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基因工程菌Pichia pastoris连续培养的生长及抑制动力学 被引量:7
1
作者 吴康华 郭美锦 +2 位作者 庄英萍 储炬 张嗣良 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期605-609,共5页
在同一稀释率μ(μ=0 .1 4h-1)下用不同浓度的甘油流加进行连续培养 ,研究甘油浓度对基因工程菌毕赤酵母 ( Pichia pastori)生长的影响。结果表明甘油浓度对细胞生物量 ( DCW和WCW)、底物得率系数 ( YX/ S)、底物比消耗速率 ( qs)、呼吸... 在同一稀释率μ(μ=0 .1 4h-1)下用不同浓度的甘油流加进行连续培养 ,研究甘油浓度对基因工程菌毕赤酵母 ( Pichia pastori)生长的影响。结果表明甘油浓度对细胞生物量 ( DCW和WCW)、底物得率系数 ( YX/ S)、底物比消耗速率 ( qs)、呼吸熵 ( RQ)与二氧化碳释放率 ( CER)都有影响 ,在低甘油残留浓度 ( <63.3g/L)下 ,甘油是激活剂 ,菌体生长符合 Monod方程 ,Ks=1 9.62 g/L,甘油激活常数 Ka=1 9.45 g/L;而在高甘油残留浓度 ( >63.3g/L )下甘油是抑制剂 ,菌体生长特征符合 Haldance方程 ,Ks=0 .0 1 4g/L,KI=1 5 6.67g/L。毕赤酵母生长的甘油抑制浓度为 5 5 .42 展开更多
关键词 基因工程菌 毕赤酵母 连续培养 生长动力学 重组人血清白蛋白 抑制动力学 甘油浓度
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基因工程菌Pichia pastoris高密度培养条件研究 被引量:20
2
作者 郭美锦 吴康华 +3 位作者 杭海峰 储炬 庄英萍 张嗣良 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期6-11,共6页
基因工程菌pichiapastoris最佳种子培养基为添加 4mL/LPTMl的BMGY培养基 ;全合成高密度摇瓶培养基是甘油 4% ,(NH4) 2 SO41 0g/L ,CaSO40 93g/L ,K2 SO41 8 2g/L ,MgSO4·7H2 O 1 4 9g/L ,0 1mol/L磷酸缓冲液 (pH =6 0 )配制 ,培养... 基因工程菌pichiapastoris最佳种子培养基为添加 4mL/LPTMl的BMGY培养基 ;全合成高密度摇瓶培养基是甘油 4% ,(NH4) 2 SO41 0g/L ,CaSO40 93g/L ,K2 SO41 8 2g/L ,MgSO4·7H2 O 1 4 9g/L ,0 1mol/L磷酸缓冲液 (pH =6 0 )配制 ,培养 2 6h后细胞密度OD60 0 可达到 65。经SDS PAGE电泳图谱分析 ,甲醇诱导培养 72h结果 :1 2h有重组人血清白蛋白表达 ,2 4h达到最大。此全合成摇瓶培养基与批补料发酵培养基相类似 ,有利于指导发酵罐上发酵培养。 展开更多
关键词 基因工程菌 毕赤酵母 高密度培养
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重组巴氏毕赤酵母恒化培养动力学及代谢迁移特性研究 被引量:8
3
作者 郭美锦 吴康华 +2 位作者 庄英萍 储炬 张嗣良 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期617-624,共8页
通过对甲醇营养型毕赤酵母基因工程菌以碳源甘油为限制性基质进行恒化培养动力学试验 ,结果认为 :(1 )细胞光密度与其干、湿重呈线性关系 ,当细胞光密度 (OD60 0 )为 1 0 0时细胞湿重 (WCW)为 1 2 8 3g L ,细胞干重 (WDW)则为 2 2 9g L... 通过对甲醇营养型毕赤酵母基因工程菌以碳源甘油为限制性基质进行恒化培养动力学试验 ,结果认为 :(1 )细胞光密度与其干、湿重呈线性关系 ,当细胞光密度 (OD60 0 )为 1 0 0时细胞湿重 (WCW)为 1 2 8 3g L ,细胞干重 (WDW)则为 2 2 9g L ;(2 )基因工程菌P .pastoris的生长与限制性基质甘油残留浓度的关系符合Monod关系式 ,通过 1 μ对 1 S进行线性回归得 μmax=0 .366h- 1,Ks=0 .1 82 3g L ,经参数推导甘油最大菌体得率系数YG =0 .54g g ,菌体维持生长消耗底物系数m =0 .0 0 69g (g·h) ;氧最大菌体系数YX O2 =30 .96g moL ,菌体维持生长时消耗氧系数mO2 =0 .0 0 0 8mol (g·h) ,最适理论稀释速率Dm =0 .341h- 1;(3)从氨水的消耗速率和呼吸商 (RQ)的变化认为随着比生长速率 (μ)的增大 ,甘油代谢流从糖原异生和磷酸戊糖途径线性地向糖酵解和三羧酸循环途径进行代谢迁移 。 展开更多
关键词 甲醇营养型毕赤酵母 恒化培养 代谢迁移 动力学 重组人血清白蛋白
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毕赤氏酵母工程菌高密度发酵表达恶性疟原虫融合抗原的研究 被引量:5
4
作者 郭美锦 吴康华 +5 位作者 储炬 庄英萍 张嗣良 黄大庆 张青锋 潘卫庆 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期456-459,共4页
The effects of cultural conditions,which were fermentation period when methanol was as sole carbon source,methanol concentration,range of pH,on the expression of the chimeric protein of Plasmodium falciparum in geneti... The effects of cultural conditions,which were fermentation period when methanol was as sole carbon source,methanol concentration,range of pH,on the expression of the chimeric protein of Plasmodium falciparum in genetically engineered methylotrophic Pichia pastoris were investigated by shake flask experiments in this paper.The results showed:(1)fermentation period with methanol inducement is about 96 hours;(2)the optimum methanol concentration as sole carbon source is 10g/L;(3)the range of pH is from 6.0 to 7.0. On the base of above experimental results the cell high-density fermentation had been done on the FMG-5L fermentor with multi-sensors.The results showed that the cell optical density (OD 600) can reached 550 and the ma-ximum expression level of target proteins was 780mg/L which was 4 times higher or more than the shake flask culture’s. 展开更多
关键词 甲醇营养型毕赤酵母 恶性疟原虫融合抗原 发酵条件 优化 高密度发酵 表达
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基因工程菌Pichia pastoris高密度发酵表达重组人血清白蛋白 被引量:4
5
作者 郭美锦 庄英萍 +2 位作者 吴康华 储炬 张嗣良 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期101-103,116,共4页
在摇瓶条件下对基因工程菌 Pichia pastoris的发酵条件进行了实验 ,并根据摇瓶发酵的优化结果进行了补料分批高密度发酵。在分批发酵时 ,接种量为 1 0 %且种子细胞光密度 ( OD60 0 )为2 0左右时 ,细胞生长的延迟期约为 2 .1 1 h,细胞生... 在摇瓶条件下对基因工程菌 Pichia pastoris的发酵条件进行了实验 ,并根据摇瓶发酵的优化结果进行了补料分批高密度发酵。在分批发酵时 ,接种量为 1 0 %且种子细胞光密度 ( OD60 0 )为2 0左右时 ,细胞生长的延迟期约为 2 .1 1 h,细胞生长光密度与培养时间的关系模型为 :y=0 .7841 e0 .2 319t(线性相关系数 r=0 .9936) ;在补料发酵时细胞浓度可达 1 1 5 g/L~ 1 60 g/L (干重 ) ,在 1 2 0 h重组人血清白蛋白表达量达 3. 展开更多
关键词 重组巴氏毕赤酵母 高密度发酵 重组人血清蛋白 基因表达 分批发酵 补料发酵
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CO在煤体表面的物理吸附特性模拟研究 被引量:4
6
作者 邓军 吴康华 +2 位作者 翟小伟 张嬿妮 李培煊 《煤炭工程》 北大核心 2011年第12期88-90,共3页
文章以CO作为研究对象,采用量子化学方法,基于密度泛函理论(DFT),选取B3LYP/6-311G基组,模拟研究CO在煤表面不同位置的吸附特性。模拟计算结果表明:CO能够在煤体表面发生物理吸附,CO在羧基上吸附时,释放的吸附能约为151.17kJ/mol,说明... 文章以CO作为研究对象,采用量子化学方法,基于密度泛函理论(DFT),选取B3LYP/6-311G基组,模拟研究CO在煤表面不同位置的吸附特性。模拟计算结果表明:CO能够在煤体表面发生物理吸附,CO在羧基上吸附时,释放的吸附能约为151.17kJ/mol,说明吸附作用较强;而CO在煤表面其他位置吸附,吸附能为负值,说明CO需要从外界吸收部分能量才能发生吸附,即CO能够在氧化程度比较高或者高温区域附近的煤体表面吸附能力较强。 展开更多
关键词 煤体表面 密度泛函理论 CO物理吸附 模拟
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上覆煤层房柱式采空区高浓度CO威胁的综合措施防治 被引量:10
7
作者 徐俊 李金亮 吴康华 《中国煤炭》 北大核心 2013年第7期105-108,共4页
针对龙华煤矿上覆煤层房柱式采空区高浓度CO威胁,首先采用充填封堵切断CO来源,然后注氮气降低CO浓度,最后采用局部正压通风防治CO涌出。实践结果表明,通过以上综合措施将上覆煤层房柱式采空区CO浓度由0.6%降至最低0.000046%,且回采过程... 针对龙华煤矿上覆煤层房柱式采空区高浓度CO威胁,首先采用充填封堵切断CO来源,然后注氮气降低CO浓度,最后采用局部正压通风防治CO涌出。实践结果表明,通过以上综合措施将上覆煤层房柱式采空区CO浓度由0.6%降至最低0.000046%,且回采过程中本煤层工作面上隅角CO浓度未超过0.000024%。 展开更多
关键词 上覆煤层 房柱式采空区 充填封堵 注氮 局部正压通风 CO浓度
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煤低温氧化的红外光谱研究 被引量:4
8
作者 李涛 张辛亥 +1 位作者 吴康华 王楠 《价值工程》 2011年第21期32-33,共2页
利用傅立叶红外光谱(FTIR)分析了下沟煤矿8#煤层煤样经过不同温度、不同时间氧化的产物中,各官能团的组成及变化,研究了煤中部分官能团随氧化温度和时间变化的规律,据此推测了煤低温氧化的反应历程。
关键词 红外光谱技术 煤低温氧化 特征官能团的变化
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论我国新农村产业经济建设过程中需要注意的问题
9
作者 吴康华 《集团经济研究》 北大核心 2007年第09Z期54-54,共1页
我国自改革开放20多年来,经济取得了突飞猛进的发展,综合经济实力明显增强,人民生活水平也得到显著提高,农业、农村产业和农民问题也已经取得了举世瞩目的成就。然而同城市经济发展较快相比,农村产业经济发展速度缓慢,农村经济与... 我国自改革开放20多年来,经济取得了突飞猛进的发展,综合经济实力明显增强,人民生活水平也得到显著提高,农业、农村产业和农民问题也已经取得了举世瞩目的成就。然而同城市经济发展较快相比,农村产业经济发展速度缓慢,农村经济与城市经济发展之间的差距越来越大。尽管最近几年,国家明显加大了对三农的扶植力度,提出了统筹城乡发展是重中之重和多子少取以及工业反哺农业,城市支持农村等一系列重要方针,实行了一系列强有力的支持三农政策措施。但是,我国的三农工作形势依然严峻,社会主义新农村建设仍面临的许多问题亟须解决。 展开更多
关键词 农村产业 经济建设 城市经济发展 社会主义新农村建设 工业反哺农业 综合经济实力 人民生活水平 经济发展速度
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论我国构建和谐社会过程中的城乡统筹问题
10
作者 吴康华 《集团经济研究》 北大核心 2007年第08Z期52-52,共1页
树立和落实科学发展观,统筹城乡发展,加快推进农村“三化”步伐,是新时期解决“三农”问题的根本途径,也是加强党的执政能力建设的重要内容,意义重大,任务艰巨。广东省委书记张德江曾多次强调,解决“三农”问题,要“反弹琵琶”... 树立和落实科学发展观,统筹城乡发展,加快推进农村“三化”步伐,是新时期解决“三农”问题的根本途径,也是加强党的执政能力建设的重要内容,意义重大,任务艰巨。广东省委书记张德江曾多次强调,解决“三农”问题,要“反弹琵琶”、“逆向思维”,要从统筹城乡发展的高度,推进“三化”建设,解决“三农”问题。本文即对城乡统筹问题进行了比较细致地展开分析。 展开更多
关键词 城乡统筹 社会过程 “三农”问题 党的执政能力建设 统筹城乡发展 “三化”建设 和谐 广东省委书记
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枣泉煤矿12206综放面回收期间煤自燃治理技术研究 被引量:1
11
作者 陈志中 翟小伟 +1 位作者 刘明星 吴康华 《陕西煤炭》 2011年第6期38-40,9,共4页
根据12206综放工作面回收期间煤自然发火的特点,制订了预防为主、安全可靠的综合治理措施。采用工作面支架后部和老空区胶体隔离、深部采空区大流量注胶、注水降温的主要措施,同时辅以连续式封闭注氮,为启封后支架回收创造了条件。在工... 根据12206综放工作面回收期间煤自然发火的特点,制订了预防为主、安全可靠的综合治理措施。采用工作面支架后部和老空区胶体隔离、深部采空区大流量注胶、注水降温的主要措施,同时辅以连续式封闭注氮,为启封后支架回收创造了条件。在工作面启封后局部高温点的处理中,采用以注水、注胶为主的综合处理措施,有效地控制了CO气体的超限,保证了工作面的顺利回收。 展开更多
关键词 高分子胶体 回收 综合防灭火 煤自燃
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诱导相温度对毕赤酵母表达重组人复合α干扰素聚合的影响 被引量:12
12
作者 史琪琪 郝玉有 +3 位作者 吴康华 储炬 庄英萍 张嗣良 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期311-315,共5页
研究了Pichia pastoris表达重组人复合α干扰素(cIFN)时诱导期温度对cIFN形成聚合体的影响。在5L罐上考察毕赤酵母在不同温度(30、25、20℃)下诱导时菌体生长和cIFN表达的差异,发现毕赤酵母在20℃下菌体生长不受影响,总蛋白表达量有所降... 研究了Pichia pastoris表达重组人复合α干扰素(cIFN)时诱导期温度对cIFN形成聚合体的影响。在5L罐上考察毕赤酵母在不同温度(30、25、20℃)下诱导时菌体生长和cIFN表达的差异,发现毕赤酵母在20℃下菌体生长不受影响,总蛋白表达量有所降低,相当于30℃发酵时胞外总蛋白的67.8%。但是通过非还原性电泳、Native-PAGE及Western blotting分析发现较高温度(30℃)诱导表达时,分泌到胞外的cIFN容易形成聚合体,单体含量很少。诱导相控制温度为20℃时,明显降低了cIFN聚合体的形成,cIFN单体量为570mg/L,发酵上清液抗病毒活性为1.05×109IU/mL。与控制诱导相温度为30℃相比,cIFN单体量提高了7.2倍,发酵上清液中单位体积的cIFN抗病毒活性提高了38.7倍。 展开更多
关键词 诱导相温度 重组人复αa干扰素 聚合体 毕赤酵母
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基于3D MAX制作三维发动机课件
13
作者 林成龙 吴康华 刘畅 《商情》 2013年第20期258-258,共1页
通过设计开发航空发动机三维展示课件改变传统教学实习方式、改善实习条件,在达到教学目的的基础上节约了教学成本,使学生开展研究性学习的积极性和自主性增强,促进了学生综合素质的全面发展。文章主要介绍了计算机辅助教学的发展、... 通过设计开发航空发动机三维展示课件改变传统教学实习方式、改善实习条件,在达到教学目的的基础上节约了教学成本,使学生开展研究性学习的积极性和自主性增强,促进了学生综合素质的全面发展。文章主要介绍了计算机辅助教学的发展、应用以及3d max课件制作和flash动画展示的方法和关键技术。 展开更多
关键词 3D MAX 三维课件 计算机辅助教学
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急倾斜易自燃薄煤层群开采综合防灭火技术研究 被引量:6
14
作者 朱玉龙 张小东 +1 位作者 庞光荣 吴康华 《矿业安全与环保》 北大核心 2014年第3期78-81,84,共5页
中梁山矿区开采的急倾斜近距离容易自然发火严重突出薄煤层,灾害严重,防火问题突出,开采难度大。结合目前所采取的预防性灌注黄泥浆防灭火工艺,研究、制订并实施了阻化剂、胶体防灭火材料灌浆工艺、注氮防灭火工艺等,提出了"五步... 中梁山矿区开采的急倾斜近距离容易自然发火严重突出薄煤层,灾害严重,防火问题突出,开采难度大。结合目前所采取的预防性灌注黄泥浆防灭火工艺,研究、制订并实施了阻化剂、胶体防灭火材料灌浆工艺、注氮防灭火工艺等,提出了"五步三跟进"综合防灭火技术,在西南片区乃至南方地区类似条件下树立典型,具有广泛的推广应用价值。 展开更多
关键词 急倾斜煤层 近距离煤层群 自燃煤层 五步三跟进 防灭火技术
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急倾斜工作面综合防灭火技术研究与实践 被引量:6
15
作者 陈俊 吴康华 徐俊 《矿业安全与环保》 北大核心 2013年第4期98-101,共4页
介绍了中梁山南矿的概况、煤层赋存及工作面基本情况。针对复杂条件下工作面CO浓度异常状况,采取了灌注黄泥浆、采空区深部注氮结合其他辅助技术的综合防灭火措施。钻孔取气分析结果表明,采取综合防灭火措施之后,采空区CO浓度明显下降... 介绍了中梁山南矿的概况、煤层赋存及工作面基本情况。针对复杂条件下工作面CO浓度异常状况,采取了灌注黄泥浆、采空区深部注氮结合其他辅助技术的综合防灭火措施。钻孔取气分析结果表明,采取综合防灭火措施之后,采空区CO浓度明显下降并维持在2.0×10-5以下,采空区浮煤自燃治理效果显著。 展开更多
关键词 急倾斜工作面 煤层自燃 综合防灭火技术
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新版“中国造船质量标准(CB/T4000-2005)”修订要点注释 被引量:1
16
作者 卞中江 吴康华 《舰船标准化工程师》 2006年第4期24-28,共5页
新版“中国造船质量标准(CB/T4000-2005)”是对原中国船舶工业总公司颁发的规范性文件《中国造船质量标准(1998版)》的修订,与1998版相比,主要有了下列变化: 1)强化了生产过程中的质量控制,完善了各个施工阶段的质量控制要... 新版“中国造船质量标准(CB/T4000-2005)”是对原中国船舶工业总公司颁发的规范性文件《中国造船质量标准(1998版)》的修订,与1998版相比,主要有了下列变化: 1)强化了生产过程中的质量控制,完善了各个施工阶段的质量控制要点的内容使之更具体化; 展开更多
关键词 中国船舶工业总公司 质量标准 修订要点 造船 新版 注释 规范性文件 质量控制 生产过程 控制要点
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模拟研究CO对煤氧吸附过程的影响 被引量:1
17
作者 邓军 吴康华 +2 位作者 翟小伟 张燕妮 李培煊 《煤矿安全》 CAS 北大核心 2011年第9期16-19,共4页
选取CO作为研究对象,采用量化方法,结合密度泛函理论,应用Gaussian 03W软件,基于B3LYP/6-311G水平,模拟研究CO对煤氧吸附过程的影响。计算结果表明:O2在甲基上的吸附能约为208.47 kJ/mol,CO在甲基上的吸附能约为-129.84 kJ/mol,CO对O2... 选取CO作为研究对象,采用量化方法,结合密度泛函理论,应用Gaussian 03W软件,基于B3LYP/6-311G水平,模拟研究CO对煤氧吸附过程的影响。计算结果表明:O2在甲基上的吸附能约为208.47 kJ/mol,CO在甲基上的吸附能约为-129.84 kJ/mol,CO对O2在甲基上的吸附影响很小,但是对于煤自燃过程有延缓效果。 展开更多
关键词 模拟 量化方法 吸附
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土木工程混凝土楼板裂缝技术探微
18
作者 吴康华 《中文科技期刊数据库(全文版)工程技术》 2024年第1期0136-0139,共4页
混凝土楼板在土木工程中扮演着关键的角色,但由于各种因素,它们可能会出现裂缝问题,影响结构的安全和性能,混凝土楼板裂缝类型多样,每种类型都有其独特的成因和特点,为了确保混凝土楼板的结构安全,必须及时发现并处理裂缝,从而维护工程... 混凝土楼板在土木工程中扮演着关键的角色,但由于各种因素,它们可能会出现裂缝问题,影响结构的安全和性能,混凝土楼板裂缝类型多样,每种类型都有其独特的成因和特点,为了确保混凝土楼板的结构安全,必须及时发现并处理裂缝,从而维护工程结构的稳定性,延长建筑寿命,本文根据笔者工作实践,对混凝土楼板裂缝的原因、类型、检测方法和预防措施进行了分析和探讨。 展开更多
关键词 土木工程 混凝土 楼板 裂缝
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中梁山南矿K_1煤自燃特性实验研究 被引量:1
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作者 吴康华 《煤矿安全》 CAS 北大核心 2013年第7期21-24,共4页
采集中梁山南矿煤样,进行煤自然发火实验及相关实验。对煤氧化升温过程进行了研究和分析,得到煤样静态吸氧量,确定了以CO气体为主、辅助以C2H4气体的煤自燃监测气体指标。建立数学模型,解算得到了煤样最短自然发火期为51 d。
关键词 煤自燃 指标气体 预测预报 数学模型
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数学思想在自由组合定律中的应用 被引量:1
20
作者 吴康华 《科学中国人》 2014年第5X期73-73,共1页
前言:几年来,自由组合定律的应用作为高考出题的主干内容,一直热度不减,而高考中的自由组合定律应用题更是体现了数学思想的生物学用,是公认的难点。为突破这一难点,笔者从自身的教学实践出发,略举几例,希望对读者会有所帮助。一、理论... 前言:几年来,自由组合定律的应用作为高考出题的主干内容,一直热度不减,而高考中的自由组合定律应用题更是体现了数学思想的生物学用,是公认的难点。为突破这一难点,笔者从自身的教学实践出发,略举几例,希望对读者会有所帮助。一、理论基础1、一对等位基因控制一对相对性状------分离定律①纯合子×纯合子→F1出现某一性状的概率为100%或0比如:AA×AA→AA、aa×aa→aa、AA×aa→Aa②纯合子×杂合子→F1出现某一性状的概率为1/2或100% 展开更多
关键词 自由组合定律 纯合子 分离定律 读者会 同源染色体 品系杂交 杂合子 杂交实验 杂交组合 完全显性
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