分子印迹整体柱在高效液相色谱和电色谱手性分离中的应用

在常规不锈钢色谱管中以甲基丙烯酸为功能单体,采用原位聚合法制备了(5S,11S)-特罗格尔碱(S-TB)的印迹整体柱。考察了流动相中添加不同量的醋酸和水对分离的影响,结合台阶梯度洗脱模式在S-TB整体柱上实现了对TB消旋体的快速分离。另外,以碱性单体2-二甲基乙基胺甲基丙烯酸酯(DAMA)为功能单体,在毛细管中采用原位聚合法制备了毛细管分子印迹整体柱,用于在毛细管电色谱(CEC)中对消旋体1,1′-联-2-萘酚(BNL)进行手性分离。结果表明,以DAMA为功能单体可以制备其他酸性模板的分子印迹聚合物,从而扩大了分子印迹聚合物(MIP)在CEC分离中的应用范围。

对羟基苯乙腈水解酶产生菌的筛选及产酶条件研究

以对羟基苯乙腈为唯一氮源,从土壤中筛选到5株腈水解酶产生菌.在初筛的过程中,用薄板层析(TLC)对细胞转化液定性检测,高效液相色谱法(HPLC) 定量分析.考察了培养时间、不同碳源对细胞酶产量的影响及在反应过程中金属离子对细胞酶产量的影响,实验结果发现,培养时间在70 h左右时细胞酶产量最高,以葡萄糖为碳源质量,质量浓度在12.5～15 g/L附近酶产量最高.Cu2+对细胞酶活力具有非常强烈的抑制作用 ,Co2+、Hg2+、Ni+等对细胞酶活力具有明显的抑制,而Ba2+、Mg2+具有较明显的促进作用,但在高浓度下促进作用减弱.

整体柱制备技术的新进展及其在蛋白质组学中的应用

整体柱是通过在柱管内原位聚合或固化的方法制备得到的具有多孔结构的整体棒状固定相,与传统的填充柱相比,具有通透性好、传质速率快、容易制备等优点,因此在分离分析领域特别是生物分离分析中发挥的作用日益增大。整体柱的制备及应用近年来也得到了快速发展,层出不穷的新型整体柱已被广泛用于色谱高效分离分析、固相萃取及酶反应器等方面,大大推动了分离分析科学的发展。本文主要总结了近五年来整体柱的制备技术及其在蛋白质组学应用中的一些最新研究进展。

“一锅法”制备C18-硅胶杂化毛细管整体柱及其应用

发展了一种"一锅法"制备有机-无机杂化毛细管整体柱的方法。首先将四甲氧基硅烷、乙烯基三甲氧基硅烷在弱酸条件下水解,然后加入有机单体(甲基丙烯酸-N,N-二甲基十八烷基溴化铵乙酯)及自由基聚合引发剂,同步原位完成硅羟基间的缩聚反应及双键间的自由基聚合反应,从而制成C18-硅胶杂化整体柱;同时用毛细管电色谱(CEC)和毛细管液相色谱(CLC)对其柱效和分离能力进行了初步评价,并将其应用到微柱液相色谱-串联质谱对牛血清白蛋白酶解液的分离分析。结果表明,该C18-硅胶杂化整体柱具有较高的柱效和较好的重现性,在分离分析复杂生物样品方面具有较大的应用前景。此外,本文所发展的方法在制备杂化整体柱的过程中不借助相应的硅烷试剂,为杂化整体柱的制备提供了一种新的思路。

对羟基苯乙腈水合酶高产菌株的选育

从全省各处采集的50多份土样筛选到一株产腈水合酶能力较高的菌株E10a,该菌株产生的腈水合酶为非诱导酶,产酶条件优化实验结果表明,产酶培养基组成:麦芽糖20 g/L,酵母膏5 g/L,尿素7.5 g/L,味精0.75 g/L,K2HPO40.5 g/L,KH2PO40.5 g/L,MgSO40.5 g/L,FeSO4.7H2O 10 mg/L,CoCl210 mg/L,微量元素母液0.8 ml/L;最佳培养条件为:培养温度28℃,摇床转速150 r/min,培养基起始pH 7.0,培养时间5 d,在优化培养条件下,1 h可将1 g/L质量浓度的底物对羟基苯乙腈全部转化为对羟基苯乙酰胺。

固相萃取法纯化制备水飞蓟宾和异水飞蓟宾

水飞蓟宾和异水飞蓟宾是水飞蓟素中的主要有效成分,其纯化制备主要借助柱色谱法,制备量大,纯化效果好,但过程非常费时。该研究的主要目的是利用更为快速高效的固相萃取(SPE)法从水飞蓟粗提物中分离纯化水飞蓟宾和异水飞蓟宾。建立了用于分析水飞蓟宾和异水飞蓟宾的高相液相色谱法,通过优化洗脱梯度,实现了水飞蓟宾、异水飞蓟宾与其他组分的分离。试用了3种保留机理不同的SPE填料,包括亲水亲脂(HLB)填料、亲水色谱(HILIC)填料及反相C18硅胶填料。通过对比发现C18硅胶对目标化合物的选择性最佳。进一步控制SPE的淋洗及洗脱条件,收集相应的洗脱液,经氮吹干燥后得到纯化的样品。提纯后的水飞蓟宾和异水飞蓟宾混合物的纯度可达94%以上。水飞蓟宾和异水飞蓟宾的平均回收率分别为70.5%~81.7%和66.7%~81.8%,相对标准偏差分别为2.7%~9.4%和1.5%~6.1%。该方法简单、高效,免去传统分离纯化过程中长时间的柱色谱分离过程,适合制备纯度较高的水飞蓟宾和异水飞蓟宾的二元混合标准样品。

邻苯二甲酸二环己酯与牛血清白蛋白相互作用研究

本文利用光谱法和分子对接技术,研究邻苯二甲酸二环己酯(DCHP)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机制。荧光光谱结果表明,DCHP可以诱导BSA的内源性荧光猝灭,且猝灭机制为静态猝灭;随着DCHP浓度增大,BSA最大发射波长发生蓝移。不同温度下的热力学常数表明,DCHP主要靠氢键和范德华力与BSA相结合;同时DCHP与BSA只有1个结合位点。位点实验结果显示DCHP与BSA在位点Ⅰ结合。同步荧光光谱、三维荧光和圆二色谱结果进一步证实DCHP改变了BSA的构象。通过分子对接技术模拟DCHP与BSA在分子水平上的相互作用机制,结果与光谱学研究结果一致。

纳米粒子在多孔介质中迁移模型的优化

当前,纳米粒子在土壤等多孔介质中的传输多采用单集去除率(η)进行定量描述。然而,单集去除率仅考虑单个介质颗粒对纳米粒子的作用,并未考虑介质颗粒之间的孔隙对纳米粒子的拦截效应,如T-E模型。鉴于此,采用持水度(f_(r))来定量反映多孔介质的孔隙特征,并对现有的T-E模型进行了修正。实验表明,纳米粒子通过具有相同孔隙度(f)砂柱的穿透率并不相同,且与持水度(f_(r))呈反比关系。在此基础上,将截留机制产生的碰撞效率(η_(I))调整为与孔隙度(f)和持水度(f_(r))同时相关的表达式来实现对原有模型的优化。此外,通过砂柱对纳米二氧化硅(nSiO_(2))的传输实验和纳米二氧化钛(nTiO_(2))在不同粒径石英砂中的传输实验证明,优化模型适用于不同粒径的多孔介质并可以更准确地预测纳米粒子在多孔介质中的迁移。

水辅助分散固相萃取液相色谱法测定汽油中含氮化合物

建立了分散固相萃取结合液相色谱法测定汽油中13种含氮化合物的分析方法,研究吸附剂种类、上样和洗脱过程中的水相里的pH、洗脱条件等对模拟汽油中的含氮化合物富集效果的影响。结果表明,水辅助分散固相萃取提取汽油中含氮化合物的最佳条件为:用混合阳离子交换填料MCX为吸附剂,上样时水相的pH为3.5,洗脱液为含1%三乙胺的甲醇。在此条件下,当样品为100mL时,大多数含氮标样的富集因子在70.6~88.5之间,方法定量限在0.25~10μg/L。将该方法用于92#汽油样品中含氮物质的测量,发现了苯胺、间甲苯胺和N-甲基苯胺三种物质,其浓度分别为2.21,7.09,0.71 mg/L。

纳米粒子在多孔介质中迁移的研究

考察nTiO_(2)纳米粒子团聚和初始粒子浓度、多孔介质粗糙程度和颗粒大小以及流体流速和离子浓度等因素对纳米粒子在多孔介质中迁移的影响。结果表明,团聚程度越高,穿透率越小;纳米粒子的穿透率随着浓度的增大而减小;表面越粗糙的多孔介质可以附着更多的纳米粒子,减小纳米粒子的穿透率;粒径较小的多孔介质中,纳米粒子穿透率较低;流体流速越高,纳米粒子穿透率越高;较高离子浓度会降低纳米粒子穿透率。

医药中间体3-羟基丙腈的生产与应用

3-羟基丙腈(HPN)是合成多种医药、农药、高分子材料等的重要原料和中间体,可合成抗肿瘤药物环磷酰胺、治疗心血管病药物心得安和心可定。本文综述了HPN在医药方面的应用、合成工艺、检测方法以及应用前景。

混凝-臭氧/吸附-超滤-反渗透组合工艺对页岩气返排液水质净化效能分析

页岩气返排液中部分小分子有机物如二甲基苄胺(DMBA)、吲哚啉和6-甲基喹啉较难去除,采用混凝-臭氧/吸附-超滤-反渗透组合工艺处理页岩气返排液,探究了其有机、无机组分的去除规律。结果表明:混凝-臭氧-超滤-反渗透组合工艺对离子的去除率为96.7%~99.86%,对DOC和UV_(254)的去除率分别为98.7%和99.13%,对DMBA、吲哚啉和6-甲基喹啉去除率分别为82.02%、98.02%和97.67%;混凝-吸附-超滤-反渗透组合工艺对离子的去除率为95.99%~99.86%,对DOC和UV_(254)的去除率分别为95.31%和97.54%,对DMBA、吲哚啉和6-甲基喹啉去除率分别为70.19%、94.70%和87.93%。混凝-臭氧/吸附-超滤-反渗透工艺可有效去除返排液中的离子、DOC和UV_(254),对DMBA、吲哚啉和6-甲基喹啉的去除效果显著,有利于返排液的外部回用。