松油烯-4-醇改善自噬流障碍对高糖诱导的VSMCs炎性损伤的保护作用

目的基于改善自噬流障碍,研究松油烯-4-醇(terpinen-4-ol,T4O)对高糖诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)炎性损伤的作用及涉及的分子信号。方法采用划痕实验分析VSMCs迁移能力,ELISA法检测细胞培养上清液IL-1β、IL-6的水平;Western blot检测炎症相关分子NF-κB p65、p-NF-κB p65、IL-1β、IL-18及自噬相关信号p62、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、p-Beclin1的蛋白表达。结果T4O可抑制高糖诱导的VSMCs迁移,减少促炎因子IL-1β、IL-6的分泌与释放,抑制p-NF-κB p65/NF-κB p65、IL-1β、IL-18的蛋白表达,同时下调p62、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及p-Beclin1的表达水平。采用自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)干预VSMCs自噬通量后,T4O预处理可明显抑制CQ介导的上述炎症因子及自噬相关信号的蛋白表达水平。结论T4O通过改善自噬流障碍,抑制高糖诱导的VSMCs炎性损伤。

不同产地滇黄精高效液相色谱法指纹图谱的建立及其多糖含量测定

目的探讨不同产地滇黄精高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱的建立及其多糖含量的测定。方法取贵州(剑河、安顺、天柱、铜仁、赤水、贵阳及纳雍)、广西百色及四川内江来源的9个批次滇黄精药材各1 g制备供试品溶液,采用DiKMA Platisll ODS C_(18)色谱柱(流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液、梯度洗脱,流速1 mL/min,柱温35℃,进样量20μL,检测波长203 nm)建立滇黄精HPLC指纹图谱,并采用相似度评价、主成分分析及聚类分析等方法评价不同产地滇黄精的质量;采用蒽酮-硫酸法测定各批次滇黄精的多糖含量。结果建立了9批滇黄精的HPLC指纹图谱,共确认12个共有峰;9批不同产地的滇黄精多糖含量均大于7%,含量顺序为贵州剑河>贵州安顺>贵州天柱>贵州铜仁>贵州赤水>贵州贵阳>贵州纳雍>广西百色>四川内江;相似度结果显示,四川内江、贵州贵阳及广西百色的相似度分别为0.762、0.809及0.846,贵州其余地区滇黄精的相似度≥0.853;主成分分析结果显示共得到3个主成分因子,聚类分析结果表明滇黄精被分为3类,且滇黄精多糖含量≥7.16%。结论本研究建立的滇黄精HPLC指纹图谱及黄精多糖成分含量的测定方法简便可行,准确可靠。

艳山姜挥发油提取工艺优选及化学成分GC-MS分析

目的:优选艳山姜挥发油的最佳提取工艺,分析其挥发油化学成分。方法:以挥发油提取率为指标,以浸泡时间、料液比、提取时间为考察因素进行正交试验,确定艳山姜挥发油的提取工艺条件;采用气质联用仪(GC-MS)考察不同提取时间对挥发油化学成分的影响。结果:正交试验和方差分析结果表明,最佳提取工艺条件为浸泡1 h,料液比1∶12,提取时间7 h;从1、5及7 h提取时间的挥发油中分离出了107个化合物,鉴定了70个化合物,有部分成分含量差异大;所鉴定的化合物相对含量占各自挥发油总量的92.909%、95.001%及87.020%。结论:在优选的提取工艺条件下,挥发油提取率较高;艳山姜不同提取时间挥发油的成分种类无变化,但部分成分含量差异大。

大蝎子草干、鲜品水提物的抗炎镇痛作用实验研究

目的:研究大蝎子草干、鲜品水提物的抗炎及镇痛作用。方法:取健康昆明种小鼠随机分为模型组(蒸馏水),阳性对照组(阿司匹林,0.3 g/kg),大蝎子草干品水提物高、中、低剂量组及大蝎子草鲜品水提物高、中、低剂量组共8组;采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀及皮肤毛细血管通透性实验,评价大蝎子草干、鲜品水提物的抗炎作用;采用醋酸致小鼠扭体反应与小鼠热板致痛实验动物模型评价其镇痛作用。结果:与模型组比较,大蝎子草干、鲜品水提物均能显著减轻小鼠耳廓肿胀度(P<0.01),提高小鼠的痛阈值(P<0.01)及减少醋酸致小鼠扭体反应的次数(P<0.01),大蝎子草鲜品水提物还能明显抑制二甲苯致小鼠皮肤毛细血管通透性(P<0.01,P<0.05),且大蝎子草鲜品水提物抗炎、镇痛效果优于干品水提物。结论:大蝎子草干、鲜品水提物均具有抗炎及镇痛作用,且大蝎子草鲜品水提物作用优于大蝎子草干品水提物。

酢浆草的UPLC指纹图谱研究

酢浆草(Oxalis corniculata)为酢浆草科植物,资源分布广泛,全草均可入药。该研究为建立酢浆草超高效液相色谱指纹图谱,采用乙腈-0.05%醋酸水溶液梯度洗脱,以Agilent ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,流速0.3 mL·min^(-1),进样量为10μL,检测波长280 nm,柱温25℃等色谱条件,研究了15个不同产地30批酢浆草药材的指纹图谱。结果表明:确立了24个共有峰,相似度评价软件计算30批样品的相似度为0.839~0.987;应用聚类分析对各样品指纹图谱的共有峰峰面积统计分析得出,除贵州剑河、贵州印江及贵州天柱8月3批样品外,其余27批样品共有化学成分的含量较为接近。该研究结果表明建立的酢浆草UPLC指纹图谱方法简便、迅速、可靠,较其HPLC指纹图谱有更高的灵敏度和分辨率,极大地缩短了检测时间,可用于酢浆草质量评价的快速分析。

酢浆草遗传多样性的ISSR分析

目的探讨酢浆草种质资源遗传多样性,为酢浆草遗传差异的评定及优良种质资源的筛选提供分子水平的参考依据。方法采用简单序列重复区间(ISSR)分子标记技术对酢浆草18个居群36个样本及红花酢浆草2个居群4个样本进行遗传多样性分析。结果从59条ISSR引物中筛选出10条引物用于PCR扩增,共扩增出89条DNA条带,其中多态性条带78条,占87.64%,平均每个引物扩增条带的数目为8.9条。利用POPGENE1.32和NTSYS-pc软件分析得出40个样本的平均有效等位基因数为1.3888,平均Nei's基因多样性指数为0.3493,平均Shannon信息指数为0.2252;UPGMA聚类结果,在遗传相似性系数0.6558处把供试的40个样本分为4大类。结论本研究选用的酢浆草样本遗传多样性比较丰富,酢浆草与红花酢浆草的ISSR遗传多样性差异较明显。

艳山姜果实的生药学及气相色谱研究

艳山姜为姜科山姜属植物,艳山姜(Alpinia zerumbet)的干燥成熟果实,是贵州少数民族地区的传统习用药物,艳山姜在贵州省的种植面积已超过130 hm^2,是贵州"南药"的第一大宗产品,也是治理石漠化的重要经济植物,其自然资源非常丰富,亦是民间常用的香料植物资源。该研究采用性状、显微及理化鉴定方法,对艳山姜果实进行了系统的生药学研究,并对α-蒎烯、莰烯、β-蒎烯及1,8-桉叶油醇四个主要心血管药理活性成分进行含量分析。结果表明:艳山姜果实性状鉴别特征为果皮见12~20条纵棱隆起,顶端具花被残基突起,种子团由白色隔膜分为3瓣,每瓣具种子8~20粒不等,较易散落。显微鉴别特征为:种子横切面具1~2列油细胞,外胚乳细胞含淀粉粒,并可见细小草酸钙方晶;果实粉末可见螺纹导管、草酸钙方晶、淀粉粒、石细胞等。气相色谱法测得艳山姜果实挥发油中α-蒎烯、莰烯、β-蒎烯及1,8-桉叶油醇的平均含量分别为4.292%、3.966%、9.703%、27.171%。该研究的性状、显微鉴别方法准确、简单、易行,可作为艳山姜药材的鉴别依据;气相色谱含量测定方法重现性好,测定结果精确可靠,可用于艳山姜果实挥发油的含量测定。该研究结果为艳山姜药材的鉴定及进一步开发利用提供科学参考。

雷公连的显微鉴别

目的:为鉴别和进一步研究开发雷公连提供参考依据。方法:用常规的显微技术观察组织构造和显微特征。结果:雷公连茎横切面皮层有小型外韧型叶迹维管束,并含金黄色油状物和草酸钙针晶束;中柱维管束外韧型较大,含大型导管1～2个。维管束略成3～4环,最外环维管束鞘纤维发达,几连成环并木化,内环维管束鞘纤维帽状;叶横切面有7个呈辐射状排列的外韧型维管束,上下表皮均见厚角组织;粉末中含有淀粉粒、草酸钙针晶、环式气孔、导管、棕色块。结论:以上显微特征可作为雷公连的生药鉴别依据。

苗药头花蓼及其易混品的紫外谱线组法鉴别研究

目的:建立苗药头花蓼与其易混淆品头状蓼的紫外光谱鉴别方法。方法:利用不同极性的溶剂对苗药头花蓼进行提取,制备5种溶剂提取液并进行紫外光谱扫描,采用紫外谱线组的吸收峰数及峰位置对其结构特征进行分析鉴别。结果:苗药头花蓼与头状蓼的紫外谱线组的最大吸收峰数及峰位置有差异。结论:该法简便、准确、灵敏,可为苗药头花蓼和头状蓼鉴别提供参考。

闪式提取法用于大蝎子草总黄酮的工艺条件研究

目的探索有效的大蝎子草总黄酮提取方法。方法比较回流提取、闪式提取两种方法,及水和乙醇分别作为溶剂提取大蝎子草总黄酮的效果,并采用正交试验设计,对闪式提取大蝎子草总黄酮工艺条件进行优化。结果闪式提取大蝎子草总黄酮最佳工艺为蒸馏水温度60℃,料液比1∶75,提取时间为4 min,闪提转速4 000 r/min,提取率为9.093 mg/g,优于乙醇为溶剂的回流提取法。结论闪式提取法操作简便、高效经济,与回流提取法相比,采用闪式提取法并用热水作溶剂提取大蝎子草总黄酮取得较好效果。

苦楝子挥发油化学成分分析

[目的]分析苦楝子挥发油的化学成分。[方法]采用水蒸汽蒸馏法提取苦楝子挥发油,用气相色谱(GC)毛细管柱进行分析,归一化法测定其相对含量,并用气相色谱-质谱(GC-MS)法鉴定化学成分。[结果]检出72个色谱峰,鉴定出61个化合物,占挥发油总成分的97.76%。[结论]苦楝子挥发油中,己酸、亚油酸、棕榈酸、油酸是其主要成分,其中己酸占总挥发油量的19.560%。

不同高分子材料及有机溶剂体系对阿司匹林缓释微球的影响

目的:采用乳化溶剂挥发法,考察不同种类高分子材料对阿司匹林(Asp)缓释微球(MS)包封率及载药量的影响。方法:采用不同溶剂体系制备Asp缓释MS,通过激光粒度分析仪、扫描电子显微镜(SEM)、差示扫描热分析(DSC)、X射线衍射法(XRD)、核磁共振分析(NMR)、红外光谱分析(FT-IR)及体外释药性能等方法考察不同溶剂体系对MS药剂学性能的影响。结果:以高分子材料聚乙二醇-聚(乳酸-羟基乙酸)嵌段共聚物(PEG-PLGA)制备所得MS具有较高载药量和包封率,溶剂体系二氯甲烷(DCM)∶乙酸乙酯(EA)为1∶1、DCM∶丙酮(ACE)为3∶1,前者制备所得MS载药量约为后者的2倍,包封率分别为(126.26±1.74)%及(97.77±2.83)%,平均粒径分别为(142.4±3.25)μm及(100.9±2.52)μm,SEM观察2种溶剂制备所得MS的表面均光滑圆整;DSC及XRD分析结果表明,2种溶剂制备所得MS并不是药物和载体材料的简单物理混合,所述药物可能以无定形状态分散在载体材料中;NMR及FT-IR研究发现,Asp并未与PEG-PLGA发生结合,2种溶剂制备所得MS的结构一致;2种溶剂制备所得MS体外累计释放95%分别需要168 h及120 h。结论:采用PEG-PLGA成功制备了具有较高载药量和包封率的Asp缓释MS,不同溶剂体系的影响为制备不同要求的MS提供了一定的参考价值。

大蝎子草地上部分化学成分研究

目的:研究大蝎子草地上部分的化学成分。方法:采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶层析及MCI柱层析及结晶、重结晶方法分离纯化大蝎子草地上部分化合物,并运用波谱及化学方法对所分得的化合物进行结构鉴定。结果:从大蝎子草地上部分分离纯化得到5个化合物,经波谱解析鉴定为尿嘧啶、儿茶酚、5-硝基愈创木酚、β-谷甾醇及草酸,除化合物β-谷甾醇外均为首次从大蝎子草地上部分分离得到。结论:大蝎子草地上部分成分有尿嘧啶、儿茶酚、5-硝基愈创木酚、β-谷甾醇及草酸。

黔产威灵仙类药材植物资源调查

[目的]调查黔产威灵仙类药材植物资源分布状况。[方法]产地调查、标本采集、分类鉴定与文献查阅相结合。[结果]贵州省有3个科的5种植物根及根茎以"威灵仙"之名入药,列出了黔产威灵仙类药材的分布、生境及药用情况,同时制定了植物检索表。[结论]有助于黔产威灵仙类药材的资源利用和深入研究。

阿司匹林磷脂复合物脂微球的制备及评价

目的:制备阿司匹林磷脂复合物脂微球(ASP-PC-LM),并评价其性质。方法:采用高速剪切法制备初乳,高压均质法对初乳进行二次乳化,以离心稳定常数(Ke)及平均粒径为考察指标,单因素试验考察处方和制备工艺,并对其外观、粒径、Zeta电位及包封率进行考察。结果:ASP-PC-LM最佳处方和工艺是橄榄油与辛癸酸甘油酯(MCT)以1∶1配比(15%),油酸(0.3%)、大豆磷脂(1.2%)于70℃混合作为油相,Kolliphor HS 15(2.0%)同温度下溶解于注射用水作为水相,油水两相在70℃下混合,10 000 r/min高速剪切5 min,然后在110 MPa高压均质3次,所得ASP-PC-LM外观呈圆形,平均粒径为(180.2±12.8)nm,Zeta电位为(-41.23±1.53)mV,包封率为(81.03±0.797)%,Ke为32.93±0.08。结论:最佳工艺制备ASP-PC-LM的粒径适宜、包封率高,工艺稳定性好。

苗药芭蕉根的研究进展

芭蕉根为苗族习用药材,资源丰富,但从目前的研究报道来看,对其开发利用的程度较低。本文对芭蕉根的本草学考证、植物形态、鉴别、化学成分、含量测定、药理作用和临床应用等进行综合介绍,为以后该药材的进一步开发和利用提供参考。

苗药头花蓼药材的植物资源分布及品种情况研究

目的:调查研究苗药头花蓼药材的植物资源分布状况、生境、药用及品种情况,以期为头花蓼药材植物资源的开发利用与保护提供重要的科学依据。方法:标本查询、查阅文献及实地调查相结合。结果:通过调查研究,较为全面的整理出苗药头花蓼药材在全国主产区各市县的植物资源分布情况,并发现苗药头花蓼药材在贵州省一些低海拔地区有分布;发现存在苗药头花蓼药材的同名异物及混淆品现象。结论:有助于苗药头花蓼药材的资源利用和深入研究。

天胡荽的化学成分研究

目的:研究天胡荽的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶色谱MCI柱色谱及结晶、重结晶的方法进行分离纯化天胡荽各成,并运用波谱方法对所分得的化合物进行结构鉴定。结果:从天胡荽中分得了8个化合物,分别鉴定为槲皮素(quercetin)、芹菜素(apigenin)、山奈酚(kaempferol)、β-谷甾醇(β-sitosterol)、菠甾醇(α-spinasterol)、牡荆苷(vitexin)、异牡荆苷(isovitexin)以及胡萝卜苷(β-daucosterol)。结论:化合物5~7为首次从天胡荽中分离得到。

艳山姜叶化学成分的研究

目的研究艳山姜Alpinia zerumbet(Pers.) Burtt.et Smith叶的化学成分。方法艳山姜叶95%乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI及HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到10个化合物,分别鉴定为caryophyllene oxide(1)、α-tocopherol(2)、cassipourol(3)、2′,3′-dihydroxy propylpentadecanoate(4)、trans-cinnamic acid(5)、indole-3-aldehyde(6)、5,7-methoxyflavanone(7)、alpinetin(8)、dihydroflavokawin B(9)、2′-hydroxy-4′,6′-dimethoxychalcone(10)。结论化合物1~7为首次从该植物中分离得到。

UPLC-MS/MS法同时测定痹痛宁胶囊中4种生物碱

目的建立UPLC-MS/MS法同时测定痹痛宁胶囊(马钱子粉、全蝎、僵蚕等)中4种生物碱的含量。方法该药物甲醇-水-浓盐酸(50∶50∶1)提取液的分析采用ACQUITY UPLC^■ BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相水(含0.1%甲酸)-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温40℃。采用电喷雾离子源,正离子扫描模式。结果士的宁、马钱子碱、盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱分别在0.05066~0.6586 mg/L(r=0.9998)、0.03158~0.4106 mg/L(r=0.9997)、0.009266~0.1483 mg/L(r=0.9999)、0.009620~0.1539 mg/L(r=0.9999)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为99.6%、101.0%、100.2%、100.7%,RSD分别为1.3%、1.6%、1.6%、1.4%。结论该方法简便、准确、可靠,可用于痹痛宁胶囊的质量控制。