石见穿诱导铁死亡抑制小鼠食管癌发生发展的研究

背景食管癌是一种在中国乃至全球范围内常见的消化道恶性肿瘤,具有很高的发病率和致死率。石见穿(SJC)作为传统中药,其清热解毒、活血镇痛之功常用于食管癌的治疗中。药理实验研究证明,SJC具有抗癌性,可有效治疗多种恶性肿瘤。目的基于铁死亡探讨SJC抑制C57小鼠食管原位癌发生发展的作用和机制。方法2022年2月—2023年2月选取SPF级C57BL/6雌鼠90只,随机分为对照组(Control组,n=15)、单纯4NQO诱癌组(4NQO组,n=25)、4-硝基喹啉N-氧化物(4NQO)+SJC低剂量组[4NQO/SJC(91 mg)组,n=25]和4NQO+SJC高剂量组[4NQO/SJC(182 mg)组,n=25]。采用4NQO诱导的方式进行C57小鼠食管癌原位模型的制备。观察小鼠活动情况,记录其精神状况和进食饮水情况,每隔8周分组测量小鼠体质量并进行记录。32周后进行食管组织苏木素-伊红(HE)染色和病理学分析。测定食管组织Fe^(2+)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量,采用蛋白质印迹法检测小鼠食管组织中核受体共激活因子4(NCOA4),谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白质的表达水平。采用Kaplan-Meier法绘制小鼠的生存曲线,生存曲线的比较采用Breslow检验。结果造模8、16、24、32周4NQO组、4NQO/SJC(91 mg)组、4NQO/SJC(182 mg)组小鼠体质量低于Control组,32周4NQO/SJC(91 mg)组、4NQO/SJC(182 mg)组小鼠体质量高于4NQO组(P<0.05)。Breslow检验结果显示,4组小鼠生存曲线比较,差异有统计学意义(χ^(2)=9.907,P=0.019)。HE染色结果可见,4NQO组小鼠食管上皮组织呈现异常增生,细胞排列紊乱,出现角化珠等异常病理改变;与4NQO组比较,4NQO/SJC(91 mg)组和4NQO/SJC(182 mg)组食管上皮组织病理学改变明显改善。4NQO组、4NQO/SJC(91 mg)组、4NQO/SJC(182 mg)组Fe^(2+)、MDA均低于Control组,GSH均高于Control组(P<0.05);4NQO/SJC(91 mg)组、4NQO/SJC(182 mg)组Fe^(2+)、MDA均高于4NQO组,GSH均低于4NQO组(P<0.05);4NQO/SJC(182 mg)组Fe^(2+)、MDA均高于4NQO/SJC(91 mg)组,GSH均低于4NQO/SJC(91 mg)组(P<0.05)。4NQO组NCOA4低于Control组、4NQO/SJC(91 mg)组、4NQO/SJC(182 mg)组,GPX4高于Control组、4NQO/SJC(91 mg)组、4NQO/SJC(182 mg)组(P<0.05);4NQO/SJC(91 mg)组、4NQO/SJC(182 mg)组GPX4高于Control组(P<0.05)。结论SJC可干预食管癌的发生发展,其机制可能与NCOA4介导的铁蛋白吞噬作用相关。

食管鳞癌原位模型小鼠肠道菌群分析

背景随着肠道菌群高通量测序技术的应用与发展,越来越多的研究证实肠道菌群与多种肿瘤的发生、发展密切相关。食管鳞癌是威胁我国人民健康的常见肿瘤,其与肠道菌群的关系备受关注。目的分析比较食管鳞癌原位模型小鼠与正常小鼠肠道菌群的多样性,筛选出食管鳞癌特异性改变的菌属。方法2020年8月至2021年5月,将20只雌性SPF级C57BL/6小鼠适应性喂养1周后随机分为对照组(DZ组)和模型组(MX组),每组10只。DZ组小鼠常规喂养并给予普通饮用水32周,MX组小鼠按照造模方法常规喂养并给予含0.1 mg/ml诱癌剂4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)的饮用水喂养16周,之后给予普通饮用水喂养至32周。收集两组小鼠粪便,提取DNA,应用聚合酶链式反应(PCR)扩增后进行高通量测序,获得的测序数据聚类成为基于序列间相似度的分类操作单元(OTU),并根据物种注释情况进一步分析Alpha多样性、Beta多样性、物种丰度。结果两组小鼠在实验过程中未出现死亡,MX组小鼠均造模成功。MX组与DZ组相比,拟杆菌门(Bacteroidota)及厚壁菌门(Firmicutes)比例升高,而疣微菌门(Verrucomicrobiota)及变形菌门(Proteobacteria)比例降低。Alpha多样性结果显示,MX组小鼠肠道菌群Shannon指数低于DZ组(P<0.05)。Beta多样性分析中PCoA图显示,MX组与DZ组样本分别聚集在不同的象限,相距较远,样本间多样性差异较大(t=22.444,P=0.004)。在门水平,MX组Unidentified_Bacteria、蓝细菌(Cyanobacteria)、易感微生物(Elusimicrobia)、弯曲杆菌(Campilobacterota)丰度高于DZ组(P<0.05)。在属水平,MX组普雷沃菌科_UCG-003(Prevotellaceae_UCG-003)、拟杆菌属(Bacteroides)、毛螺菌科NK4A136组(Lachnospiraceae_NK4A136_group)、瘤胃球菌属(Ruminococcus)、普雷沃菌科_UCG-001(Prevotellaceae_UCG-001)、普雷沃菌属(Prevotella)、大肠埃希菌(Colidextribacter)、毛螺菌科_UCG-006(Lachnospiraceae_UCG-006)丰度高于DZ组,罗姆布茨菌(Romboutsia)、土杆菌属(Turicibacter)丰度低于DZ组(P<0.05)。LEfSe分析结果显示,在属水平上,Prevotellaceae_UCG-003、埃希菌-志贺菌属(Escherichia-Shigella)、Bacteroides、Lachnospiraceae_NK4A136_group在MX组丰度增高(P<0.05);而Romboutsia丰度在DZ组增高(P<0.05)。结论食管鳞癌原位模型小鼠与正常小鼠相比肠道菌群物种多样性降低,存在特异性差异菌属,其中Prevotellaceae_UCG-003、Bacteroides、Lachnospiraceae_NK4A136_group和Romboutsia可作为食管鳞癌诊断的生物标志物。

建立启膈方UPLC指纹图谱并验证启膈方对食管癌转移的影响

目的:观察启膈方对食管癌细胞迁移及侵袭的抑制作用,并建立启膈方的超高效液相(ultra performance liquid chromatography,UPLC)指纹图谱。方法:制备启膈方冻干粉,将高分化食管癌细胞Eca109分成对照组和启膈方组,应用划痕实验检测经启膈方干预前后食管癌细胞迁移能力的改变,借助荧光显微镜观察启膈方干预前后细胞形态的变化,采用蛋白芯片观察启膈方干预后肿瘤相关生长因子的变化,采用ACQUITY CSH C18(2.1mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,梯度洗脱、流速0.4 mL/min、检测波长254 nm、柱温40℃,并建立启膈方冻干粉UPLC指纹图谱。结果:启膈方组细胞迁移能力明显低于对照组(P<0.05),荧光显微镜观察显示经启膈方干预后细胞形态规则,蛋白芯片结果显示启膈方能够降低肿瘤相关生长因子的表达,10批启隔方冻干粉相似度均在0.9以上,共标定了17个共有峰,指认出7个色谱峰,分别为迷迭香酸、异槲皮苷、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸E、金丝桃苷、紫草酸。结论:启膈方能够降低肿瘤相关生长因子的蛋白表达,从而降低食管癌细胞迁移能力,建立的启膈方冻干粉UPLC指纹图谱可为启膈方的质量评价及药效物质基础研究提供依据和参考。

扶阳强壮灸姑息治疗晚期肿瘤探讨

目的:提高晚期肿瘤患者的生活质量。方法:补攻结合,兼顾标本;人病同治,姑息权衡;益寿延年,带瘤生存。结果与结论:扶阳强壮灸法可以减轻放、化疗不良反应,值得在临床推广。

四物饮抑制食管癌细胞侵袭及迁移的研究

目的探讨四物饮对食管癌Eca109细胞迁移及侵袭的影响以及可能的分子机制。方法不同浓度(600μg/m L、300μg/m L、150μg/m L、70μg/m L和30μg/m L)四物饮分别作用于人食管癌Eca109细胞,空白对照不进行任何处理。采用Incu Cyte软件评估划痕闭合率,并筛选四物饮的有效浓度及干预时间;应用Transwell观察四物饮对细胞侵袭的影响;应用激光共聚焦显微镜观察四物饮对细胞微丝骨架的影响;应用RNA-Seq测序及信息分析明确四物饮对食管癌细胞RNA的影响。结果划痕闭合率结果显示,当四物饮浓度为150μg/m L时,明显抑制细胞迁移能力(P<0.05);Transwell结果显示,150μg/m L四物饮能够明显抑制食管癌细胞侵袭(P<0.05);激光共聚焦显微镜观察细胞微丝骨架证实,四物饮能够明显抑制食管癌细胞微丝骨架重排;应用RNA-Seq测序结果显示,四物饮能改变食管癌细胞中丙氨酸,天门冬氨酸和谷氨酸代谢通路。结论四物饮能够明显抑制食管癌细胞迁移及侵袭能力,抑制延胡索酸堆积。

贾文魁教授根据天癸理论诊治泌尿生殖器肿瘤经验探析

天癸是机体肾中精气充盈时产生的促进生殖功能发育、成熟、旺盛的精微物质。"七七""八八"分别为女子、男子"天癸竭"的时期,而现代流行病学研究显示,泌尿生殖器肿瘤发病高峰期与"天癸竭"的时间大致吻合。贾文魁教授认为泌尿生殖器肿瘤的发生发展与"天癸竭"关系密切,而肾精是组成天癸的物质基础,因此临床上通过滋补肾阴或肾阳,通过辨病与辨证相结合治疗泌尿生殖器肿瘤可以取得较好效果。

4-硝基喹啉-1-氧化物诱导小鼠食管鳞状细胞癌模型的研究进展

食管鳞状细胞癌(ESCC)是最常见的恶性肿瘤之一,预后较差。4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)是一种水溶性的喹啉衍生物,在体内可以成功诱导鳞状上皮细胞癌的产生。建立并优化4NQO诱导小鼠ESCC形成的实验方法可以为ESCC研究提供更适宜的原位模型。

甘润濡养法抑制食管癌转移的基础与临床研究

食管癌是常见的恶性肿瘤,其发病具有地域性差异,我国是食管癌高发国家,而河北省又是我国食管癌高发区,其发病率是国内平均水平的5倍,世界平均水平的10倍。河北医科大学第四医院作为河北省肿瘤医院,20世纪70年代就已在河北的磁县、涉县、武安等地建立了食管癌早诊早治基地,通过综合防治食管癌发病率已降低,但死亡率仍较高,5年生存率仅为20%~30%,复发转移是主要死因。