吴承亮作品

标志释义：以盘子的结构和＂喜食＂两字作为设计元素。采用连笔的手法将＂喜食＂两字进行创作设计,将横向的笔画进行延伸打破外部圆形的结构,在视觉上呈现出＂喜欢吃的东西＂放在圆盘中。标志色彩延用了中国传统的红与黑进行搭配,造型中加入了传统图纹进行修饰,并配上浑厚有力的书法字体,显示出传统美食的历史感,突出其久远悠长的韵味和时间的积淀,内涵丰富、直观、易于解读、切合喜食糕点的经营理念和目标。

双向均压槽节流静压气体轴承静态特性分析

为进一步优化径向静压气体轴承的静态性能,提出在传统小孔节流的基础上配合开设轴向和周向均压槽的复合节流式静压气体径向轴承。利用Fluent软件对比分析传统孔式节流与不同形式复合节流静压气体轴承的静态特性,探究均压槽截面形状及供气压力对轴承静态特性的影响规律;利用正交试验探究节流器各结构参数对承载特性的影响。结果表明:复合节流式静压气体轴承在一定程度上提升了轴承的静态性能,其中均压槽以“口”字形布置以及截面形状为矩形时效果最优;供气压力的增大也可提升轴承静态特性;节流孔直径和均压槽深度对轴承静态特性的影响要大于节流孔深度和均压槽宽度,节流孔直径以及均压槽深度的增大均使得承载力与刚度呈现出先增大后减小的趋势。

数控机床几何与热误差研究方法综述

数控机床加工精度是衡量机床性能的关键指标。影响加工精度的误差源有多种,最显著的是几何误差与热误差,占据机床总误差的60%~70%。误差补偿被认为是提高机床加工精度经济高效的手段,其中误差精确测量、误差模型的建立是进行误差补偿的基础和前提。针对数控机床综合误差的测量、建模、补偿过程进行归纳总结,分析测量工具、建模和补偿方案的优缺点,列举数控机床精度优化方面的问题,并探讨未来的研究方向。

右归饮对体外培养破骨细胞分化与功能的影响

目的:探讨右归饮对体外培养破骨细胞的分化、凋亡及骨吸收活性的影响。方法:分离培养大鼠破骨细胞,分别以空白对照血清、地塞米松+对照血清、地塞米松+右归饮血清的培养液来培养破骨细胞,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色对TRAP阳性多核破骨细胞计数;采用吖啶橙荧光染色法计数破骨细胞的凋亡率;用RT-PCR测定ATPase a3基因相对表达变化分析破骨细胞骨吸收活性。结果:与空白对照血清组和对照血清+地塞米松组相比,地塞米松+右归饮血清组TRAP染色阳性的破骨细胞数量显著减少(分别为P<0.01,P<0.05),破骨细胞的凋亡率明显增加(P<0.01),ATPase a3基因表达明显减少(P<0.01)。结论:右归饮可抑制破骨细胞的形成和分化及骨吸收活性,促进破骨细胞的凋亡,从而发挥其抗激素性股骨头坏死的作用。

右归饮对家兔激素性股骨头坏死骨髓脂肪化的影响

为观察右归饮对激素性股骨头坏死骨髓脂肪化的影响,探讨其防治作用机理。采用醋酸氢化泼尼松臀肌注射造模,设模型组、治疗组和正常组,应用PAS-8000病理图象分析系统分别测定各组髓腔内脂肪细胞面积,并观察股骨头局部病理形态改变、计数骨陷窝空虚率。结果显示,与正常组比较,模型组髓腔内脂肪细胞面积显著增大(P<0.01),骨陷窝空虚率显著增高(P<0.01)。与模型组比较,治疗组髓腔内脂肪细胞面积明显减少(P<0.01),骨陷窝空虚率明显降低(P<0.01)。表明右归饮可抑制股骨头髓腔内骨髓脂肪化,认为这可能是右归饮通过拮抗激素诱导骨髓基质细胞成脂分化同时促进成骨修复达到防治激素性股骨头坏死作用的机理。

改良大鼠成骨细胞原代培养方法的实验研究

目的获得一种操作简便、细胞数量多而纯的成骨细胞原代培养方法。方法改良I型胶原酶消化获得成骨细胞的方法,并检测成骨细胞形态、碱性磷酸酶染色、矿化结节形成。结果经改良的大鼠成骨细胞原代培养方法获得的细胞数量多,形态正常,且碱性磷酸酶分泌及矿化特性正常。结论改良大鼠成骨细胞原代培养方法是一种操作简便、细胞数量多的成骨细胞原代培养方法。

p38MAPK信号转导通路在氧化应激诱导兔髓核细胞衰老过程中的作用研究

[目的]研究p38MAPK信号转导通路在氧化应激诱导兔髓核细胞衰老过程中的作用。[方法]2～3月龄新西兰雌性大白兔10只,无菌条件下酶消化法分离其髓核细胞。原代培养兔髓核细胞传第一代,将生长良好的髓核细胞制成细胞悬液,随机分为空白组、模型组和阻断组。空白组为正常髓核细胞;模型组以浓度为0.36mmo.lL-1过氧化氢作用1h,造成髓核细胞的氧化应激模型;阻断组以p38MAPK抑制剂预处理髓核细胞30min后,再按照模型组造成氧化应激模型。各组经上述处理后继续培养48h,进行髓核细胞形态学观察,同时检测髓核细胞增殖率、β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)活性及细胞周期,最后进行组间比较分析。[结果]各组髓核细胞形态未出现显著变化,但模型组和阻断组的细胞分布密度较稀疏、并有典型衰老改变,主要表现为:细胞增殖减慢、衰老相关β-半乳糖苷酶蓝染率增加、细胞周期阻滞于G1期等(与空白组相比P<0.05)。其中模型组衰老程度最为严重,阻断组则抑制了部分衰老改变(与模型组相比P<0.05)。[结论]p38MAPK信号转导通路是介导氧化应激诱导兔髓核细胞衰老和凋亡过程的关键通路之一。

红曲对体外培养大鼠成骨细胞BMP-2表达的影响

为研究红曲对体外培养大鼠成骨细胞BMP-2表达的影响,从而为治疗骨质疏松症开发出中药新药提供细胞学依据。取成年SD大鼠48只,随机将大鼠分为A组(空白组)、B组(倍美力组)、C组(普拉固组)、D、E、F组(红曲高、中、低剂量组)6组,按10ml.kg-1分别予以生理盐水,倍美力水溶液(0.00625mg.ml-1),普拉固水溶液0.2mg.ml-1)及红曲水提液(1.25g.ml-1、0.625g.ml-1、0.125g.ml-1)灌胃。灌胃10天后,腹腔静脉取血制备含药血清;将从胎鼠颅骨取材的成骨细胞培养于含药血清培养液中,然后应用BMP-2免疫组化染色方法观察红曲对体外培养成骨细胞BMP-2表达的影响。结果显示,通过免疫组化染色发现BMP-2棕色深染位于细胞浆,红曲高、中剂量组成骨细胞棕色深染数量明显高于空白组,低剂量组与空白组无明显差异,阳性细胞比例呈剂量依赖性增长。表明红曲含药血清可以呈剂量依赖性地促进成骨细胞BMP-2表达;在细胞和分子水平为中药红曲治疗骨质疏松症提供了客观化的依据。

整脊疗法治疗腰椎间盘突出症的机理探讨——附210例临床分析

运用单侧硬膜外阻滞麻醉 ,整脊疗法治疗腰椎间盘突出症 2 10例 ,按自拟疗效标准评定 ,显效 12 5例 ,有效 81例 ,无效 4例 ,显效率 5 9.5 % ,总有效率 93.4%。并对其机理进行初步探讨 ,提出松解神经根粘连和恢复关节突关节错位 ,降低脊膜囊张力是改善症状的机制。

HIF-1α信号通路与激素性股骨头坏死相关性研究进展

导致股骨头坏死发生的因素众多,其中大剂量使用糖皮质激素是最主要的原因。激素性股骨头坏死(Steroid induced avascular necrosis of femoral head,SANFH)的发病机制尚未完全阐明,其中缺血缺氧是发病的关键因素,血管生成、死骨吸收和新骨形成之间的偶联是股骨头坏死修复的关键环节。低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)信号通路是最具特征性的低氧反应通路。在缺血/缺氧环境下,HIF-1α信号通路对骨形成和血管生成的偶联过程起重要的调节作用。本文就HIF-1α信号通路在激素性股骨头坏死中的作用研究进展做一综述。

金匮肾气丸对大鼠脊髓近距离放射损伤细胞凋亡形态学的影响

目的观察金匮肾气丸对192Ir近距离照射大鼠脊髓后细胞凋亡的影响。方法将120只SD大鼠随机分成为模型组、金匮肾气丸组、泼尼松组和正常组,各组每日给予相应的药物,连续给药14天后,除正常组外,其它各组均采用后装技术在大鼠脊髓进行192Ir近距离照射,照射剂量均为22Gy,大鼠分别在照射后8h、24h、4周时取损伤节段脊髓,应用HE、TUNEL染色,光镜和电镜观察。结果近距离照射各组大鼠脊髓后8h、24h时HE染色均未观察到明显组织结构上的改变,4周时脊髓白质区出现组织疏松和出血等病理改变。TUNEL染色和电镜显示:与模型组比较,金匮肾气丸组和泼尼松组照射后8h大鼠脊髓的细胞凋亡指数显著下降(P<0·01),而在照射后24h、4周时间点则差异无显著性。结论金匮肾气丸具有肾上腺皮质激素样作用,可对抗大鼠近距离放射性损伤早期胶质细胞的凋亡作用。

破骨细胞血系起源的活细胞成像观察

目的:采用活细胞成像技术,观察血系单核细胞诱导形成破骨细胞的全过程,旨在进一步阐明破骨细胞血系起源的发生及其细胞动力学。方法:取成年SPF级纯种雄性SD大鼠1只,体重280 g,腹主动脉采血8 ml,经密度梯度离心分离单个核细胞,在RANKL与M-CSF诱导下,分为倒置相差显微镜观察组、抗酒石酸酸性磷酸酶染色组、噬骨试验扫描电镜观察组、活细胞成像组4组进行培养。倒置相差显微镜观察组从培养开始,在数字显微成像系统下,每天观察记录1次;抗酒石酸酸性磷酸酶染色组培养21 d作酶活性染色鉴定;噬骨试验扫描电镜观察组培养21 d取出骨磨片作扫描电镜观察;活细胞成像组采用多点位缩时电影法对整个培养过程进行长达35 d的连续观察记录。结果:诱导培养2周后,倒置相差显微镜观察可见大量多核细胞形成,外形呈圆形、梭形、扇形、椭圆形及不规则突起状;抗酒石酸酸性磷酸酶染色绝大部分多核细胞与单核细胞均呈阳性反应;骨磨片扫描电镜观察可见较多骨吸收陷窝、坑洼及沟道,还有位于陷窝及沟道内正在行使骨吸收功能的破骨细胞;活细胞成像观察到起源于周围血的多核破骨细胞是由单核细胞、单核细胞与多核细胞及多核细胞之间相互融合而成,其细胞间的融合均发生在贴壁状态,显微缩时电影观察显示破骨细胞形态表现复杂多变。结论:大鼠周围血单核细胞在RANKL和M-CSF诱导下,可以向破骨细胞分化,形成具有骨吸收功能的多核破骨细胞。破骨细胞的形成是发生在贴壁状态下多种形式的细胞融合过程,破骨细胞的粘附特性对其存活及功能发挥至关重要。破骨细胞具有吞噬功能,其形态结构动态多变。破骨细胞不仅是一种多核细胞,还可能包括单核破骨细胞。破骨细胞通过融合形成多核巨细胞的特性,可能是其适应功能需求与骨吸收效率的一种特殊生物学行为。实验结果进一步证实了破骨细胞的血系起源学说,并为深入阐明破骨细胞的细胞动力学与细胞生物学特性提供了新的实验研究依据。

椎间盘退变与细胞死亡的相关研究进展

腰椎间盘退行性变被认为是临床下腰痛的重要原因,其分子机制尚未明确。近年来,椎间盘退变的分子基础研究已经成为热门。椎间盘独特的生理结构和生物力学特性导致了它易于退变的特点。椎间盘退变开始与椎间盘细胞学行为的改变有关,包括细胞死亡的增加和细胞外基质的降解。然而,在退变椎间盘中的细胞死亡机制仍不明确,主要包括细胞凋亡和自噬。对椎间盘退变分子机制的深入研究能够为将来进一步改善和治疗椎间盘退变打下基础。虽然椎间盘退变的生物学研究方面已经取得了一定的进展,但是椎间盘本身的生物环境对生物学治疗的发展仍具有挑战性。

兔髓核与纤维环细胞生物学特性差异的研究

目的:同时建立兔髓核细胞与纤维环细胞体外培养模型,比较两者生物学特性差异。方法:新西兰大白兔5只(2～3kg,雌雄不限),无菌条件下分离髓核及纤维环,酶消化法联合组织块法含15%FBS的DMEM/F12(1∶1)培养液培养,当细胞90%融合后进行传代培养。通过倒置相差显微镜观测细胞形态,台盼蓝染色测定细胞活力,甲苯胺蓝和HE染色进行组织学观察,MTT法测定细胞增殖,分析比较髓核细胞与纤维环细胞形态、活力、增殖的差异。结果:原代及第1代髓核细胞和纤维环细胞形态上无明显差异,第2代髓核细胞开始有空泡出现。髓核细胞较纤维环细胞贴壁时间晚、细胞活力低;原代髓核细胞从第9天开始增殖速度较纤维环细胞慢(P<0.05)。结论:纤维环细胞的细胞活性明显高于髓核细胞。椎间盘退变性疾病可能是由髓核发生衰退引起,从而局部生物力学改变,导致纤维环破裂等组织结构的改变及功能的丢失。

H_2O_2氧化应激诱导兔椎间盘髓核细胞衰老的研究

目的:研究H2O2不同浓度对兔椎间盘髓核细胞形态、活力、增值、周期等的影响。方法:新西兰大白兔(2～3kg,雌)10只,无菌条件下酶消化法分离髓核细胞。含15%FBS的DMEM/F12(1:1)培养液培养,细胞90%融合后传第1代。按照H2O2不同浓度(0μmol/L、130μmol/L、216μmol/L、360μmol/L、600μmol/L、1000μmol/L)分组,0μmol/LH2O2为空白对照组。在细胞对数生长期,不同浓度H2O2处理1h后原培养液继续培养48h,通过检测,分析比较各组髓核细胞与空白对照组间形态、活力、增值、周期的差异性。结果:与空白对照组比较,当H2O2浓度为130μmol/L、216μmol/L时,髓核细胞生物学特性未见显著性改变(P>0.05);当H2O2浓度为360μmol/L、600μmol/L、1000μmol/L时,髓核细胞出现衰老改变:细胞质减少并出现空泡、增值减慢、衰老相关-β-半乳糖苷酶蓝染率增加、细胞周期阻滞于G1期而进入S期减少(P<0.05)。随着H2O2浓度的增高,衰老程度不断升高。结论:一定浓度的H2O2能够导致髓核细胞提前衰老,引起髓核细胞生物学特性的改变。

瘦素对骨质疏松症效应的研究进展

瘦素作为一种内分泌激素,通过中枢和外周两种途径调节骨代谢。瘦素的中枢效应可能是通过下丘脑、交感神经系统以及β受体而最终引起骨量减少,瘦素的外周效应可能是通过骨髓基质细胞,骨化细胞和破骨细胞3个方面起作用并最终引起骨量增加。瘦素对骨代谢的整体作用可能取决于血清瘦素的水平及血脑屏障的通透性。

骨痹病证结合研究的若干进展

“骨痹”属于五体痹之一，是指由六淫之邪侵扰人体筋骨关节，闭阻经脉气血，出现肢体沉重、关节剧痛，甚至发生肢体拘挛屈曲，或强直畸形。关于骨痹的最早记载见于《内经》。

右归饮含药血清促进人血管内皮细胞增殖及抗氧化损伤的作用研究

[目的]观察右归饮含药血清促进人血管内皮细胞增殖及对氧化损伤的保护作用,探讨右归饮防治激素性股骨头坏死的作用机理。[方法]取对数生长期的人血管内皮细胞,分为空白组、模型组、药物Ⅰ组、药物Ⅱ组。模型组和药物I组以600μM H2O2作用2h建立氧化损伤模型,空白组、药物II组照常培养,2h后药物I组和药物II组分别加入相同浓度右归饮含药血清,空白组和模型组则分别加入等量空白血清。各组干预24h后通过倒置相差数字成像显微镜观察细胞形态及密度、MTT比色法检测细胞OD值,并分别于24h、48h、72h通过Realtime-PCR测定空白组、模型组、药物Ⅰ组细胞中血管内皮细胞生长抑制因子(vascular endothelial growth inhibitor,VEGI)的表达水平。[结果]与空白组相比,药物Ⅱ组细胞密度显著增高,形态完整,且OD值高于空白组(P<0.001);与模型组相比,用右归饮含药血清干预后,药物Ⅰ组细胞密度增高,形态较为完整,OD值高于模型组(P<0.01);PCR结果显示药物Ⅰ组细胞的VEGI表达水平低于模型组(24h,48h,P<0.01)。[结论]右归饮含药血清能在一定程度上促进体外培养的人血管内皮细胞增殖,同时对细胞氧化损伤模型具有保护作用,其作用可能与下调VEGI基因表达有关。

破骨细胞的传代、冻存与复苏

目的:探讨破骨细胞传代、冻存与复苏的可行性,为开展破骨细胞的相关研究提供新的技术手段与方法。方法:破骨细胞的传代:取成年SPF级雄性SD大鼠1只,体重250 g,腹主动脉采血,分离周围血单个核细胞,经RANKL、M-CSF诱导培养2周,形成多核破骨细胞后,采用胰蛋白酶消化、震荡、吹打法,制成细胞悬液,离心后用含RANKL、M-CSF的α-MEM完全培养基重悬,接种至6孔培养板与直径35 mm培养皿中。破骨细胞的冻存:取上述细胞悬液,离心后用DMSO、FBS、α-MEM(1∶2∶7)冻存液,按常规程序将细胞冻存于-196℃液氮中。破骨细胞的复苏:从液氮中取出冻存的破骨细胞,37℃水浴中快速解冻,加PBS离心清洗后,用含RANKL、M-CSF的α-MEM完全培养基重悬,接种至6孔细胞培养板与直径35 mm培养皿中。同时对传代与复苏培养中破骨细胞的消化与贴壁过程,采用倒置相差显微镜与活细胞工作站进行观察记录与动态成像,3 d后作TRAP染色。结果:破骨细胞经胰蛋白酶消化、震荡、吹打后,细胞基本上脱壁、悬浮,可以制成细胞悬液,用于传代与冻存。破骨细胞传代培养后,大多在2 h内开始贴壁,贴壁后胞内细胞核清晰可见。经液氮冻存的破骨细胞,复苏培养后2~3 h开始贴壁,胞质展开,可见多个细胞核。传代与冻存复苏培养后的破骨细胞,TRAP染色呈阳性反应。结论:破骨细胞虽然贴壁比较牢固,但经适当的消化、震荡及吹打,多数可脱壁悬浮,并能实现传代培养,同时还可采用常规方法进行细胞冻存与复苏培养,经传代与冻存的破骨细胞仍可保持破骨细胞的活性。破骨细胞的传代与冻存,可以按实验计划与用量需求,随时进行分量传代与复苏培养,为开展破骨细胞的相关研究提供新的技术手段与方法。

脉冲电磁场对大鼠成骨细胞增殖影响的活细胞成像观察研究

目的应用活细胞成像技术观察脉冲电磁场作用下大鼠成骨细胞的生长、增殖过程,探讨不同脉冲电磁场强度对大鼠成骨细胞生长、增殖的影响。方法首先采用MTT法检测在15Hz,0.1、0.3、0.5、1.0mT脉冲电磁场连续刺激下,4种脉冲电磁场强度组与对照组的成骨细胞存活与增殖能力,筛选出最佳的脉冲电磁场刺激强度。根据筛选结果,选用频率15Hz、强度0.1mT的脉冲电磁场,应用活细胞成像技术,以Time-Lapse方式,对脉冲电磁场刺激组与对照组成骨细胞的生长、增殖过程,作多点平行对照记录,动态观察两组成骨细胞的贴壁速率与分裂速率。并采用MTT法同步检测两组细胞的增殖情况。结果原代培养3d的成骨细胞,在15Hz脉冲电磁场中连续刺激3d,经MTT法检测,1.0mT组细胞几乎全部死亡,0.5mT组与对照组比较细胞增殖能力无明显差别,0.3、0.1mT组与对照组比较细胞增殖能力增强(P<0.05、P<0.01)。活细胞成像Time-Lapse平行对照记录,动态观察分析表明,15Hz、0.1mT脉冲电磁场组观察野的细胞贴壁速率与对照组比较无明显差别,分裂速率较对照组观察野增快(P<0.05),MTT法同步检测也证明0.1mT脉冲电磁场刺激组的细胞增殖能力较对照组增强。结论 15Hz、0.1mT脉冲电磁场对体外培养的大鼠成骨细胞增殖具有促进作用,但强度超过0.5mT的脉冲电磁场对成骨细胞增殖无明显促进作用,如果强度≥1mT反而会导致成骨细胞的死亡。