蛋白激酶G在调节血管通透性信号转导中的进展

蛋白激酶G(PKG)在微血管通透性升高的细胞内信号转导中是一个重要的信号分子 ,其组成的Ca2 + NO cGMP PKG级联反应在微血管通透性的调节中起重要作用。PKG的作用底物有血管扩张剂刺激的磷蛋白(VASP)、热休克蛋白 2 7(HSP2 7)

蛋白激酶G介导烧伤休克后内皮细胞骨架的变化

目的 :探讨蛋白激酶G(PKG)在烧伤休克发病机制中的作用。方法 :用 10 %人烧伤血清刺激培养的内皮细胞后 ,通过细胞裂解和离心获得细胞裂解液 ,用放射性同位素法测定PKG的活性。同时采用特异性荧光染色法检测细胞内肌动蛋白微丝 (F -actin)的结构和分布变化。用PKG特异性抑制剂KT5 82 3预处理细胞后 ,再检测烧伤血清介导的细胞内PKG活性和F -actin的变化。以空白组为阴性对照 ,以PKG激动剂 8-Br -cGMP刺激细胞作为阳性对照组。结果 :人烧伤血清和PKG的激动剂 8-Br -cGMP都可以时间依赖性地激活内皮细胞的PKG ,并且诱导细胞内F -actin呈极性分布。KT5 82 3预处理则明显抑制了这种变化。结论 :烧伤血清可以介导血管内皮细胞PKG的激活和F -actin的应力性变化 ;烧伤休克时的血管通透性升高与PKG的活性变化密切正相关 。

蛋白激酶对内毒素休克后内皮细胞骨架的作用

目的 探讨内毒素休克发病机制中蛋白激酶G(PKG)的作用。 方法 用脂多糖 (LPS)刺激培养的内皮细胞 ,通过细胞裂解和离心获得细胞裂解液 ,用放射性同位素法标记法检测PKG的活性。同时采用特异性荧光染色法检测LPS刺激后细胞内肌动蛋白微丝 (F actin)的结构和分布变化。用PKG特异性抑制剂KT5 82 3预处理细胞后 ,再检测LPS介导的细胞内PKG活性和F actin的变化。以空白组为阴性对照 ,以PKG激动剂 8 Br cGMP刺激细胞作为阳性对照组。 结果 LPS分别刺激 5、10、30和 6 0min后细胞内PKG活力呈时间依赖性的增高 (与空白组相比P <0 .0 1) ,细胞内的F actin出现极性分布 ;而KT5 82 3预刺激 2 0min后再用LPS刺激没有出现上述变化。PKG的激动剂 8 Br cGMP刺激细胞后的变化与LPS的刺激相似。 结论 LPS可以介导血管内皮细胞PKG的激活和F actin的应力性变化 ;内毒素休克后内皮细胞通透性增高与cGMP PKG通路的激活有关。