骨髓间充质干细胞、肿瘤坏死因子受体Ⅱ-抗体融合蛋白和美沙拉嗪对TNBS诱导的结肠炎大鼠疾病活动指数与组织损伤指数的影响

目的:研究骨髓间充质干细胞(MSCs)、肿瘤坏死因子受体Ⅱ-抗体融合蛋白(TNFRⅡ-IgG)和美沙拉嗪对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的结肠炎大鼠疾病活动指数(DAI)与组织损伤指数(TDL)的影响。方法:MSCs应用含10%胎牛血清的低糖DMEM培养。TNBS/乙醇灌肠诱导SD大鼠结肠炎模型。81只SD大鼠随机分成正常对照组(n=15,A组)、结肠炎组(n=15,B组)、MSCs治疗1组(3×106MSCs,n=15,C组)、MSCs治疗2组(5×106MSCs,n=15,D组)、TNFRⅡ-IgG治疗组(n=6,E组)和美沙拉嗪治疗组(n=15,F组)。采用DAI描述大鼠的表现,大体CMDI描述肠道的肉眼下表现,TDI评价肠道组织学改变。结果:MSCs经过3次传代后可纯化。B组大鼠各时点DAI、CMDI和TDI评分均显著高于A组(P<0.05);第6天除A组外各组大鼠评分之间无明显差异(P>0.05);第9天C组、D组和F组各评分均低于B组(P<0.05),C组评分与D组无显著差异(P>0.05);第14天C、D、E和F组评分均低于B组(P<0.05),其中F组评分最高(P<0.05),E组次之(P<0.05),D组评分最低(P<0.05)。结论:MSCs、TNFRⅡ-IgG和美沙拉嗪灌肠液可显著改善TNBS诱导的结肠炎大鼠第14天的DAI、CMDI和TDI指标,其中效果最好的是MSCs,其次是TNFRⅡ-IgG,美沙拉嗪灌肠液效果较差。

骨髓间质干细胞对炎症性肠病肠上皮重建的作用机制

骨髓间质干细胞(MSCs)移植是治疗炎症性肠病(IBD)的一种新方法,其可通过促进肠上皮重建修复受损组织,但其作用机制仍未完全明确。相关机制的研究主要集中在MSCs的多向分化、分泌细胞因子、调节肠道干细胞微环境三个方面。本文就相关研究进展作一综述。

文拉法辛缓释片与匹维溴铵治疗无明显情绪障碍腹泻型肠易激综合征的初步研究

背景:目前对选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRIs)可用于治疗伴抑郁或焦虑状态的肠易激综合征(IBS)已基本达成共识,但关于SSRIs治疗无明显情绪障碍IBS的研究相对较少。目的:评价5-羟色胺去甲肾上腺素再摄取抑制剂文拉法辛缓释片与匹维溴铵对无明显情绪障碍、长期反复发作腹泻型IBS(IBS-D)的治疗作用。方法:本临床研究协作组前期关于文拉法辛缓释片与匹维溴铵治疗IBS-D的随机对照多中心研究中,376例患者完成观察。23例经汉密尔顿抑郁量表(HAMD)和汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评价为无明显抑郁、焦虑状态者中,对照组7例(口服匹维溴铵8周),试验组16例(口服文拉法辛缓释片与匹维溴铵8周)。比较两组患者的症状评分和HAMD、HAMA评分以及总有效率。结果:服药1周后起,试验组腹痛、腹泻评分和症状总评分均显著低于对照组(P<0.05);服药4周后起,试验组HAMD、HAMA评分亦显著低于对照组(P<0.05)。试验组总体症状改善的总有效率显著高于对照组(87.5%对28.6%,P<0.05)。结论:文拉法辛缓释片与匹维溴铵可改善无明显情绪障碍IBS-D患者的核心症状和不良情绪因子,疗效明显优于单用匹维溴铵。

硫唑嘌呤对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响

目的:研究硫唑嘌呤(AZA)对SD大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖、凋亡和细胞周期的影响,为炎症性肠病的临床治疗提供实验依据。方法:含10%FBS的低糖DMEM培养基培养大鼠MSCs,50 mg/L、100 mg/L、200 mg/L、300 mg/L的AZA分别作用于大鼠MSCs 24 h、48 h和72 h,用显微镜下直接计数法检测MSCs的增殖情况并绘制生长曲线,用流式细胞术检测MSCs凋亡和细胞周期。结果:MSCs经过3次传代后可纯化。在小于100 mg/L浓度下,AZA对MSCs的增殖、细胞周期与凋亡无显著影响(P>0.05),而AZA在大于200 mg/L浓度下作用72 h后,MSCs生长受到明显抑制,抑制率大于66%,凋亡率明显升高(P<0.05);在300 mg/L浓度下作用72 h时,MSCs的凋亡率则明显降低,而MSCs坏死率明显升高(P<0.05)。在大于200 mg/L的AZA作用下,随着作用时间延长,MSCs进入G0/G1期细胞增多,S期细胞减少(P<0.05)。结论:一定浓度的AZA对大鼠MSCs的增殖、细胞凋亡和细胞周期均有明显的影响。大剂量的AZA会直接造成MSCs死亡。

结肠炎大鼠炎症黏膜提取液对骨髓间质干细胞增殖和表面分化抗原的影响

背景:动物实验和临床试验均表明间质干细胞(MSCs)对受损肠道组织有一定修复作用,然而目前尚不清楚肠道炎症微环境对MSCs移植治疗炎症性肠病(IBD)有何影响。目的:通过体外实验观察结肠炎大鼠模型肠道炎症黏膜提取液对骨髓MSCs增殖和表面分化抗原的影响。方法:以全骨髓贴壁法分离和原代培养大鼠MSCs并行传代扩增。取三硝基苯磺酸(TNBS)结肠炎大鼠模型肠道炎症黏膜提取液(0、1、2、3 ml)与MSCs共培养,倒置相差显微镜观察各组细胞贴壁和生长情况,绝对计数法绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞表面分化抗原表达。结果:全骨髓贴壁法可成功分离MSCs,所获细胞CD29、CD44表达阳性,CD105表达低度阳性,CD34、CD45表达阴性。3 ml炎症黏膜提取液处理组MSCs接种6 h后见细胞贴壁,36 h开始克隆性增生,此后细胞增殖速度较空白对照组明显加快,第6 d即达100%融合,但表面分化抗原表达与空白对照组相比无明显变化。结论:结肠炎大鼠炎症黏膜提取液可促进骨髓MSCs增殖,但对细胞表面分化抗原无明显影响。

文拉法辛缓释片加匹维溴铵治疗腹泻型肠易激综合征的多中心随机对照研究

目的观察文拉法辛缓释片与匹维溴铵联用治疗腹泻型肠易激综合征（IBSD）的疗效、不良反应和对抑郁焦虑评分的影响。方法采用随机、开放、平行对照、多中心研究方法，将403例符合入选标准的IBS-D患者分为联用文拉法辛和匹维溴铵的试验组及单用匹维溴铵的对照组。对患者的腹痛和腹泻症状进行评分，根据症状积分变化判定疗效。应用汉密尔顿抑郁量表和汉密尔顿焦虑量表列‘患者情绪进行评分。观察和记录患者的不良反应。定量资料行独立t检验，定性资料行卡方检验，并行意向性治疗原则（ITT）和符合方案集（PP）分析。结果93．88％（353／376）的IBS—D患者伴抑郁或焦虑状态。试验组患者治疗后1周腹痛和腹泻症状获明显改善，治疗后2周抑郁焦虑状态获明显改善。在PP分析中，试验组的腹痛治疗有效率、腹泻治疗有效率、总有效率E9别为74．61％（144／193）、79．79％（154／193）、91．19％（176／193）]均高于对照组[45．36％（83／183）、57．92％（106／183）、68．85％（126／183）]，差异均有统计学意义（X^2=33．606、21．059、29．656，P均〈0．01）。在ITT分析中，试验组的腹痛治疗有效率、腹泻治疗有效率、总有效率[分别为69．57％（144／207）、74．40％（154／207）、85．02％（176／207）]均高于对照组[42．35％（83／196）、54．08％（106／196）、64．29％（126／196）]，差异均有统计学意义（X^2=30．319、18．148、23．054，P均〈0．01）。试验组的不良反应发生率[10．36％（20／193）]高于对照组[1．09％（2／183）]，差异有统计学意义（X^2=14．652，P〈O．01）。结论文拉法辛缓释片与匹维溴铵联用治疗IBS-D可明显改善患者的抑郁焦虑状态和IBS的核心症状，但不良反应发生率较高。

克罗恩病和肠结核的临床内镜和病理特征分析

目的研究克罗恩病（Crohn′s disease，CD）和肠结核（intestinal tuberculosis，ITB）鉴别诊断特点。方法回顾性分析住院确诊的55例CD和35例ITB患者临床资料，应用Lee评分方法评估CD与ITB的诊断符合率。结果血便与肛周疾病在CD常见（P〈0．05），发热、盗汗、腹胀、合并肺结核、腹水、PPD皮试强阳性在ITB常见（P〈0．05）；CD内镜下见纵行溃疡、鹅卵石征、病灶常〉4节段者明显多于ITB（P〈0．05），而ITB内镜下更常见回盲瓣哆开、病灶常〈4节段（P〈0．05）。内镜活检标本对二者鉴别价值有限，手术标本透壁性全层炎、裂隙状溃疡、粘膜下层增宽在CD中更常见（P〈0．05），CD微肉芽肿检出率更高（P〈0．05），干酪样肉芽肿则只存在于ITB中（P〈0．05），肉芽肿位置于粘膜下层和浆膜层肉芽肿更常见于ITB（P〈0．05），肉芽肿数目ITB高于CD（P〈0．05）；应用Lee评分系统分别对CD组及ITB组进行评分，CD组〉0分者为42％，ITB组〈0分者为88％（P〈0．05）。结论CD与ITB的鉴别诊断需要综合临床、内镜、病理与Lee评分方法进行分析。