基于免疫信息学技术的雏沙门菌多表位疫苗构建

【目的】设计针对雏沙门菌(Salmonella Pullorum)IpaJ蛋白的多表位疫苗(multi-epitope vaccine, MEV),为净化鸡白痢提供新的疫苗。【方法】选用IEDB预测雏沙门菌IpaJ蛋白的T淋巴细胞主要组织相容性复合体Ⅰ(MHCⅠ)类分子结合表位;用NetMHCIIpan 4.0 Server预测T淋巴细胞MHCⅡ类分子结合表位;用IEDB预测B淋巴细胞表位。将各个服务器预测结果筛选出的表位经过VaxiJen v 2.0评估抗原性后,将合格的表位通过柔性linker串联成多表位疫苗。对构建的多表位疫苗进行抗原性、理化性质、N-糖基化位点、二级结构和三级结构预测。使用分子对接评估多表位疫苗与免疫受体的结合能力,使用免疫模拟评估多表位疫苗的免疫效果,最后优化密码子便于克隆表达。【结果】经筛选后,选择4个MHCⅠ、4个MHCⅡ和8个B淋巴细胞表位优势表位构建的多表位疫苗MEV-IpaJ。多表位疫苗MEV-IpaJ的分子质量为28.18 ku,为稳定亲水蛋白,具有良好的抗原性,存在4个潜在的N-糖基化位点,α-螺旋、延长链、β-转角和无规则卷曲分别占20.38%、19.23%、8.08%和52.31%。三级结构Ramachandran作图显示,优势区域中含有残基数占89.9%%,进行细化后优势区域的残基数增加到94.0%,三级结构突出表位作图也证明MEV-IpaJ具有良好的免疫原性。分子对接结果显示,MEV-IpaJ与Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)和TLR4蛋白分子可对接。免疫模拟结果显示,MEV-IpaJ具有较好的免疫应答,能提高部分细胞因子的表达,经密码子优化确保设计的MEV-IpaJ可在大肠杆菌K12表达系统中高效、稳定地表达。【结论】本研究构建的多表位疫苗MEV-IpaJ可有效表达并可能诱导强烈的T细胞和B细胞免疫应答。本研究为雏沙门菌多表位疫苗的设计提供了一种新的方法,为雏沙门菌多表位疫苗的研发提供了理论依据及数据支持。

奶牛真胃变位的发病特点及治疗方法比较

奶牛真胃变位发病率及死亡率较高,本文从发病特点及不同治疗方法进行比较。结果表明:真胃变位多发生于2～3胎次年轻高产奶牛,且多在产后30d内发生;手术疗法治愈率高于保守疗法;不同术部进行手术只是难易度的差别,对治愈率影响不大。

中药对大鼠实验性骨折愈合的影响

试验将健康W istar大鼠60只[体重:(250±20)g],雌雄各半,随机分为3组,每组20只。Ⅰ组:空白对照组,对试验大鼠仅进行假手术处理,从手术第二天开始灌服蒸馏水[4 m l/(d.只)];Ⅱ组:给药试验组,对大鼠造成实验性骨折,从手术第二天开始灌服接骨中药浓缩液[4 m l/(d.只)];Ⅲ组:骨折模型(阳性对照)组,对大鼠造成实验性骨折,从手术第二天开始灌服蒸馏水[4 m l/(d.只)]。各组试验大鼠分别于手术后7 d、14 d和21 d心脏采血,测定血清中碱性磷酸酶(ALP)活性、血清钙浓度和血清无机磷浓度,结果表明:骨折发生后,与空白对照组相比,Ⅱ组和Ⅲ组大鼠血液中ALP活性增高,且差异显著(P<0.05),其中在骨折后14 d血液中ALP活性最高;各试验组中,Ⅱ组血液中ALP活性高于Ⅲ组,两者存在显著差异(P<0.05);骨折后7 d血钙升高,对应血磷降低,且各组间存在显著差异(P<0.05);骨折后14 d血钙降低,而对应血磷升高,且各组间均存在显著差异(P<0.05)。表明,中药组方可通过增强大鼠机体内成骨活动,提高血清ALP活性和促进钙磷沉积,进而促进骨折愈合。

鸡传染性支气管炎与新城疫混合感染的诊治

2013年春泰州某养鸡密度较大的养殖区发生了产蛋鸡呼吸道症状明显、产蛋率骤降、死亡率低的疾病,而同期育雏鸡则出现呼吸道症状,且出现大批死亡。综合临床调查、病理剖检和实验室检测,诊断为鸡传染性支气管炎和新城疫混合感染。经及时消毒、紧急免疫接种、中西结合用药,病情得到了控制。

浅谈高等职业教育的实践教学

高等职业教育是培养某一社会职业或技术岗位群,从事一线的高级技术或管理人才。实践教学是高等职业教育教学活动的重要组成部分,是课堂教学的延续和深化。只有强化职业技能培训,在教学过程中,充分发挥教师的主导作,注重学生的主体作用,探索新的职业教育的实践教学体系,提高实践教学的质量,才能保证培养出某一社会职业或技术岗位群,从事一线的高素质的职业技能型高级技术或管理人才。

颗粒细胞去除方法对猪成熟卵母细胞冷冻效果的影响

采集新鲜猪卵巢表面直径2~5 mm的卵泡中卵丘-卵母细胞复合体,采用透明质酸酶消化法和机械法去除成熟卵母细胞外围的颗粒细胞后进行冷冻,解冻后观察其形态正常率和二乙酸荧光素染色存活率,探讨去除颗粒细胞的方法对猪成熟卵母细胞冷冻效果的影响。结果表明:卵母细胞冷冻-解冻后,其形态正常率和存活率均显著降低;酶消化法和机械法去除部分颗粒细胞后的卵母细胞,经冷冻-解冻后形态正常率分别为90.6%和90.2%,两者差异不显著;而存活率分别为49.3%和43.9%,两者显著差异。

孔雀马立克氏病的诊治

孔雀马立克氏病的诊治吴敏秋（江苏省畜牧兽医学校泰州２２５３００）王杰（盐城大中农场）１发病情况某公园动物园养有８只蓝孔雀，其中６只为成年孔雀，２只为８月龄幼孔雀。近日２只幼孔雀离群呆立，饮食减少，粪便稀薄，曾用干酵母、氟哌酸和维生素添加剂等拌料，未见...

鸡传染性喉气管炎病毒的分离鉴定

[目的]证实江都市存在鸡传染性喉气管炎。[方法]以江都市5只发病鸡的喉、气管粘膜及其分泌物为病料，采用鸡胚传代的方法从中分离出1株病毒（ILTV—JD07），对分离毒株进行了理化特性检验、毒价测定、中和试验、琼脂免疫扩散试验、PCR扩增及电泳检测等。[结果]鸡胚接种病料后48h胚体活性减弱，3—8d内死亡6枚，解剖死胚可见其绒毛尿囊膜（CAM）增厚，取病变CAM传至第4代接种鸡胚，鸡胚集中于接种后3—5d内死亡；第4代分离毒的毒价基本稳定在10^5.77EID50／0．2ml，分离毒毒株可被鸡传染性喉气管炎（ILT）标准阳性血清中和，中和价为1：54；参考株ILT／13与分离株ILTV-JD07均可扩增出1条183bp的DNA条带。[结论]江都市存在鸡传染性喉气管炎。

高效液相色谱法同时测定鸡蛋中恩诺沙星和环丙沙星的残留

实验研究用高效液相色谱法同时测定鸡蛋中恩诺沙星和环丙沙星的残留。鸡蛋样品经二氯甲烷提取,氧化铝柱净化,提取物蒸发浓缩至干,用流动相(0.01mol/l85%草酸/15%乙腈,V/V)溶解,微孔过滤,进行HPLC分析。结果表明,用该方法测得恩诺沙星和环丙沙星的最低检测限均为5ng/g,回收率环丙沙星为82.0%～91.2%,恩诺沙星为83.2%～92.5%,能够满足鸡蛋中恩诺沙星和环丙沙星残留量检测技术要求。

雏鸡硒中毒的诊治

对鸡群而言，常用的补硒方法是用亚硒酸钠或亚硒酸钠-维生素E拌料给药。但由于无机硒的安全范围较窄，临床上由于补硒方法不当而造成硒中毒的事件常有发生。现将2例硒中毒的病例报告如下，以供参考。

鸡蛋中多种磺胺类药物残留的检测方法研究

试验利用高效液相色谱法同时测定鸡蛋中9种磺胺类药物的残留。鸡蛋样品经60%乙醇水溶液(V/V)提取,提取液采用离心超滤装置净化,将离心超滤所得滤液进行HPLC分析。结果表明,用该方法测得磺胺类药物的最低检测限均为0.005μg/g,回收率均高于83.0%,能够满足鸡蛋中多种磺胺类药物残留检测的技术要求。

新生儿肠造瘘术并发症风险相关因素分析

目的分析新生儿肠造瘘术后并发症的相关危险因素,为预防并发症和选择治疗措施提供依据。方法回顾性分析2015年1月～2017年6月在我院行新生儿肠造瘘术并获得随访的65例患儿的临床资料,观察其术后并发症的发生,并对其影响因素进行单因素分析和多因素分析。结果 65例患儿中,1例早产儿因新生儿坏死性小肠结肠炎合并重度感染死亡,1例因严重原发疾病以及其它先天性畸形放弃治疗,2例失访。61例获得随访的患儿中发生并发症共30例(49. 18%),其中营养不良15例(50%),造瘘周围皮肤炎症10例(33. 33%),电解质紊乱7例(23. 33%),造瘘肠管脱垂2例(6. 67%),造瘘肠管回缩2例(6. 67%),肠梗阻2例(6. 67%),造瘘大出血1例(3. 33%),切口疝1例(3. 33%)。61例患儿均进行了二期手术关闭造瘘,全部存活。单因素分析显示,患儿术后并发症的发生与出生类型、造瘘位置、造瘘类型和前白蛋白含量相关(P <0. 05),而与性别、是否独生、父母居住地和C反应蛋白含量无关(P> 0. 05)。Logistic回归分析显示,早产、小肠造瘘和前白蛋白含量异常是新生儿肠造瘘术后并发症的独立危险因素(P <0. 05)。结论新生儿肠造瘘术后并发症发生率较高,对患儿的临床康复造成极大的威胁;临床上应高度重视,针对其相关危险因素采取有效干预措施以减少并发症发生。