,分化过程中逐渐降低直至消失。

二甲双胍治疗强直性脊柱炎模型小鼠后的骨密度与关节炎评分变化

目的探讨二甲双胍治疗强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)模型小鼠后的骨密度与外周关节炎评分影响。方法研究时间为2021年9月至2022年6月。蛋白聚糖诱导BLAB/c小鼠,建立AS小鼠模型,小鼠分为3组:二甲双胍模型组、模型对照组、空白对照组,每组10只。实验模型组小鼠灌胃二甲双胍、模型对照组和空白对照组小鼠灌胃生理盐水,每天1次,连续3周。观察小鼠攀爬悬吊活动情况,病变关节进行评分,测定各组小鼠骨密度。采用t检验进行统计分析。结果诱导免疫8周后小鼠出现外周关节炎症状,模型小鼠在12周关节炎评分分值达到顶峰。模型小鼠攀爬悬吊活动能力下降。二甲双胍模型组小鼠关节炎评分明显低于模型对照组小鼠,模型对照组小鼠骨密度明显低于空白组的骨密度。二甲双胍模型组小鼠骨密度明显改善,与模型对照组[股骨:(0.101±0.003)g/cm^(2)比(0.029±0.009)g/cm^(2),胫骨:(0.070±0.005)g/cm^(2)比(0.025±0.007)g/cm^(2),腰椎:(0.060±0.007)g/cm^(2)比(0.043±0.004)g/cm^(2)]比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论二甲双胍能明显改善AS模型小鼠外周关节炎症状和提升骨密度。

仅有骨肥厚表现的SAPHO综合征1例报道

SAPHO是滑膜炎(synovitis)、痤疮(acne)、脓疱病(pustulosis)、骨质增生(hyperostosis)和骨髓炎(osteitis)首字母缩写,是一种累及骨、关节和皮肤的慢性非细菌性炎症症候群。成人多见,且多为40~60岁女性[1]。发病率国内未见相关报道,据国外报道,发病率低于0.01%[2],属于罕见病。2022年6月10日广东医科大学附属医院收治1例SAPHO综合征患者,现报告如下。1病历资料1.1一般资料65岁女性患者,因“发现右锁骨肿物30余年、疼痛1年余”就诊。患者30余年前无明显诱因出现右锁骨肿物,初始如指甲盖大小,质地硬,表面光滑,固定无活动,无压痛,无明显夜间痛,未予诊治。1年前患者自觉右锁骨肿物处疼痛,且肿物明显增大;疼痛呈持续性,程度较重,常有夜间痛,影响睡眠。遂至本院骨科门诊就诊。