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基因工程链激酶的中试研究 被引量:3
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作者 任军 黄阳滨 +5 位作者 汤其群 吴晓俐 涂宣林 顾银良 朱运松 宋后燕 《药物生物技术》 CAS CSCD 1996年第2期65-68,共4页
链激酶是急性心肌梗塞溶栓治疗的特效药物。我们利用基因工程方法在大肠杆菌中高效表达重组链激酶,用10L发酵罐对工程菌进行高密度、高表达发酵,通过简便的复性和纯化流程,一次能够获得纯度达98%以上、比活性9~10万IU/... 链激酶是急性心肌梗塞溶栓治疗的特效药物。我们利用基因工程方法在大肠杆菌中高效表达重组链激酶,用10L发酵罐对工程菌进行高密度、高表达发酵,通过简便的复性和纯化流程,一次能够获得纯度达98%以上、比活性9~10万IU/mg的r-SK,可分装300~400个剂量静脉注射用r-SK冻干粉制剂。形成了中试规模的批量生产能力。 展开更多
关键词 基因工程 链激酶 中试 心肌梗塞 溶栓疗法
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丁酸钠对杂交瘤细胞增殖及抗体分泌的影响 被引量:2
2
作者 丁皓 吴晓俐 +2 位作者 陈幼妹 朱运松 宋后燕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第6期346-348,共3页
用含不同浓度丁酸钠完全培养液和无血清培养液培养分泌抗组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)单克隆抗体的杂交瘤细胞。当丁酸钠浓度为0.25~0.5 mmol/L时,对杂交瘤细胞分泌抗体能力具有刺激作用,提高抗体效价2~4倍,对细胞生长无抑制作用。表... 用含不同浓度丁酸钠完全培养液和无血清培养液培养分泌抗组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)单克隆抗体的杂交瘤细胞。当丁酸钠浓度为0.25~0.5 mmol/L时,对杂交瘤细胞分泌抗体能力具有刺激作用,提高抗体效价2~4倍,对细胞生长无抑制作用。表明丁酸钠可作为一种添加剂用以提高杂交瘤细胞分泌抗体的能力。 展开更多
关键词 丁酸钠 抗体分泌 杂交瘤 细胞
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抗人尿激酶单克隆抗体制备和鉴定 被引量:3
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作者 丁皓 吴晓俐 +1 位作者 朱运松 宋后燕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期148-150,共3页
用人高分子量尿激酶(HMW-UK)为抗原,通过杂交瘤技术获得了两株阳性杂交瘤细胞(2B8、3A2)。采用葡萄球菌 A 蛋白(SPA)亲和层析或 Water's650快速蛋白分离系统纯化抗 UK 单克隆抗体(McAb).3A2McAb 为 IgG 1亚类,特异地识别 HMW-UK 和... 用人高分子量尿激酶(HMW-UK)为抗原,通过杂交瘤技术获得了两株阳性杂交瘤细胞(2B8、3A2)。采用葡萄球菌 A 蛋白(SPA)亲和层析或 Water's650快速蛋白分离系统纯化抗 UK 单克隆抗体(McAb).3A2McAb 为 IgG 1亚类,特异地识别 HMW-UK 和低分子量 LMW-UK,抑制 UK 活性,表明3A2McAb 所作用的位点为 UK 的 B 链,即活性中心。EIA 测定3A2McAb 与 UK 的亲和常数为8.43×10~8M^(-1)。2B_8McAb 亦为IgG_(?)亚类,特异地识别 HMW-UK 及其氨基端1~135氨基酸片段(ATF),不抑制活性,EIA 测定2B_8McAb 与UK 的亲和常数为2.8×10~9M^(-1)。2B_8McAb 可用于导向溶栓的研究以及 UK 与其受体间反应的研究。 展开更多
关键词 尿激酶 单克隆抗体 尿激酶活性
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测定尿激酶含量夹心法 ELISA 的建立 被引量:1
4
作者 丁皓 吴晓俐 +1 位作者 朱运松 宋后燕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第5期308-310,共3页
采用两种识别不同抗原决定簇的抗尿激酶(UK)单克隆抗体建立了测定人 UK 含量的夹心法ELISA.本法灵敏度为0.15ng/ml,批内 CV4.3%,批间 CV8.7%,平均回收率98%.应用本法测定了部分正常细胞和肿瘤细胞株培养上清中的 UK 含量,肿瘤细胞培养上... 采用两种识别不同抗原决定簇的抗尿激酶(UK)单克隆抗体建立了测定人 UK 含量的夹心法ELISA.本法灵敏度为0.15ng/ml,批内 CV4.3%,批间 CV8.7%,平均回收率98%.应用本法测定了部分正常细胞和肿瘤细胞株培养上清中的 UK 含量,肿瘤细胞培养上清 UK 量明显高于正常细胞.测定82名正常人血浆中 UK 含量,其结果为1.31±0.6ng/ml. 展开更多
关键词 尿激酶 夹心法 ELISA 单克隆抗体
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亲和层析纯化HepG_2细胞分泌的PAI-1 被引量:2
5
作者 丁皓 吴晓俐 +3 位作者 孙幼华 周兴华 朱运松 宋后燕 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第1期34-39,共6页
本文报道用抗PAI-1单克隆抗体(McAb)亲和层析建立了纯化PAI-1的简便方法。经免疫亲和层析,SephacrylS200凝胶过滤,从HepG2细胞培液中分离到糖基化和非糖基化两种形式的PAI-1,回收率为84%... 本文报道用抗PAI-1单克隆抗体(McAb)亲和层析建立了纯化PAI-1的简便方法。经免疫亲和层析,SephacrylS200凝胶过滤,从HepG2细胞培液中分离到糖基化和非糖基化两种形式的PAI-1,回收率为84%,PAI-1比活性6.1×104IU/mg。糖基化PAI-1分子量为50kD,比活性5.8×104IU/mg。非糖基化PAI-1分子量43kD,占总PAI-130%,仍具有PAI-1活性。用ConA-Sepharose亲和层析进一步纯化得到SDS-PAGE纯的糖基化PAI-1。 展开更多
关键词 PAI-1 纤溶酶原 激活剂抑制物
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光纤干涉法监测He-Ne激光器的频率漂移
6
作者 里佐威 韩玉华 +2 位作者 裴力 高淑琴 吴晓俐 《激光技术》 CAS CSCD 1991年第3期142-144,共3页
本文介绍了液芯光纤干涉方法测量He-Ne激光器腔长的微小伸长,频率漂移的原理,实验条件,实验装置及实验结果。
关键词 光纤干涉法 监测 HE-NE激光器 频率
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基因工程链激酶(r-SK)纯化及其单克隆抗体制备和鉴定
7
作者 丁皓 朱运松 +2 位作者 吴晓俐 周兴华 宋后燕 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期56-60,共5页
采用Rotofor等电聚聚焦和分子筛技术纯化大肠杆菌表达的重组链激酶(r-SK),其纯度为97%,比活性1×10^6IU/mg,回收率41%,分析所纯化的r-SK N端氨基酸顺序证实其1-15个氨基酸顺序与SK基... 采用Rotofor等电聚聚焦和分子筛技术纯化大肠杆菌表达的重组链激酶(r-SK),其纯度为97%,比活性1×10^6IU/mg,回收率41%,分析所纯化的r-SK N端氨基酸顺序证实其1-15个氨基酸顺序与SK基因的核苷酸顺充所示3联密码子一致。以纯化r-SK为抗原,通过杂交瘤技术构建了分泌抗r-SK单克隆抗体杂交瘤细胞。该McAb属IgG1亚型。 展开更多
关键词 重组 链激酶 等电聚焦 单克隆抗体
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抗人PAI-1单克隆抗体制备、鉴定和应用
8
作者 丁皓 吴晓俐 +2 位作者 周兴华 朱运松 宋后燕 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期135-141,共7页
以重组PAI-(rPAI-1)为抗原,通过杂交瘤技术获得6株阳性杂交瘤细胞(AP1、AP2、AP3、AP4、AP5和AP6),并用SPA亲和层析纯化了抗PAI-1单克隆抗体(McAb)。所有McAb均能识别rPAI和天然PAI-1,腹水滴度均为10<sup>6</sup>以上... 以重组PAI-(rPAI-1)为抗原,通过杂交瘤技术获得6株阳性杂交瘤细胞(AP1、AP2、AP3、AP4、AP5和AP6),并用SPA亲和层析纯化了抗PAI-1单克隆抗体(McAb)。所有McAb均能识别rPAI和天然PAI-1,腹水滴度均为10<sup>6</sup>以上。6种McAb对PAI-1亲和常数在3.45×10<sup>7</sup>—1.05×10<sup>9</sup>mol/L之间。AP2、AP3 McAb能完全抑制PAI-1活性,AP4、AP和AP6只能部分抑制PAI-1活性,AP1则不抑制PAI-1活性。6种McAb中只有AP1、AP4和AP5能识别PAI-1/t-PA复合物。利用AP1、AP3、和AP4 McAb制备免疫亲和柱一步纯化HepG<sub>2</sub>细胞分泌的PAI-1,纯度大于98%,回收率92%,纯化倍数51倍。利用抗PAI-1 McAb建立了夹心法ELISA,测定了人血浆PAI-1水平,正常人血浆PAI-1平均含量(±D)为24.7±7.75ng/ml。 展开更多
关键词 纤溶酶原 激活剂抑制物 单克隆抗体
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人纤维蛋白降解产物D-双聚体和E片段的纯化和鉴定
9
作者 丁皓 吴晓俐 +1 位作者 朱运松 宋后燕 《上海医科大学学报》 CSCD 1993年第3期177-182,共6页
D-双聚体和E片段均为交联型纤维蛋白的降解产物。根据它们的等电点的不同,建立了等电聚焦法纯化D-双聚体和E片段的方法。纯化的D-双聚体分子量约3.32×10^(-22)kg,含γ-γ双聚体片段(分子量1.36×10^(-22)kg)、β链片段(分子量7... D-双聚体和E片段均为交联型纤维蛋白的降解产物。根据它们的等电点的不同,建立了等电聚焦法纯化D-双聚体和E片段的方法。纯化的D-双聚体分子量约3.32×10^(-22)kg,含γ-γ双聚体片段(分子量1.36×10^(-22)kg)、β链片段(分子量7.30×10^(-23)kg)和α链片段(分子量2.49×10^(-23)kg)。Western Blot结果表明它可被抗D-双聚体单克隆抗体(McAb)识别。纯化的D-双聚体用ELISA检测,证实不含有E片段。纯化的E片段分子量约7.47×10^(-23)kg,还原后形成α链片段(分子量约1.03×10^(-23)kg)、β链片段(分子量6.14×10^(-24)kg)和γ链片段(分子量1.49×10^(-23)kg)3条肽链,可与抗E片段McAb进行免疫学反应。 展开更多
关键词 纤维蛋白 降解产物 双聚体 E片段
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抗人IgG单克隆抗体制备和鉴定
10
作者 丁皓 吴晓俐 +1 位作者 朱运松 宋后燕 《上海医科大学学报》 CSCD 1994年第3期165-169,共5页
以人IgG为抗原,采用杂交瘤技术获得6株不同性质的抗人IgG单克隆抗体(McAb)(AI2、AI3、AI4、AI5、AI6、和AI)。AI2McAb具有抗IgG1亚类的特异性,可识别IgGγ链和F(ab')2片段,作... 以人IgG为抗原,采用杂交瘤技术获得6株不同性质的抗人IgG单克隆抗体(McAb)(AI2、AI3、AI4、AI5、AI6、和AI)。AI2McAb具有抗IgG1亚类的特异性,可识别IgGγ链和F(ab')2片段,作用位点可能在人IgG1铰链区。AI3AI、McAb分别为IgG3、IgG4亚类限制性McAb,可能作用于IgGCH1区。AI4McAb可识别χ和λ型IgG四个亚类以及F(ab')2片段,不识别游离χ、λ链。AI5McAb特异地抗IgG1结合型χ,作用于IgG独特型位点。AI6McAb只抗λ型IgG,可能作用于IgGCL区。6种抗人IgGMcAb除了AI5外,均能用于人血清中IgG的检测。 展开更多
关键词 单克隆抗体 免疫球蛋白G 制备
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光纤干涉法测量液体折射率随温度变化率
11
作者 里佐威 张伟 +2 位作者 裴力 高淑琴 吴晓俐 《激光技术》 EI CAS CSCD 1993年第1期50-52,共3页
待测液体充入空心石英光纤中,构成多模光纤。采用双光纤干涉方法,测量了液体折射率随温度变化率,获得了较高的测量精度。
关键词 液体 温度 折射率 测量 光纤干涉法
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工程力学专业的发展与展望
12
作者 吴晓俐 王保林 荀希敏 《试验技术与试验机》 1994年第5期3-5,共3页
本文以吉林工业大学工程力学专业为例总结了力学专业发展、教学改革的情况,并提出了工程力学专业建设的展望和建议。
关键词 力学 工程力学 发展
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试论高校力学实验教学改革的有关问题 被引量:1
13
作者 吴晓俐 郭洪新 吕世昌 《试验技术与试验机》 1994年第5期79-80,共2页
结合改革实践,就力学实验教学改革问题,阐述了力学实验课的地位、作用和如何加强学生能力的培养。
关键词 高校 力学实验 教学改革
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加强工科院校物理演示实验
14
作者 吴晓俐 高淑琴 叶海峰 《实验技术与管理》 CAS 1991年第1期65-66,62,共3页
物理是理工大学各专业的一门重要的必修基础课,它与各种物质的运动形态联系广泛,又有较强的实践性。因此,物理演示实验就成为物理教学的重要手段。
关键词 物理演示 实验课 高校 物理教学
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利用液芯光纤的Kerr效应对高电压进行测量的实验研究
15
作者 高淑琴 吴晓俐 叶海峰 《激光技术》 CAS CSCD 1991年第1期59-62,共4页
本文描述了利用液芯光纤的Kerr效应对高电压进行测量的实验方法和结果。液芯光纤是由空心石英光纤充入硝基苯构成。
关键词 高电压 测量 光学纤维 KERR效应
全文增补中
研究生课程成绩定量评价与质量分析的计算机实现
16
作者 侯代臣 姜淑芳 吴晓俐 《试验技术与试验机》 1994年第5期14-17,共4页
本文阐述了如何运用计算机对研究生课程成绩进行定量评价与质量分析的具体方法,给出了评价的数学模型和程序框图,为研究生培养质量的综合评价提供了一个定量的指标。
关键词 研究生 成绩定量评价 质量分析 计算机
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保证硕士生论文质量把好论文中期检查关
17
作者 姜淑芳 侯代臣 吴晓俐 《试验技术与试验机》 1996年第3期125-126,共2页
学位论文工作是培养研究生掌握科学研究基本方法,使其具有独立从事科学研究和教学工作能力的重要环节,是提高研究生培养质量的关键。学位论文水平是研究生培养质量的重要标志。作好论文阶段性检查是保证硕士生论文水平的重要措施,阶段... 学位论文工作是培养研究生掌握科学研究基本方法,使其具有独立从事科学研究和教学工作能力的重要环节,是提高研究生培养质量的关键。学位论文水平是研究生培养质量的重要标志。作好论文阶段性检查是保证硕士生论文水平的重要措施,阶段性检查贯穿论文工作的全过程,而中期的全面检查是最重要的一环。 展开更多
关键词 硕士生论文 质量 学位论文
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对加强工科院校物理演示实验的建议
18
作者 高淑琴 吴晓俐 《现代教育科学(高教研究)》 1990年第1期90-90,共1页
物理课是理工科大学各专业的一门重要的必修基础课。物理演示实验对于提高物理课教学质量有着重要意义。通过演示实验可使学生获得感性知识,产生学习物理的兴趣,使物理知识掌握得更扎实,而且培养了学生的积极思维、分析问题和解决问题... 物理课是理工科大学各专业的一门重要的必修基础课。物理演示实验对于提高物理课教学质量有着重要意义。通过演示实验可使学生获得感性知识,产生学习物理的兴趣,使物理知识掌握得更扎实,而且培养了学生的积极思维、分析问题和解决问题的能力。 展开更多
关键词 物理演示实验 物理课 工科院校 必修基础课 感性知识 教学质量 实验建设 教学队伍 工科物理 近代物理
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高中政治综合实践活动体系建构与实施
19
作者 吴晓俐 《高考》 2022年第27期6-8,共3页
高中政治课程是高中教育体系中非常重要的一部分,高中阶段不仅要教会学生知识和技能,同时也要促使学生形成正确的三观和人格的健康发展。尤其是在互联网技术飞速发展的今天,因为网络对于学生可能造成负面影响,就更应该利用好思想政治教... 高中政治课程是高中教育体系中非常重要的一部分,高中阶段不仅要教会学生知识和技能,同时也要促使学生形成正确的三观和人格的健康发展。尤其是在互联网技术飞速发展的今天,因为网络对于学生可能造成负面影响,就更应该利用好思想政治教育的作用,促使学生健康茁壮成长。高中政治课就是思想政治教育的主阵地,高中政治课程如何提高有效性,提升学生的参与度是需要思考的问题。改变一成不变的教育方式,开展综合实践活动课程,有着积极意义。综合实践活动既是思想政治教育的有效载体,又丰富了高中政治课程的形式,并提高了思想政治教育的成效。构建综合实践活动课程体系,应选择合适的综合实践活动项目,构建完善的政治综合实践活动框架,关注学生个人成长,既要渗透思想政治教育,又要加强对综合实践活动的评价与反馈,形成完善的综合实践活动课程体系。 展开更多
关键词 高中政治课程 综合实践活动
原文传递
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