Zn和I在鲮鱼体内的积累与分布

用同位素示踪的方法研究水中的Zn^2＋和I^-在鲮鱼体内的积累和排泄行为。结果表明，在Zn^2＋质量浓度为0．2mg·L^-1，I^-质量浓度为0．01mg·L^-1的水体中，Zn和I^-在鲮鱼中的积累趋势大致相同，并可分别用模拟方程Y=30．729Ln（t）＋45．983及Y=1．2743Ln（t）＋2．0991表达。Zn^2＋和I^-在鲮鱼体内主要分布在内脏，7d时Zn为235．48μg·g^-1，I^-为0．49μg·g^-1，其次为鳞片和鳃，肌肉中分布最少。而鱼体对Zn^2＋积累能力较I^-强，对Zn^2＋的浓集系数是对I^-的17．5倍。Zn^2＋和I^-从鲮鱼中的排泄较迅速，排泄过程可分为快排泄相（0～1d）和慢排泄相（1～13d），其慢相排泄过程可分别用模拟方程Y=6．5688e^-0.081t和Y=0．0388e^0.1201t表示。Zn^2＋的慢相半衰期为8．5d，I^-的慢相半衰期为5．8d。内脏对于Zn^2＋和I^-的排泄速度比其他取样部位快。

人巨细胞病毒IgG抗体(ELISA)检测试剂盒稳定性观察

目的观察人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)IgG抗体(ELISA)检测试剂盒的稳定性。方法将HCMV IgG抗体(ELISA)检测试剂盒分别以不同时间放置于2~8℃和37℃,检测试剂盒的外观、阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、重复性和检测限,并对其进行稳定性(实时稳定性、加速破坏稳定性、开瓶稳定性、运输稳定性)的观察及初步应用。结果 3批实验用试剂盒实时稳定性和3批试生产试剂盒加速破坏稳定性、开瓶稳定性、运输稳定性试验中,外观均合格,阴性参考品符合率及阳性参考品符合率均为100%,最低检出限参考品均能检出。3批实验用试剂盒实时稳定性检测重复性良好,CV值均≤15.00%。3批试生产试剂盒在37℃条件下放置6 d后,CV值分别为7.94%、7.16%、4.66%;开瓶后分别置于2~8℃冰箱0w、1w、2w、3w、4w,CV值均≤1 5.00%;运输至上海,CV值分别为2.59%、3.12%、2.37%;运输至海南,CV值分别为4.89%、2.65%、2.33%。样品反复冻融5次后,试剂盒检测稳定性良好。结论 HCMV IgG抗体(ELISA)检测试剂盒具有良好的稳定性,在2~8℃条件下至少可保存15个月。

人血清IgG分离纯化方法探讨

免疫球蛋白的主要功能在于抵抗各种病原微生物对人体的感染.使用人源免疫球蛋白,因其是同种蛋白,在预防和治疗上比动物血清有很大的优越性.本文综述了硫酸铵沉淀法、辛酸法、Protein A亲合膜色谱法、聚乙二醇(PEG)置换法等从人血清中提取IgG的方法,比较了各方法在研究应用中的优缺点,为制备提供参考.

血液制品病毒灭活及去除工艺进展

随着医学科学的进步和大众生活水平的提高,血液制品的安全性愈来愈受到关注。为了提高血液制品的安全性,国家食品药品监督管理局发布的相关指导原则要求生产工艺要具有一定的去除/灭活部分病毒能力,生产过程中应有特定的去除/灭活病毒方法。我们对几种适用于血液制品的病毒灭活方法及病毒去除工艺进行综述,以期对生产及科研提供参考。

低毒高效的SDS-PAGE考马斯亮蓝染色方法比较

目的:比较SDS-PAGE的4种考马斯亮蓝染色方法。方法:以牛血清白蛋白为材料进行SDS-PAGE,分别比较考马斯亮蓝G-250(CBB G-250)盐酸法、CBB G-250-Al2(SO4)3法、Bio-Rad公司的Bio-Safe染色液及传统法等4种染色方法的灵敏度和操作性,并将上述4种染色方法应用于蛋白Markers检测。结果:CBB G-250-Al2(SO4)3法和Bio-Safe法的检测灵敏度都可达19.2 ng,而CBB G-250盐酸法和传统法的检测灵敏度则为28.9 ng。结论:CBB G-250盐酸法可作为快速、低毒、高效的染色方法,CBB-Al2(SO4)3法则可用于灵敏度要求较高的检测。

体外诊断试剂防腐剂的选择策略

对体外诊断试剂中防腐剂的作用机理及选择原则进行了阐述,并对目前常用的防腐剂如叠氮钠、庆大霉素、硫柳汞、异噻唑啉酮类等的性能进行了比较,为体外诊断试剂的研究开发及生产中防腐剂的使用提供有益指导。

巨细胞病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法)的性能验证

目的:对本公司研制的人巨细胞病毒(HCMV)Ig G抗体检测试剂盒(酶联免疫法)的性能进行验证。方法:应用间接法研制HCMV Ig G抗体检测试剂盒(酶联免疫法),对的3批试剂盒的阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、重复性、检测限、批间差等技术指标进行评价,并用1050例样本进行比对试验,结果进行Kappa检验、χ~2检验。结果:3批试剂盒阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、检测限、重复性、批间差均达到要求。同时,经中国食品药品检定研究院检定,3批试剂盒所检项目全部合格。比对试验敏感度为98.92%,特异性为98.60%,与已上市试剂盒的总符合率为98.83%,Youden指数为0.9752,Kappa系数为0.9710,一致性优,χ~2检验P>0.05。结论:制备了HCMV Ig G抗体检测试剂盒,可应用于临床监测、诊断及预后判断。

巨细胞病毒IgG定量ELISA检测方法的建立及初步应用

目的建立巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)IgG定量ELISA检测方法,并进行初步应用。方法用CMV IgG(50 U/ml)标准品建立CMV IgG ELISA定量检测方法,确定该方法的最佳线性范围;制备室内质控血清并进行标定。对该方法进行重复性、中间精密性、准确性、特异性验证,并与Dia.Pro CMV IgG ELISA试剂盒进行比较。用建立的ELISA法检测689人份健康献浆员血浆的CMV IgG抗体效价。结果建立的CMV IgG定量ELISA检测方法的最佳线性范围为0.000 78～0.05 U/ml;制备的室内质控血清的抗体效价为(5.67±0.55)U/ml;重复性试验检测结果的变异系数为4.6%～9.8%,中间精密性试验检测结果的变异系数为9.7%～10.6%;该方法检测3个浓度标准品的回收率为107.01%～112.97%;样品稀释液和血清中的其他一些干扰因素对检测结果影响较小;该方法与Dia.Pro CMV IgG ELISA试剂盒检测血浆样品的相关系数r=0.81。该方法检测689人份健康献浆员血浆样品的CMV IgG抗体效价≥10 U/ml的占30.8%。结论建立的CMV IgG定量ELISA检测方法操作简便,精密性良好,特异性强,可用于人血浆中CMV IgG的定量检测。

人巨细胞病毒IgG抗体标准品研究进展

人巨细胞病毒(CMV)是威胁人类健康的最重要病原之一。高CMV抗体效价的免疫球蛋白G(IgG)制剂,为临床医生在预防和治疗用药上提供了一个有价值的选择。而CMV免疫球蛋白标准品对于制品的CMV抗体效价测定以及高效价血浆的筛选都至关重要。该标准品对于器官移植/输血安全测试,以及临床诊断都是不可或缺。本综述提供了一种人巨细胞病毒IgG标准品制剂方法以及目前研究进展的概述。此外,本文还关注应用于不同领域的不同CMV IgG抗体效价单位。故本文为人巨细胞病毒免疫球蛋白的开发,人巨细胞病毒IgG抗体诊断试剂的标准化,以及为其质量控制提供参考。

特异性抗体效价检测技术概述

特异性抗体效价是生物制品活性(浓度)的重要标志,通常采用生物学方法来测定,并以抗体与其相应抗原反应产生的、可观察到的标准免疫反应来表示。抗原抗体间除发生特异性反应外,还会产生交叉反应,从而使特异性抗体效价的检测出现偏差,这在实际应用中亟需避免。特异性抗体效价检测技术是疾病诊断、特异性免疫球蛋白制备和疫苗评价等领域的关键技术,在生物制品质量控制及医学临床实践中意义重大。本文对抗体效价检测的常规技术及其研究进展进行简要综述,并对这些技术的特异性、灵敏性、检测周期及应用情况等方面进行比较分析,以期对特异性抗体效价检测技术有一个系统全面的认知,有利于研究人员在实际应用中选择合适的技术,共同推动抗体检测技术的发展。

高效价巨细胞病毒人免疫球蛋白原料血浆的筛查

目的分析普通健康供浆员中人巨细胞病毒humancytomegalovirus，HCMV）免疫球蛋白（IgG）抗体效价分布情况，筛查富含高效价HCMVIgG抗体的原料血浆。方法采用HCMVIgG定量检测试剂，检测本公司下属广西地区五个单采血浆站采集的血浆样本的HCMVIgG抗体效价，检测抗体效价〉15PEI-U／ml的血浆样本混合后的HCMVIgG抗体效价，并对血浆中富含HCMV抗体的供浆员血浆进行采集，分析效价分布变化情况。结果健康供浆员28607份血浆样本的HCMVIgG抗体阳性率为85．2％，其中效价分布在1-10、10-15、〉15PEI-U／ml的各占64．5％、8．7％和11．9％；1318名血浆中富含HCMV抗体的供浆员8426份血浆样本HCMVIgG抗体阳性率为98．1％，抗体效价〉15PEI-U／ml占43．8％，约为普通健康人血浆样本的3．7倍，3个月内平均抗体效价可维持在15PEI-U／ml以上的有586人，占44．5％；不同浆站抗体效价〉15PEI-U／ml的血浆样本混和后的平均效价为33．72PEI-U／ml。结论健康供浆员中高效价HCMVIgG抗体的比例较高，部分供浆员HCMVIgG抗体高效价水平可稳定维持3个月，从健康供浆员中采集含高效价HCMVIgG抗体的原料血浆，用于制备巨细胞病毒人免疫球蛋白具有可行性。