目的探讨microRNAs-455(miR-455)在心室重构中的作用及其机制。方法选择小鼠18只,分为miR-455组、GFP组及假手术组各6只。miR-455组、GFP组均行升主动脉缩窄术,术后4周即进展为心室重构模型。假手术组术中仅游离主动脉弓但不结扎。miR-...目的探讨microRNAs-455(miR-455)在心室重构中的作用及其机制。方法选择小鼠18只,分为miR-455组、GFP组及假手术组各6只。miR-455组、GFP组均行升主动脉缩窄术,术后4周即进展为心室重构模型。假手术组术中仅游离主动脉弓但不结扎。miR-455组于术后第1、8、15、22天尾静脉注射包被miR-455的腺病毒0.1 m L,GFP组及假手术组于同时点尾静脉注射包被GFP的腺病毒0.1 m L。术后4周造模成功,应用心脏超声检查测量各组左心室舒张期内径(LVIDd)、左心室舒张末容积(LVEDV)、左心室舒张期前壁厚度(LVAWd)、左心室射血分数(EF)。处死各组大鼠取心室肌行HE及Masson染色,观察心肌病理改变。采用qRT-PCR法检测各组心肌组织心肌肥厚基因[包括心房钠尿因子(ANF)、骨骼肌肌动蛋白1(ACTA1)、β肌球蛋白重链]及心肌纤维化基因[包括转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)]表达。采用Western blot法检测各组心肌细胞中凋亡蛋白Bax及抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白的表达。采用TUNEL染色法检测各组心肌细胞凋亡情况,计算凋亡指数。结果与假手术组相比,GFP组LVIDd增加、LVEDV增加、LVAWd增厚、EF降低(P<0.01或0.05);与GFP组相比,miR-455组LVIDd降低、LVEDV降低、LVAWd增厚、EF增加(P<0.01或0.05)。GFP组心肌组织呈心肌肥厚、心肌纤维化病理改变,miR-455组较GFP组心肌肥厚、心肌纤维化病理改变明显减轻。GFP组各心肌肥厚基因及心肌纤维化基因mRNA表达均高于假手术组,miR-455组各心肌肥厚基因及心肌纤维化基因mRNA表达均低于GFP组(P<0.01或0.05)。与假手术组相比,GFP组Bax表达增加、Bcl-2表达降低、心肌细胞凋亡指数增高(P<0.01或0.05);与GFP组相比,miR-455组Bax表达降低、Bcl-2表达增加、心肌细胞凋亡指数降低(P<0.01或0.05)。结论 miR-455具有抑制心室重构、改善心功能的作用,可能与其抑制心肌肥厚、心肌纤维化、心肌细胞凋亡有关。展开更多
文摘目的探讨microRNAs-455(miR-455)在心室重构中的作用及其机制。方法选择小鼠18只,分为miR-455组、GFP组及假手术组各6只。miR-455组、GFP组均行升主动脉缩窄术,术后4周即进展为心室重构模型。假手术组术中仅游离主动脉弓但不结扎。miR-455组于术后第1、8、15、22天尾静脉注射包被miR-455的腺病毒0.1 m L,GFP组及假手术组于同时点尾静脉注射包被GFP的腺病毒0.1 m L。术后4周造模成功,应用心脏超声检查测量各组左心室舒张期内径(LVIDd)、左心室舒张末容积(LVEDV)、左心室舒张期前壁厚度(LVAWd)、左心室射血分数(EF)。处死各组大鼠取心室肌行HE及Masson染色,观察心肌病理改变。采用qRT-PCR法检测各组心肌组织心肌肥厚基因[包括心房钠尿因子(ANF)、骨骼肌肌动蛋白1(ACTA1)、β肌球蛋白重链]及心肌纤维化基因[包括转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)]表达。采用Western blot法检测各组心肌细胞中凋亡蛋白Bax及抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白的表达。采用TUNEL染色法检测各组心肌细胞凋亡情况,计算凋亡指数。结果与假手术组相比,GFP组LVIDd增加、LVEDV增加、LVAWd增厚、EF降低(P<0.01或0.05);与GFP组相比,miR-455组LVIDd降低、LVEDV降低、LVAWd增厚、EF增加(P<0.01或0.05)。GFP组心肌组织呈心肌肥厚、心肌纤维化病理改变,miR-455组较GFP组心肌肥厚、心肌纤维化病理改变明显减轻。GFP组各心肌肥厚基因及心肌纤维化基因mRNA表达均高于假手术组,miR-455组各心肌肥厚基因及心肌纤维化基因mRNA表达均低于GFP组(P<0.01或0.05)。与假手术组相比,GFP组Bax表达增加、Bcl-2表达降低、心肌细胞凋亡指数增高(P<0.01或0.05);与GFP组相比,miR-455组Bax表达降低、Bcl-2表达增加、心肌细胞凋亡指数降低(P<0.01或0.05)。结论 miR-455具有抑制心室重构、改善心功能的作用,可能与其抑制心肌肥厚、心肌纤维化、心肌细胞凋亡有关。