lncRNA DRAIC通过调控自噬影响结直肠癌细胞增殖与凋亡

目的:探讨lncRNA DRAIC对结直肠癌(colorectal cancer, CRC)细胞自噬、增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:使用GEPIA 2.0数据库分析DRAIC在CRC组织中的表达及预后价值。受试者工作特征(ROC)曲线评估DRAIC在CRC中的诊断价值。利用UALCAN在线数据库分析DRAIC的表达与CRC临床病理指标的关系。在CRC细胞系HCT-116和HT-29中转染DRAIC过表达质粒(OE-DRAIC)以过表达DRAIC,CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞技术和TUNEL实验检测细胞凋亡情况,Western blot检测LC3B、Cleaved caspase-3、Cleaved PARP和AKT/mTOR通路蛋白的表达。转染OE-DRAIC并加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)后,再采用同上方法分别检测CRC细胞的增殖、凋亡情况,以及LC3B、Cleaved caspase-3和Cleaved PARP蛋白的表达。结果:DRAIC在CRC组织中表达显著下调,ROC曲线下面积(AUC)为0.781。低表达DRAIC的CRC患者总生存率较差。DRAIC低表达与肿瘤分期、组织学分型、体重等临床病理指标相关。过表达DRAIC后,CRC细胞增殖能力减弱,凋亡率增加,Cleaved caspase-3、Cleaved PARP、LC3B-II/LC3B-I蛋白表达上调,p-AKT和p-mTOR蛋白相对表达量下调(P<0.05)。加入3-MA后,与OE-DRAIC组相比,OE-DRAIC+3-MA组HCT-116和HT-29细胞的增殖能力增强,凋亡率下降(P<0.05),HCT-116细胞的LC3B-II/LC3B-I蛋白相对表达量、Cleaved caspase-3和Cleaved PARP蛋白表达下调(P<0.05)。结论:DRAIC在CRC组织中低表达,并与CRC患者较差的预后相关,DRAIC通过增强CRC细胞自噬,从而抑制细胞增殖和促进细胞凋亡。

《内科学》在线开放课程建设实践与思考

《内科学》是临床医学中的主干课程,与临床各科关系极为密切。以在线开放课程建设和应用为重要手段,推动信息技术与教育教学的深度融合,是当前高等教育教学改革的主要方向之一。《内科学》在线开放课程的建设,为教学方法改革提供了有利条件。将线上课程资源和线下课堂的优势结合,形成以学生为中心的线上线下混合式教学模式,可充分调动学生学习的积极性,有助于培养其自主学习、分析和解决问题的能力。在线开放课程需要持续地更新与完善,使其真正成为教与学交流互动的网络平台,服务于一流本科、一流专业、一流人才的建设目标。本文以广东医科大学《内科学》在线开放课程为例,总结建设及应用经验,以期为同类医学在线课程建设提供借鉴和参考。

miR-192与ZEB2在结直肠癌中的表达及其临床意义

背景与目的:微小RNA(microRNA,miRNA)是一类具有重要调控作用的非编码小分子RNA,在多种疾病的发生、发展中起重要作用。本研究通过检测结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织中miR-192及E盒结合锌指蛋白2(zinc finger E-box binding homeobox 2,ZEB2)mRNA、蛋白表达,分析miR-192的异常表达与CRC的临床病理特征的关系及与ZEB2的相关性。方法:选择CRC组织和癌旁组织(距肿瘤边缘≥5 cm)各30例,结直肠腺瘤组织25例,正常结直肠组织15例。实时定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reation,qRT-PCR)法检测上述各组中miR-192及ZEB2 mRNA表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测ZEB2蛋白表达;对CRC组织中miR-192与临床病理特征关系及前者与ZEB2的相关性进行分析。结果:CRC组miR-192表达明显下调,ZEB2 mRNA和蛋白表达明显上调,分别与癌旁组、结直肠腺瘤组及正常组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);miR-192的表达下调与CRC的淋巴结转移(P=0.021)和远处转移(P=0.023)相关。在CRC组织中,miR-192与ZEB2蛋白的表达呈显著的负相关关系(r=-0.365,P<0.05)。结论:miR-192在CRC组织中的表达下调与肿瘤的转移有关,且可能通过ZEB2参与CRC的发生、发展过程。

miR-20b对大肠癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制的研究

目的探讨miR-20b对大肠癌(CRC)细胞增殖凋亡的影响及机制。方法将miR-20b模拟物转染CRC细胞株HCT-116,qRT-PCR检测转染后miR-20b的表达,分别应用CCK-8实验及流式细胞仪检测转染后细胞增殖和凋亡情况。qRT-PCR和western blot检测转染后Bcl-w mRNA和蛋白的表达情况。结果转染miR-20b模拟物后,HCT-116细胞中miR-20b表达水平明显上调,HCT-116细胞增殖减弱(P<0.05),凋亡增强(P<0.05)。miR-20b可作用于Bcl-w mRNA的3'-UTR,使海肾荧光素酶活性显著降低。转染后Bcl-w mRNA及蛋白表达水平明显下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论上调HCT-116细胞中miR-20b表达水平,可抑制其靶基因Bcl-w的表达,发挥抑制细胞增殖、增加凋亡的作用。

miR-30c表达调控对大肠癌细胞生物学行为的影响及其机制探讨

目的:探讨上调miR-30c的表达对大肠癌(CRC)细胞生物学行为的影响及可能的机制。方法:将miR-30c模拟物转染CRC细胞株SW620,qRT-PCR方法检测转染后miR-30c的表达,CCK-8法检测细胞增殖情况,Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力的改变,qRT-PCR和Western blot检测转染后SNAI2 mRNA和蛋白的表达。结果:转染miR-30c模拟物后,SW620细胞的miR-30c表达明显增高,细胞增殖减少(P<0.05),凋亡增加(P<0.05),侵袭能力显著降低(P<0.05)。SNAI2 mRNA及蛋白表达水平明显下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:SW620细胞miR-30c表达上调,可抑制细胞增殖和侵袭、诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制SNAI2表达相关。

骨髓间充质干细胞在小肠黏膜损伤小鼠体内的定植

目的:探讨小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植于小肠放射性损伤的小鼠体内后的定植情况.方法:体外培养扩增♂昆明小鼠MSCs,然后采用性别交叉移植的方法,即移植组:经尾静脉注射雄性小鼠MSCs进入小肠放射性损伤的雌性小鼠体内;对照组:注射等量无菌生理盐水.分别于第1、2、4周通过原位杂交检测Y染色体观察MSCs的定植情况.结果:移植组小鼠于移植后第1周即可检出Y染色体阳性荧光细胞的存在,呈零星散在分布,且多位于隐窝周围的黏膜下层,阳性率为19.48%±5.01%;第2周荧光细胞明显增多,阳性率为30.86%±12.14%,差异显著(P<0.05);第4周阳性率为35.92%±11.98%,差异不显著(P>0.05).结论:MSCs移植于小肠放射性损伤的小鼠体内后可以在小肠定植,且主要定植于黏膜下层.

以病例为基础的学习教学法在消化内科临床见习教学中的应用

目的研究以病例为基础的学习(CBL)教学法在消化内科临床见习教学中的应用效果。方法 2012年3月至2013年5月随机选择2009级本科临床专业的128名学生,分为CBL组和对照组各64名,分别对其采用CBL教学法和常规教学法。采用问卷调查与考试相结合的方式对教学效果进行评价。结果 CBL组学生对CBL教学法的总体满意度较高。考核显示CBL组学生对知识和病历书写的掌握程度较对照组好,且总成绩优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CBL教学法教学效果较好,能促进学生对知识的理解掌握,提高学生的临床分析能力,是值得推广应用的教学方法。

miR-195表达调控对大肠癌细胞HT-29增殖和凋亡的影响及其机制探讨

目的:探讨miR-195对大肠癌细胞HT-29增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法:应用脂质体转染的方法,将miR-195 mimics转染入HT-29细胞,q RT-PCR检测转染后miR-195的表达,分别采用CCK-8法及流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况,qRT-PCR和Western blot检测转染后VEGFA mRNA和蛋白表达变化。结果:与NC组比较,miR-195 mimics转染组明显上调HT-29细胞miR-195的表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,下调VEGFA mRNA及蛋白表达,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:上调HT-29细胞的miR-195表达,可明显抑制细胞增殖、促进细胞凋亡,其机制可能与抑制其靶基因VEGFA表达相关。

老年肝硬化患者合并医院感染危险因素分析

目的探讨老年肝硬化患者合并医院感染的相关因素,为该类患者的治疗与预防工作提供理论依据。方法回顾性分析我院2009年1月至2013年12月收治的200例老年肝硬化患者的临床资料,探讨老年肝硬化患者合并医院感染的相关因素。结果 200例患者中,医院感染发生率为21.5%(43/200),病原菌检出率为81.4%(35/43)。>65岁的患者医院感染率高于<65岁患者;住院时间>20 d的患者医院感染率高于住院时间<20 d的患者;白蛋白<3.0 g/dl的患者医院感染率高于白蛋白≥3.0 g/dl的患者;有侵袭性操作、并发症、应用抗生素的患者医院感染率高于无侵袭性操作、无并发症、未用抗生素的患者;Child-Pugh分级越高的患者,医院感染率越高,所有差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论老年肝硬化患者易发生医院感染,病原菌以革兰阳性菌为主。患者合并医院感染的危险因素众多,临床工作人员应行对因治疗,并制定相应预防措施,以降低医院感染发生率。

消化内科临床教学中医学生临床思维能力的培养

目的探索在消化科临床教学中培养临床思维能力的教学方式及其效果。方法选择2013年9月至2014年1月广东医学院2009级本科临床医学专业学生106名作为研究对象,随机分为观察组和对照组,各53名。观察组采用培养临床思维能力为主的综合教学方式,观察组采用传统的临床教学方法进行教学。比较分析两种教学方式的教学效果。结果观察组学生在提高学习兴趣、培养临床思维能力、提高自主学习能力、提高沟通能力等方面的认同度均明显优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组学生的思维能力、交流能力评分均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论培养医学生临床思维的综合教学方式能显著提高教学质量,锻炼学生实践及沟通能力,有助于学生学习效率的提高。

PBL联合Seminar教学法在呼吸专硕科研能力培养中的应用

观察PBL联合Seminar教学法在呼吸内科专硕科研能力的应用效果。以30名接受传统讲授式教学的专硕为对照组,30名接受传统讲授教学和PBL联合Seminar教学法的专硕为试验组。教学结束后,比较两组出科考核成绩和调查问卷结果。前者包括理论考试及科研综合能力考核,后者包括文献阅读数量、自主学习能力、科研思维能力、科研写作能力和问题分析能力、科研经历及科研产出。与对照组相比,试验组的出科考核成绩和科研综合能力显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);其自主学习、科研思维、科研写作、问题分析能力、科研经历及科研产出亦明显提升,差异有统计学意义(P<0.05)。PBL联合Seminar教学法能激发研究生的学术兴趣和动力,提高学生的科研能力。

IGF2BP1在消化系统肿瘤中的研究进展

胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)在多种肿瘤中异常表达,是介导多种肿瘤进展的关键转录调节因子,并作为一种RNA结合蛋白,通过与不同靶RNA相互结合发挥作用。其在转录及转录后水平调控RNA表达,不仅影响肿瘤的增殖、凋亡、侵袭、转移及耐药,还与肿瘤患者的预后相关,有望成为肿瘤诊断和治疗的靶标。IGF2BP1亦可介导消化系统肿瘤的发生、发展,因此探究IGF2BP1在消化系统肿瘤中的作用、发生机制、信号通路作用机制以及基于IGF2BP1的治疗应用具有重要意义。

长链非编码RNA调控结直肠癌调节性细胞死亡的研究进展

调节性细胞死亡(RCD)是一种由基因控制的细胞自主有序的死亡过程,在人体的正常生长发育以及不同疾病(如神经退行性疾病、缺血性损伤、自身免疫性疾病)过程中普遍存在,并与多种肿瘤的进展有关。长链非编码RNA(lncRNA)在结直肠癌(CRC)等肿瘤中起着复杂的作用,是介导CRC发生发展的重要调节因子之一。lncRNA可在转录前、转录中以及转录后等水平上影响基因的表达,不仅与CRC细胞的增殖、迁移、侵袭有关,还调控CRC细胞的RCD过程。因此,探讨lncRNA在CRC细胞不同类型RCD中的作用,对开发新的CRC诊断及预后标志物和治疗手段具有重要意义。

消化系统肿瘤m6A甲基化修饰对非编码RNA调控的研究进展

m6A甲基化修饰是哺乳动物中最丰富的RNA修饰方式,是表观遗传学重要的调控方法之一,通过添加、移除或者识别结合m6A位点,参与RNA合成与代谢过程,进而调控基因的表达。非编码RNA(ncRNA)是一类缺乏编码多肽或蛋白质能力的RNA,在肿瘤的发生和发展中发挥着重要作用,是癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭、耐药等生物学特性的调节因子。越来越多的研究表明,m6A甲基化修饰可通过调控ncRNA参与肿瘤的发生和发展。本研究就消化系统肿瘤中m6A甲基化修饰对ncRNA表达调控的研究进展作一综述。

长链非编码RNA调控细胞自噬参与消化系统肿瘤发生发展的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度超过200个核苷酸,不具备编码蛋白质能力的RNA。lncRNA可在染色质修饰、转录和转录后等不同水平调控基因表达,参与肿瘤的发生发展。自噬是发生在真核细胞内依赖溶酶体的分解代谢过程,通过降解和循环利用细胞中受损的细胞器或多余的蛋白质,从而维持细胞内环境的动态平衡。自噬异常与肿瘤的发生发展密切相关。lncRNA可通过调控细胞自噬的启动、自噬体囊泡成核、自噬体膜的伸长、自噬体与溶酶体融合等来影响自噬,参与多种消化道肿瘤的恶性进程。本文就lncRNA调控细胞自噬参与消化系统肿瘤发生发展的研究进展展开综述。

形成性评价在临床医学教学中的应用探讨及思考

课程考核是教学的重要环节,是评价教育教学效果和学生知识掌握情况的主要手段。单一的终结性评价难以全面客观地衡量学生综合水平。形成性评价既对教师教学方法进行评估,也能评价学生各方面素质,是未来教学的趋势。形成性评价有助于提高教师教学能力和教学效果,培养自主学习能力,但目前实施中存在一些问题。如何根据校情探索适合本学科的科学、公平、公正的形成性评价体系,需要教师在教学实践中不断研究。

实验性结肠炎小鼠结肠紧密连接蛋白的变化及意义

目的建立小鼠葡聚糖硫酸钠(DSS)结肠炎模型,观察其结肠黏膜炎症情况和紧密连接蛋白的表达变化及意义。方法 20只BALb/c小鼠随机分为DSS组及正常对照组,每组10只。DSS组小鼠每日自由饮用5%DSS溶液,连续7d,第8天后改为饮用正常水3 d;正常对照组饮用正常水10 d。每天进行体质量测量和疾病活动指数(DAI)评分。于第10天取结肠,检测小鼠髓过氧化物酶(MPO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、闭锁蛋白(occludin)和紧密连接相关蛋白-1(ZO-1)的表达并进行相关性分析。结果与正常对照组比较,DSS组小鼠体质量下降、DAI评分增高、结肠长度缩短;结肠MPO和TNF-α表达上调,occludin、ZO-1表达降低(均P<0.05)。DSS组小鼠结肠TNF-α表达与occludin、ZO-1表达均呈负相关(r值分别为-0.728和-0.718,P<0.05)。结论 DSS诱导结肠炎小鼠结肠紧密连接蛋白occludin和ZO-1表达下降,TNF-α可能通过下调occludin和ZO-1表达,使肠黏膜屏障功能受损,参与肠道炎症的发生发展。

CXC趋化因子配体14在炎症性疾病中作用的研究进展

CXC趋化因子配体14(CXCL14)是一种具有广泛生物活性的新型趋化因子,在皮肤、肾脏、胃肠道、脂肪等多种组织中均有表达。CXCL14主要通过聚集、激活多种类型免疫细胞,参与自身免疫性疾病、脓毒血症相关的急性肾损伤、缺血性脑卒中、急性肝损伤、感染性疾病等炎症性疾病的发生发展,发挥促炎或抗炎作用,可能为多种疾病的防治提供新靶点和方法。

食管溃疡207例胃镜诊断结果分析

目的探究食管溃疡207例胃镜诊断结果。方法收集2010年12月1日~2020年12月31日期间于广东医科大学附属医院消化内科门诊胃镜室行胃镜检查确诊为食管溃疡的患者207例,对胃镜诊断结果行回顾性分析。结果207例患者食管溃疡病因前三位是特发性食管炎、食管物理损伤及反流性食管炎。且经分析发现61~90岁年龄段患者病因首位是食管恶性肿瘤,≤60岁者病因首位是特发性食管炎。食管溃疡集中发病于食管中下段,病因首位是特发性食管炎,而食管上段病因首位是食管物理损伤。食管溃疡主要为单发,病因首位是特发性食管炎,而食管多发溃疡病因首位是反流性食管炎。食管溃疡病灶直径≥2 cm者病因首位是食管恶性肿瘤,而病因最为少见的是反流性食管炎。结论207例食管溃疡患者经电子胃镜检查确诊,且分析发现该病病因与患者年龄、溃疡发病部位、溃疡数量及直径大小相关。通过电子胃镜诊断确诊,并详加分析食管溃疡不同病因所致特点等,利于较好掌控病症,便于诊治。