大鼠肺组织糖皮质激素受体在哮喘过程中的变化及加味六君子汤的影响

用放射配基竞争结合分析测定连续激发哮喘模型大鼠和加味六君子汤治疗后不同时间肺组织GR的结合容量及血浆皮质酮含量（蛋白竟争结合法）。各哮喘组大鼠肺组织GR结合位点在激发后第1天显著升高；第3天迅速回落，其中中药组和中药加西药组仍维持较高水平，与正常对照组比较差异显著（P＜001）；第7天模型组继续下降，但与正常对照组比较差异不显著，与中药组、中药加西药组比较差异显著（ P＜ 0． 05）。血浆皮质酮的含量，激发后从第 1天起各哮喘组均明显下降，与正常组比较差异显著（P＜0．01）；激发后第7天，中药组与模型组比较差异显著（P＜0．01）。提示大鼠肺组织GR随哮喘发作的不同时期而变化，哮喘大鼠存在肾上腺皮质功能的不足，加味六君子汤可上调哮喘大鼠肺组织GR和提高内源性肾上腺皮质激素。

加味六君子汤对哮喘大鼠肺组织β-肾上腺素能受体水平cAMP含量的影响

用放射配基结合分析和放射免疫分析，测定连续激发大鼠哮喘和加味六君子汤治疗后不同时间肺组织β-肾上腺素能受体（β－AR）结合位点和cAMP含量。激发哮喘第3天起，模型组肺内β－AR和cAMP均低于正常组，加味六君子汤和必可酮可上调哮喘大鼠肺内β－AR和cAMP，在第7天表现更明显。

补肾定喘汤对哮喘大鼠糖皮质激素受体的影响

采用放射性配基竞争结合法，测定连续激发哮喘大鼠服用补肾定喘汤后第1、3、7天肺组织糖皮质激素受体（GCR）。观察结果发现：激发后第1天中药组大鼠肺组织GCR较正常对照组显著升高（P＜0．01）；第3天中药组大鼠肺组织GCR仍维持较高水平，与模型组比差异显著（P＜0.01）；第7天中药组及中药加西药组大鼠肺组织GCR水平较模型组均有显著差异（P＜0.01），提示中药补肾定喘汤对哮喘大鼠肺组织GCR水平具有上调作用。

硝酸盐还原酶一步法测定血清中硝酸盐浓度

为建立简便快速的一氧化氮 (NO)间接测定方法 ,根据硝酸盐还原酶还原硝酸盐 (NO3- )至亚硝酸盐 (NO2 - )的过程中 ,所消耗的还原型辅酶Ⅱ (NADPH)的量与NO3- 浓度呈正比的原理 ,用 340nm处NADPH吸光度的下降值 ,推算出NO3- 的量。所建体系的反应时间为 90min ,NADPH浓度为 6mmol/L ,硝酸盐还原酶浓度为 5 0 0U/L。NaNO3 在 0u mol/L～ 2 0 0umol/L范围内 ,与NADPH吸光度的变化量具有良好的线性关系 ,r =0 993。批内变异系数 (CV) =4 4% ,批间CV =10 5 % ;回收率为 92 36 %。 2 0例 2 5～ 5 5岁的正常人血清中NO3- 浓度为 5 2 42± 19 76umol/L。用此法测定血清中NO3- 浓度简便快速、特异性高、干扰因素少 ,不需昂贵仪器 。

补肾中药对老年大鼠肝细胞核内活性基因的影响

目的:观察老年、老年加补肾中药及青年组大鼠细胞核内活性基因的变化,探求补肾中药延缓衰老的分子生物学机理。方法:以脱氧核糖核酶Ⅰ(DNabe Ⅰ)为探针,脱氧核糖核酸Ⅱ(DNaseⅡ)为参照,分别切割老年、青年、老年加补肾药大剂量组、老年加补肾药小剂量组大鼠肝细胞核内染色质,研究4组大鼠肝细胞核活性基因的变化。酶切后进行琼脂糖电泳,并将胶板置于紫外灯下观察、摄影。结果:观察到在不同的时间内,对 DNaseⅠ的消化敏感性依次为青年组大于补肾组(大剂量组与小剂量组无显著差异),补肾组大于老年组,而4组对 DNaseⅡ敏感性无差异。结论:老年大鼠肝细胞核内染色质对 DNaseⅠ的敏感性下降。补肾中药延缓衰老的分子生物学基础可能与减缓细胞核内活性基因丢失有关。

补肾健脾三方对哮喘大鼠糖皮质激素受体及皮质酮的影响

目的：探讨补肾健脾方龟芪散、补肾方补肾定喘汤、健脾方加味六君子汤等扶正三方对连续激发哮喘的大鼠肺组织糖皮质激素受体（ＧＣＲ）及血浆皮质酮水平的调节作用。方法：将给予扶正三方和必可酮的大鼠列为治疗组，哮喘模型大鼠列为对照组，采用放射配基结合分析和放射竞争性蛋白结合分析法，比较观察药物对连续激发哮喘的大鼠肺组织ＧＣＲ及血浆皮质酮水平的影响。结果：哮喘激发后肺组织胞浆ＧＣＲ的结合位点数（ＲＴ）值逐日下降，血浆皮质酮水平降低。激发第７天，扶正三方可显著上调ＧＣＲ的ＲＴ值（Ｐ＜００５），并使血浆皮质酮水平明显上升（均Ｐ＜００５）。结论：扶正三方能提高哮喘大鼠肺组织的ＧＣＲ的ＲＴ值。

龟芪散对哮喘大鼠肺组织β-肾上腺素能受体及cAMP的影响

大鼠哮喘连续激发后肺组织胞膜β-AR和脑浆cAMP水平逐日下降，在第7目明显低于正常对照组（P＜0．01）；激发第7日，龟芪散明显上调β-AR密度（P＜0．05）并使cAMP水平明显上升（P＜0．05）。提示龟芪散治疗哮喘可能与其上调β-AR，提高cAMP水平作用有关，联合用药可提高糖皮质激素的疗效。

补肾健脾中药对哮喘模型大鼠肺组织β-肾上腺素能受体的影响

采用放射配基结合分析法观察补肾健脾方龟芪散 ,补肾方补肾定喘汤和健脾方加味六君子汤扶正三方对连续激发哮喘的大鼠肺组织 β-肾上腺素 ( β -AR)的影响。结果表明 ,激发后肺组织胞膜 β -AR逐日下降 ,第 7天明显低于正常对照组 ,激发第 7天 ,扶正三方可明显上调哮喘大鼠肺组织 β -AR密度。以上实验结果提示 ,扶正三方防治哮喘可能与其上调 β

龟芪散对哮喘大鼠糖皮质激素受体及皮质酮的影响

采用放射配基结合分析和放射竞争性蛋白结合分析法，比较观察补肾健脾方龟芪散对连续激发哮喘的大鼠肺组织糖皮质激素受体（GCR）及血浆皮质酮的影响。结果表明，哮喘激发后肺组织胞浆GCR密度逐日下降，血浆皮质酮水平降低；激发第7天，龟芪散可显著上调GCR密度（P<0．01）．并使血浆皮质酮水平明显上升（P<0．05）。以上实验结果提示，龟芪散治疗哮喘可能与其上调GCR，提高血浆皮质酮水平作用有关。

扶正中药对哮喘大鼠肺组织cAMP水平的影响

大鼠哮喘连续激发后，肺组织ｃＡＭＰ含量开始下降，在第７天明显低于正常对照组（Ｐ＜０．０５）；激发第７天，龟芪散（补肾健脾方）（Ｐ＜０．０５）、补肾定喘汤（补肾方）（Ｐ＜０．０５）和加味六君子汤（健脾方）（Ｐ＜０．０１）均明显增加模型大鼠的ｃＡＭＰ含量。实验结果提示，龟芪散。