microRNAs在口腔扁平苔藓组织中的表达谱分析及3种miRNA的血清学表达

目的已有研究显示微小RNA(microRNAs,miRNAs)在口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)免疫调节中发挥重要作用,本研究的目的是获得OLP中miRNAs的表达谱,探讨miRNAs在OLP发病过程中可能发挥的作用,及其是否可作为OLP潜在的诊断标志物。方法收集3例病理学确诊的OLP病变组织(测序OLP组)和3例正常口腔黏膜(测序对照组),通过Illumina高通量测序筛选2组中差异表达的miRNAs。选择3个差异倍数大且表达丰度高的miRNAs进行靶基因预测和功能富集分析。纳入30例OLP患者(验证OLP组)和20例健康志愿者(验证对照组),用实时定量PCR(real-time quantitiy PCR,RT-qPCR)检测血清中3种miRNA的表达水平,再将验证OLP组分为糜烂组(20例)和非糜烂组(10例),分析3种miRNA的表达与OLP严重程度的关系。Pearson相关性系数分析三者表达的相关性,ROC曲线分析三者对OLP的诊断价值。结果应用DESeq软件,筛选出2组间差异表达的miRNAs共61个,其中表达上调的23个,下调的38个。利用Miranda数据库预测miR-142-3p、miR-146a-5p和miR-150-5p共同作用的靶基因87个(LIMD1、MOB1B、TEAD1等),GO分析显示这些靶基因与细胞间连接成分、信号传递密切相关,KEGG分析显示这些靶基因在Hippo信号通路上显著富集。与测序结果一致,验证OLP组血清中miR-142-3p、miR-146a-5p和miR-150-5p的表达均高于验证对照组(P<0.05)。将验证OLP组进一步分成糜烂组与非糜烂组,非糜烂组miR-146a-5p、miR-150-5p表达水平均高于验证对照组,差异有统计学意义(P<0.05),2组miR-142-3p的表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05);糜烂组的miR-142-3p、miR-146a-5p和miR-150-5p的表达水平均高于验证对照组(P<0.05);糜烂组与非糜烂组间的3种miRNA的表达水平比较差异均无统计学意义(P>0.05),Pearson分析显示3种miRNA血清表达水平两两之间呈高度正相关(r=0.865、0.822、0.875,P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清miR-142-3p、miR-146a-5p和miR-150-5p独立诊断OLP的ROC曲线下工作面积(area under curve,AUC)分别为0.711、0.818和0.767,三者联合诊断OLP的AUC为0.834。结论OLP和正常口腔黏膜之间存在差异表达的miRNAs,miR-142-3p、miR-146a-5p和miR-150-5p在OLP中均表达上调,且其表达水平与OLP的严重程度存在一定的相关性,miR-142-3p、miR-146a-5p和miR-150-5p可作为OLP的潜在诊断标志物。

应用双向荧光差异凝胶电泳和质谱技术筛选口腔扁平苔藓唾液差异蛋白

目的:应用双向荧光差异凝胶电泳(2-D DIGE)和质谱技术筛选、鉴定与口腔扁平苔藓(OLP)患者唾液有关的差异蛋白。方法:收集3例OLP患者及3例健康人唾液,提取唾液总蛋白采用2-D DIGE技术分离蛋白质,寻找差异蛋白质点应用液相色谱一质谱联用技术(LC-MS)对差异蛋白质点进行质谱鉴定。结果:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示各样品条带清晰,无明显蛋白质丢失,经2-D DIGE分离蛋白质后,蛋白质点重复性较好。OLP患者组和健康对照组唾液差异蛋白质点数平均为(317±71)个,用质谱技术鉴定了重复性较好的4个差异蛋白质点(分泌型IgAl、锌α-2-糖蛋白、唾液淀粉酶、血清白蛋白)在OLP患者唾液中表达量均上调。结论:分泌型IgAl、锌α-2-糖蛋白、唾液淀粉酶、血清白蛋白在OLP患者唾液中高表达可能参与了OLP的发生、发展。

玉米醇溶蛋白制备牙周组织工程支架材料

背景:玉米醇溶蛋白具有独特的溶解特性、耐热性、成膜性、抑菌性和抗氧化性,可用于防潮、隔氧、抗紫外线、防静电,已成为医药和生物技术原料的来源。目的:制备玉米醇溶蛋白支架,探讨该支架应用于牙周组织工程的可行性。方法:溶剂浇铸/粒子沥滤法制备玉米醇溶蛋白多孔支架,扫描电镜观察支架材料断面的形貌结构和孔隙大小,液体置换法测定支架的孔隙率。采用组织块法培养人牙周膜细胞,并以不同浓度的玉米醇溶蛋白支架浸提液培养,用MTT法测定浸提液培养人牙周膜细胞的活力,计算24,48,72h的相对增值率并计算毒性分级。将第3代细胞悬液以3.5×107L-1的密度接种到支架材料上复合培养。结果与结论:玉米醇溶蛋白支架材料的外观呈一定厚度的高孔隙率海绵体结构。通过控制致孔剂粒子的用量和尺寸可控制支架的孔隙率及孔径,支架孔隙率可达64.1%～78.0%,并具有均匀的互相贯通开放的孔墙结构。玉米醇溶蛋白支架浸提液培养的人牙周膜细胞具有良好的活力,支架毒性程度为0～1级,扫描电镜可见人牙周膜细胞在支架上伸展充分,生长旺盛。提示,溶剂浇铸/粒子沥滤法制备的玉米醇溶蛋白支架具有较高的孔隙率和互相贯通的孔墙结构,具有良好的细胞相容性。

牙龈成纤维细胞-玉米醇溶蛋白-中药双黄补复合体对犬牙周组织再生的实验性研究

目的牙周炎是最常见的口腔疾病之一,可导致牙周支持组织的破坏,最终造成牙齿丧失。组织工程技术在牙周组织修复再生中的应用为牙周炎的治疗开辟了新途径。研究旨在探讨牙龈成纤维细胞(gingival fibroblast,GF)-玉米醇溶蛋白(Zein)-中药双黄补复合体促进犬牙周组织修复再生的作用。方法以2只Beagle犬双侧上颌54|45、下颌743|347共20个牙位作为实验部位,将其配对分为4组,每组5个牙位分别制备骨缺损模型。实验Ⅰ组:翻瓣术+Zein支架植入;实验Ⅱ组:翻瓣术+GF-Zein支架植入;实验Ⅲ组:翻瓣术+GF-Zein-中药双黄补复合体植入;对照组:单纯翻瓣术。于术后3个月进行组织学观察、测量及锥形束CT(cone-beam computed tomography,CBCT)检查。结果实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组术后3个月新生牙槽骨高度均高于对照组(P<0.05),其中实验Ⅲ组新骨生成效果更显著(P<0.01);实验Ⅲ组新生牙骨质的测量值比对照组相应值高(P<0.05)。实验Ⅱ组、实验Ⅲ组术区牙槽骨与正常牙槽骨的骨密度差值百分比低于对照组的相应值(P<0.05),实验Ⅰ组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论中药双黄补可促进犬牙周骨缺损的修复,有利于牙周组织的再生。

金黄地鼠颊黏膜癌前病变的组织学及超微结构观察

目的:利用光镜及扫描电镜对金黄地鼠颊黏膜癌前病变进行组织学及超微结构观察。方法:借助DMBA建立金黄地鼠颊黏膜癌前病变动物模型,分别进行光镜、扫描电镜观察。结果:实验组在光镜下均表现为不同程度的异常增生;空白对照组在电镜下表现为细胞外形规则,表面呈蜂窝状。实验组在电镜下表现为细胞外形不规则、重叠松解;癌前病变区附近肉眼观正常黏膜组织,光镜下表现为上皮层单纯增生或角化层增厚,电镜下90%表现为蜂窝状结构大量丧失,细胞外形趋于不规则。结论:扫描电镜在口腔黏膜癌前病变的诊疗中具有广阔的应用前景。

口腔扁平苔藓与NF-κB通路相关因子IL-8和RANTES的关系研究

目的探讨NF-κB信号通路相关细胞因子白细胞介素-8 (IL-8),受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)在口腔扁平苔藓(OLP)患者组和健康对照组中的表达,并分析IL-8、RANTES表达的相关性,探讨在口腔扁平苔藓发生发展过程中NF-κB信号传导通路的作用。方法选取30例OLP患者作为实验组,30例健康者为对照组,取其相应黏膜组织。应用RT-PCR法检测NF-κB相关因子IL-8、RANTES在OLP患者组与健康对照组中的表达,分析患者组与对照组的表达差异及二者表达相关性。结果 RT-PCR结果显示IL-8、RANTES在OLP两组中均有表达,但患者组的表达明显高于正常对照组(P<0.05)。OLP患者组中IL-8与RANTES的表达相关(P<0.05)。结论 OLP的发生发展可能与NF-κB引导的炎症通路及其介导的炎症因子IL-8、 RANTES相关,同时IL-8和RANTES在OLP的发病过程中可能具有协同致病作用。

光动力治疗糜烂型OLP的临床疗效观察

口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)是一种常见的癌前慢性炎症性疾病。据统计,全世界发病率为0.1%~2%[1]。根据其临床特点OLP大致可分为网状/斑块型、红斑/糜烂型和溃疡型[2],其中糜烂型伴有剧烈的疼痛和灼烧感,该类型病变比较顽固且易复发易癌变,病情易迁延不愈,其5年内恶性转化率为0.5%~2.5%[3]。因此对OLP的治疗,尤其是糜烂型OLP的治疗变得尤为迫切。

高通量测序技术筛选口腔扁平苔藓患者组织中microRNAs的差异表达谱及分析

目的:通过高通量测序筛选口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)患者和正常人口腔黏膜组织中差异表达的微小RNA(miRNAs),探讨miRNAs在OLP发病机制中的作用。方法:收集3例就诊于河北医科大学第四医院口腔科的OLP患者病变组织(P组)和3例正常口腔黏膜组织(N组),进行illumina高通量测序,筛选差异表达的miRNAs,利用生物信息学分析对差异最显著的6个miRNA进行靶基因预测和功能富集分析。结果:应用DESeq软件,筛选出两组间差异表达的miRNAs共61个(|log2FoldChange|>1,P<0.05),其中表达上调的23个,下调的38个。选择上调(miR-449c-5p、miR-663b和miR-196a-5p)和下调(miR-133b、miR-1-3p和miR-133a-3p)最显著的miRNA各3个进行靶基因预测,GO分析显示这些靶基因主要富集在细胞膜区域,可能参与了细胞迁移、分化、代谢和分泌调节等生物过程,KEGG分析显示这些靶基因显著富集在MAPK、Rap1、NF-κB、Ras等信号通路上。结论:OLP和正常口腔黏膜之间存在差异表达的miRNA,这些miRNA可通过SEMA3F、HECW1、POLDIP等靶基因作用于MAPK、NF-κB、Rap1等通路,参与OLP的发生发展。

COX-2和Ki67与口腔扁平苔藓糜烂及癌变的关系

目的探讨口腔扁平苔藓临床病理特征与COX-2、Ki67的相关性。方法选取79例口腔扁平苔藓组织样本,其中包括17例糜烂型口腔扁平苔藓(EOLP)以及62例非糜烂型口腔扁平苔藓(NEOLP),31例口腔鳞状细胞癌组织(oral squamous cell carcinoma,OSCC)以及作为阴性对照的18例正常口腔黏膜组织(normal oral mucosa,NOM)。采用组织芯片技术进行实验,并对制作的切片检测COX-2、Ki67的表达。结果NOM与NEOLP的COX-2、Ki67的表达无统计学差异(P>0.05),EOLP中COX-2、Ki67的表达均高于NEOLP且有统计学意义(P<0.05),但低于OSCC中的表达(P<0.05)。Spearman分析显示,COX-2、Ki67的阳性表达具有相关性(P<0.01)。在OLP中,COX-2、Ki67的表达与该病患者的性别、年龄以及OLP的发病部位在统计学上没有差异(P>0.05),但在糜烂组与非糜烂组之间存在明显差异(P<0.05)。结论在NOM、NEOLP、EOLP、OSCC中COX-2、Ki67的阳性表达率逐渐升高,且COX-2、Ki67的表达呈正相关,EOLP、OSCC中COX-2、Ki67明显高于NOM与NEOLP组,推测两者可能参与了OLP的糜烂和癌变过程。

中药双黄补对人牙周膜细胞在玉米醇溶蛋白支架材料上黏附生长及增殖的影响

目的研究中药双黄补对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,HPDLCs)在玉米醇溶蛋白(Zein)支架材料上黏附生长及增殖的影响,探讨双黄补-Zein作为一种复合支架材料应用于牙周组织工程的可行性。方法采用组织块法体外培养HPDLCs,水提醇沉法制备双黄补煎液,溶剂浇铸/粒子沥滤法制备Zein支架,制备Zein支架浸提液并用其配制50、100、150、200、500、1000μg/mL浓度的双黄补培养液。分别设不同浓度双黄补组、Zein支架浸提液组及细胞对照组。MTT法检测各组对HPDLCs增殖的影响;根据MTT检测结果,选取最佳浓度(100μg/mL)双黄补作为实验组,10%FBS的DMEM培养液作为对照组,倒置相差显微镜及扫描电镜观察双黄补对HPDLCs在Zein支架材料上细胞形态的影响。结果与Zein支架浸提液组及细胞对照组比较,不同浓度双黄补均能促进HPDLCs的增殖,且以100μg/mL浓度的双黄补促增殖作用最明显(P<0·01);Zein支架浸提液组与细胞对照组比较差异无统计学意义(P>0·05),但其细胞增殖率为正值;形态学观察结果显示HPDLCs在Zein支架上生长良好,且在双黄补作用下Zein支架上的HPDLCs数目较多,形态较好。结论双黄补能促进HPDLCs在Zein支架上的黏附生长及增殖。双黄补-Zein作为一种复合支架材料应用于牙周组织工程具有可行性。

颅内静脉窦血栓形成患者短期转归不良因素分析

目的 探讨影响颅内静脉窦血栓形成（CVST）短期转归不良的危险因素。方法 回顾性分析55例CVST患者的临床资料，随访1个月采用改良Rankin量表（mRS）进行转归评价。单因素采用χ2检验、多因素采用Logtistic回归分析法分析影响CVST短期转归的不良因素。结果 55例患者中转归良好42例（mRS≤2分），转归不良13例（mRS＞2分）。单因素分析显示，癫痫、局灶性神经功能障碍、脑出血是CVST短期转归不良的危险因素；多因素分析显示，癫痫（P=0.028）、局灶性神经功能障碍（P=0.002）、脑出血（P=0.007）是CVST短期转归不良的独立危险因素。结论 癫痫、局灶性神经功能障碍、脑出血是CVST患者短期转归不良的独立危险因素。

光动力疗法在慢性牙周炎治疗中的应用研究

慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)是最常见的牙周病,是除龋病之外的常见的口腔疾病,是造成成年人牙齿缺失的主要原因。CP的治疗主要是通过机械清创(超声波和手动器械)以及局部或全身使用抗生素来减少微生物,但频繁使用抗生素易产生耐药性,部分患者甚至产生过敏等不良反应,因此需要更安全、低毒、无创的替代疗法。光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)利用光敏剂特异性结合到细菌细胞壁等膜系统,在有氧条件下,在特定波长的光照下,光敏剂被激活,把能量传递给氧,产生一些氧化活性物质(reactive oxygen species,ROS),破坏细菌脂质膜、蛋白质、核酸等细胞结构,达到杀灭细菌的目的。利用这一特性,PDT作为一种替代抗菌疗法开始被应用于CP的治疗,笔者对其在CP中的应用研究作一综述。

想你

想你 晴天的日子里 仰望着蔚蓝的天空 总是不自觉想起你看我时明媚的双眸 想你 雨天的日子里 轻嗅着清新泥土的芬芳 总是不自觉浮现出你我在雨中嬉闹时幸福的模样 终究懂得 耗尽今生的泪水 也无法唤回你温暖的笑容

血清CD147水平与短暂性脑缺血发作早期临床转归的相关性研究

目的探讨血清CD147水平与短暂性脑缺血发作(TIA)早期临床转归的相关性。方法选取2017-2017年10月于徐州医科大学附属医院神经内科住院的135例TIA患者,根据ABCD3评分将TIA患者分为低危组(45例)冲危组(69例)、高危组(21例)。利用ELISA法检测血清CD147水平记录。记录自患者住院日起第2天、第7天、第30天、第90天临床转归情况。比较低、中、高危组患者血清CD147水平及脑梗死发生率,并比较阳性事件组与阴性事件组患者血清CD147水平。结果低、中、高危组患者血清CD147水平的差异有统计学意义(P<0.05),随着TIA患者风险等级的升高,其血清CD147水平也随之增加。阳性事件组血清CD147为(8.65±2.02)μg/L,显著高于阴性事件组〔(5.73±1.82)μg/L〕(P<0.05)。高危组患者脑梗死发生率最高,中危组次之,低危组最低。结论血清CD147水平与TIA危险分级及TIA后脑梗死发生率有关。

55例颅内静脉窦血栓形成的临床及影像学分析

目的探讨颅内静脉窦血栓形成(CVST)的临床及影像学特点。方法回顾性分析55例CVST患者的临床及影像学资料。结果本组研究结果显示,CVST病因复杂,临床表现多样,大部分以头痛为首发症状,主要通过CT、MRI、磁共振静脉成像(MRV)及DSA等影像学检查进行确诊。经过病因、抗栓等对症治疗后,1例痊愈,53例好转,1例死亡,总有效率为98.18%。结论CVST的诊断应综合考虑患者的病史资料及辅助检查,积极的抗凝及对症治疗有助于改善预后。

以“蛛网膜下腔出血”首诊的颅内静脉系统血栓形成1例并文献复习

颅内静脉系统血栓形成（cerebral venous sinus thrombosis,CVST）,多急性或亚急性起病,是相对少见的脑血管病,约占脑血管病的0.5%~1.0%[1,2],伴有蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage,SAH）和皮质出血及Todd瘫痪的则更为罕见。经检索中国知网、万方数据库、Pub Med等数据库,多数文献报道仅0.5%~0.8%CVST患者合并SAH[3,4],

中药双黄补对人牙龈成纤维细胞损伤的保护作用

目的:观察中药双黄补对人牙龈成纤维细胞由机械划痕损伤、内毒素脂多糖(LPS)损伤所致的保护作用。方法:采用组织块法体外培养人牙龈成纤维细胞。水提醇沉法制备双黄补提取液。采用四甲基偶氮唑蓝法测定培养细胞增殖活性的变化。建立体外细胞划痕创伤模型,加入双黄补培养24 h观察细胞迁移。绘制生长曲线观察双黄补对LPS介导的成纤维细胞增殖能力的影响。结果:与对照组相比,中药双黄补作用于人牙龈细胞后,能明显促进细胞的增殖,加快细胞的移动速度,改善由LPS介导的细胞损伤后的增殖能力。结论:中药双黄补能促进人牙龈成纤维细胞的增殖,对人牙龈成纤维细胞由机械划痕损伤、LPS损伤具有较好的保护作用。

伴表皮生长因子受体基因突变的肺腺癌转移至口腔两例

肺癌是临床最常见的原发性恶性肿瘤之一,常伴淋巴结、骨、脑、肝、肾上腺及消化道等部位的转移。临床上由肺癌转移至口腔且均为表皮生长因子受体突变的病例并不多见。本文回顾报道2例以牙龈肿物为首发症状就诊于河北医科大学第四医院·河北省肿瘤医院口腔科的患者,总结分析2例患者的诊疗过程,并对其临床表现、病理诊断与治疗进行讨论。