C57BL/6J超排小鼠取卵时间对体外受精效果的影响

目的探讨雌性小鼠注射绒毛膜促性腺激素(HCG)后,取卵时间对体外受精率的影响。方法选用3~4周龄的野生型C57BL/6J雌鼠,体质量10~13 g,通过腹腔注射血清促性腺激素(PMSG)和HCG联合使用[1]做超排处理。我们将超排后雌鼠取卵时间分为6个时间段,分别为13、14、15、16、17、18 h后取卵母细胞与新鲜精子做体外受精。取3月龄雄性小鼠附睾里精子,在HTF液里获能1 h后,用于体外受精。实验共分3组,每组12只雌鼠用于超排处理,共得到2-细胞胚胎数分别为258、199和243枚;分别移植到当天见栓的假孕鼠输卵管内,得到出生仔鼠分别为98只、87只、95只;出生率分别为37.98%、43.72%和39.09%。结果总取卵数和2-细胞发育率,超排后15 h取卵发育受精率最高,这说明小鼠卵母细胞超排后14 h少数成熟,15~16 h完全成熟,排卵17 h后则开始出现退化。结论3组实验最高受精率比较:第1组15 h后取的卵母细胞团受精率最高为79.17%、第2组15 h后取的卵母细胞团受精率最高为75.68%、第3组16 h后取的卵母细胞团受精率最高为76.92%。

一款电子标识应用于小鼠的安全性分析

目的对电子标识进行皮肤致敏实验、皮内反应实验及组织病理学检查,了解其安全性。方法使用0.9%氯化钠溶液将电子标识湿化,以保鲜膜覆盖后再用纱布覆盖在剃毛的小鼠皮肤上,1、24、48和72 h记录接触部位情况;将电子标识注射到小鼠皮下,注射后24、48和72 h安乐死小鼠,观察电子标识周围组织出现的红斑和水肿情况,并对组织进行病理学检查。结果电子标识对皮肤没有刺激性,皮下注射电子标识后未见周围组织异样,病理学检查未见异常。结论测试的电子标识未发现对小鼠的损伤。

Big-BALB/c小鼠亚系选育前后的抗体制备效率比较研究

目的比较利用BALB/c和Big-BALB/c(简称B-BALB/c)两种亚系小鼠制备鼠痘及鼠肝炎单克隆抗体的效率,为今后通过杂交瘤进行体内诱导单克隆抗体制备时实验动物的选择提供参考。方法从常规繁育的BALB/c小鼠群体中选择4周龄体重超过正常动物5%(后期选种标准为超过10%)的个体进行选种并单独繁育,经10代选育制备B-BALB/c小鼠亚系。选择10~11周龄、雌雄各半的BALB/c小鼠和B-BALB/c小鼠各40只,分别接种用液体石蜡预处理后的鼠痘单克隆抗体杂交瘤细胞株G23或鼠肝炎单克隆抗体杂交瘤细胞株Y15,然后通过体内诱生法获取含单克隆抗体的小鼠腹水,利用间接ELISA法检验抗体效价,按照品系、性别和接种杂交瘤类型对小鼠进行分组,分析腹水产量、抗体效价和抗体产量以评估两种亚系小鼠的抗体制备效率。结果经10代选育后获得的10周龄雄性和雌性B-BALB/c小鼠体重分别比同周龄BALB/c小鼠增加了22.3%和12.8%。抗体制备过程中,B-BALB/c小鼠的耐受力比BALB/c小鼠更好,能够适应二次腹水采集;与BALB/c小鼠相比,B-BALB/c小鼠腹水产量和抗体效价均显著提高,尤以杂交瘤细胞株G23接种组更明显(均P<0.0001)。接种杂交瘤细胞株G23或Y15后,B-BALB/c小鼠的平均抗体产量(14.99×10^(4)U和33.22×10^(4)U)高于BALB/c小鼠(5.33×10^(4)U和19.31×10^(4)U)(均P<0.01)。接种杂交瘤细胞株G23后,B-BALB/c小鼠的平均单位体重的抗体产量(0.55×10^(4)U/g)高于BALB/c小鼠(0.23×10^(4)U/g)(P<0.0001)。接种杂交瘤细胞株Y15后,雌性B-BALB/c和BALB/c小鼠的单位体重抗体产量高于同亚系的雄性B-BALB/c小鼠(均P<0.01)。结论B-BALB/c小鼠在单克隆抗体体内诱导制备中可作为BALB/c小鼠的替代选择,能够达到减少实验动物使用数量、降低人力成本并提高抗体制备效率的目的。

雄牛特异的SRY同源序列的扩增和分析

利用人、兔、鼠SRY序列设计引物,应用PCR扩增牛的SRY序列,获得200bp的雄牛特异的扩增片段。克隆该扩增片段,获得重组质粒pCH21,进行序列分析,并与人、兔和鼠SRY的对应区域比较,具有高度同源性。用pCH21 DNA作探针与牛的基因组DNA酶切图谱杂交,显示了雄牛特异的1.7kb的杂交带。分析200bp的PCR扩增片段是牛的SRY基因片段。用同一对引物扩增人和山羊的DNA样品,也获得雄性特异的200bp的扩增片段。

奶牛胚胎分割试验研究

简单分割7～8天奶牛胚胎59枚(117个半胚)。裸半胚成对移给59头奶牛或黄牛,80～90天有27头(45.8％)妊娠。最后24头受体产犊34头,半胚产犊率29.1％(34/117)。有10对双胎,双胎率41.7％(10/24)。比较在不同情况下—7天或8天;晚桑椹或囊胚期;透明带软化处理或不软化处理—分割的半胚,成对移植后受体妊娠率分别是40.0％和57.9％;35.7％和54.8％;48.6％和41.7％。半胚产犊率分别是26.6％和34.2％;23.6％和33.9％;30.0％和27.7％。均无显著差异(P>0.05)。分割优质胚胎得到最好的(35.7％)半胚产犊率。半胚在体外5小时内移植有较高(30.5％)的产犊率。试验探索了奶牛半胚移给远处分散的农户黄牛的可能性。11对奶牛半胚移给11头黄牛有6头(54.5％)妊娠。最后5头受体产下7头奶牛犊,两对同卵双胎。

6种药剂对草莓白粉病防治效果筛选试验研究

选择6种供试药剂对草莓白粉病防治效果进行筛选试验研究。结果表明,供试6种药剂均具有一定的防治效果,其中35%氟菌·戊唑醇SC(氟吡菌酰胺和戊唑醇的复配制剂)对草莓白粉病的防治效果最好;43%氟菌·肟菌酯SC(氟吡菌酰胺和肟菌酯的复配制剂)和42.4%吡唑·氟酰胺SC(吡唑醚菌酯和氟吡菌酰胺复配制剂)防治效果次之,与35%氟菌·戊唑醇SC无显著差异,但与单剂4%四氟醚唑EW、42%苯菌酮SC和25%吡唑醚菌酯SC差异显著。试验中复配制剂的效果远好于单剂,故可以作为防治草莓白粉病优秀药剂并推荐使用。试验单剂中25%吡唑醚菌酯SC作为对照药剂,因在试验基地施用频次较高,用药量较大,故抗药性明显,与其它单剂差异显著。试验中4%四氟醚唑EW和42%苯菌酮SC差异不显著,故可以作为备选药剂使用,但要注意轮换使用。

几种杀菌剂对草莓灰霉病的防治效果筛选试验

为筛选出防治草莓灰霉病高效的药剂,本试验选择11种杀菌剂,设计17个处理进行防治效果筛选试验。结果表明,供试药剂基于施药频次的增加防治效果则呈现出显著上升的趋势。供试药剂在第3次施药后7d,防治效果均达至最高值,防效为53.6%~88.8%;第3次施药后15d,防治效果略有下降,防效为55.6%~83.2%。表明供试药剂50%咯菌腈SC93.75mL/hm^(2)、50%异菌脲SC750mL/hm^(2)、25%啶菌噁唑EC400mL/hm^(2)、38%唑醚·啶酰菌胺WG342g/hm^(2)、42.4%唑醚·氟酰胺SC150mL/hm^(2)处理防治效果较好,防效均在80%以上,可作为防治草莓灰霉病首选药剂。1000亿cfu/g枯草芽孢杆菌WP作为生物菌剂,对环境友好,无农药残留隐患,但防治效果较为缓慢,随着施药频次增加防治效果显著提升,防效最高可达71.2%;其它供试药剂均可以作为防治灰霉病备选药剂来使用,以延缓灰霉病菌抗药性的产生。

门诊四种STD病原体PCR检测

门诊四种ＳＴＤ病原体ＰＣＲ检测王秀丽，王椿森，李家文，吴德国同济医科大学附属协和医院皮肤科（邮政编码４３００２２）我们于１９９４年１月～５月对１０Ｏ例ＳＴＤ门诊的淋病（ＧＮ）、尖锐湿疣（ＣＡ）、非淋菌性尿道炎（ＮＧＵ）及淋病后尿道炎（ＰＧＵ）患者的尿...

1例鸡传染性鼻炎的诊断与分析

本研究对北京某鸡场发生的1例鸡传染性鼻炎疑似病例进行了诊断和分析。PCR检测和测序分析结果显示,该鸡群存在副鸡禽杆菌感染。分离菌株经染色镜检、生化鉴定和致病性试验鉴定为副鸡禽杆菌,将纯培养获得的菌株命名为PGSY株。血凝素基因测序比对结果显示,副鸡禽杆菌PGSY株血凝素基因长度为1 008 bp,与SD-1株的核苷酸同源性高达99%。但PGSY株血凝素基因序列较SD-1株缺失了30个碱基。遗传进化树分析显示,该菌株与国内分离株SD-1属于同一进化分支。

小鼠胚胎移植技术优化及对巨细胞病毒净化研究

目的 建立小鼠巨细胞病毒净化方法,以获得无MCMV感染的小鼠。方法 利用胚胎移植技术,通过使用不同激素、不同发情周期注射激素、受体鼠品系、不同的移植方法、不同时期胚胎移植,以及移植胚胎数量等对比试验,优化了净化条件。利用优化的胚胎移植净化方法,对供体鼠进行了净化。结果 SIGMA生产的激素,在10 IU剂量下超排得到的可用胚胎数量约为17枚/只;在小鼠发情间期超排得到的可用胚胎最多,超排的可用胚胎数约为23枚/只;选取C57雄性小鼠与ICR雌性小鼠交配的子一代作为受体鼠,产仔率达44. 5%;输卵管移植较子宫移植效果好,产仔率为40. 64%;移植2细胞胚胎的妊娠率为80%,明显优于单细胞和8细胞;受体鼠移植24枚胚胎时,产仔率达到了43. 75%。利用优化的小鼠巨细胞病毒胚胎移植净化方法,净化得到了无MCMV感染的小鼠。结论 建立了小鼠巨细胞病毒净化方法,为获得无MCMV感染的小鼠种群提供了可靠的保障。

小鼠巨细胞病毒PCR诊断方法的建立及其应用

目的建立小鼠巨细胞病毒(MCMV)PCR检测方法,并进行初步应用。方法根据NCBI公布的巨细胞病毒设计引物,进行PCR体系优化、敏感性、特异性测试;运用优化后的方法,对87份小鼠血清进行检测,对阳性样本进行测序分析。结果建立的小鼠巨细胞病毒PCR方法灵敏度高,特异性好,初步检测4个屏障设施的87份小鼠血清,13份为阳性,通过测序证实为小鼠巨细胞病毒,验证了此方法的可行性。结论为小鼠巨细胞病毒的快速检测提供了方法。

奶牛冷冻胚胎分割移植效果探讨

分割加拿大奶牛冷冻胚胎 ,借荷斯坦牛受体移植。共分割冷冻胚胎 1 5枚 ,分割为裸半胚 30个 ,分割成功率 1 0 0 %。移植受体 2 7头 (其中移植一对半胚的受体 3头 ) ,移植妊娠 1 4头 ,受体移植妊娠率51 .85% ,产犊 1 4头 ,半胚产犊率为 4 6 .6 7% ,按未分割的整胚计算 ,产犊率达到 93.34 % ,比整胚移植产犊率还提高 1 8.34个百分点。移植半胚生产 1头犊牛需胚胎 1 .0 7枚 ,比整胚减少 0 .2 6枚 ,降低成本1 51 0 .6 0元。说明胚胎分割是降低成本 ,扩大卵源 ,增加良种牛数量的有效方法。

胚胎分割技术在奶牛生产中的应用研究

本研究在于通过大群牛体试验探索出一种更适用于大规模奶牛生产的高效简便切割程序和方法。因此,试验采用了简易的单臂显微操作仪配上一根微玻璃针,在立体显微镜下连同胚胎透明带,从上而下进行切割,减去了分割胚胎再装透明带这一工序。对酶化处理。

进口优质肉牛胚胎的整胚和分割后半胚移植试验

进口优质肉牛胚胎的整胚和分割后半胚移植试验李树静余文莉乌兰张立（内蒙古家畜改良站呼和浩特０１００１０）吴德国（中国科学院遗传研究所）目前我国肉牛业发展滞后的主要原因之一是牛群品质差，良种覆盖率低。因此，急需从国外引进种源，改良我国牛群，以提高牛的个体...

逾期贷款要“以销定还”

贷款逾期由会计部门主动转入逾期贷款户,候借款单位填制偿还凭证后始能收回贷款。这种方法弊端有三:其一,有些贷款单位贷款逾期,可在存款户上却有大额存款,银行无法主动扣收,只能“望款兴叹”。其二,由于贷款单位的贷款不能及时收回,影响信贷资金的周转调剂。其三,“存放并大”的企业可随意汇款采购物资,不利于信贷监督。贷款逾期从一定意义上来说,是借款单位失掉信用的表现。我建议:一、信贷部门与借款单位按贷款额占定额流动资产的比例作为还款的比例。二。

浅谈房屋建筑绿色施工技术

改革开放以来,我国的经济进入了高速发展的时期,随之又提出了"可持续发展"的理念。我国的建筑业同样积极响应国家的经济发展计划,进入了产业结构转型期。传统的建筑业是一个高耗能的产业,包括水资源,土地资源等。随着人口不断地增多,建筑业对资源的需求持续增长,所以构建一个可持续发展的建筑业就要在建筑中推广绿色建筑,发展绿色施工技术。

压缩预算支出大有潜力可挖

压缩预算支出大有潜力可挖万县市五桥区长滩财税所吴德国１．加强人员编制管理．禁止各部门超编。财政部门可联合人劳局，根据公务员核编人数，成立人员编制管理办公室，或挂靠财政或挂靠人劳局。在成立之后，再逐乡逐镇，逐个系统地对部门进行摸底，核实各部门的在职人数...

探究建筑工程施工现场安全施工技术

由于建筑施工的工地环境相当复杂,政府以及施工领导们应在施工过程中采取可行并有效的安全措施以保证在场工作人员的人身安全。文章对建筑工租,施工安全,用电安全和现场布置进行了分析总结。笔者在工程实践中所积累的经验使得文章具有一定的学术性,可为同行提供参考,也可将安全知识普及到各个施工队伍中。