白藜芦醇抑制人肝微粒体代谢色氨酸的研究

目的研究白藜芦醇对人肝微粒体代谢色氨酸生成犬尿氨酸的影响。方法分别考察孵育时间、色氨酸浓度、微粒体蛋白浓度,建立体外人肝微粒体孵育色氨酸代谢体系;采用高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测肝微粒体孵育体系中色氨酸和犬尿氨酸浓度。基于体外人肝微粒体孵育色氨酸代谢体系探讨白藜芦醇对色氨酸代谢影响。结果色氨酸在体外人肝微粒体中最佳孵育时间为90 min,色氨酸浓度为8 mg·L^(-1),微粒体蛋白浓度为1 g·L^(-1);酶反应速率常数K m为(95.91±22.29)μmol·L^(-1),最大反应速率V max为(21.34±2.58)μmoL·g^(-1)·min^(-1)。与已知的吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)抑制剂Epacadostat相比,结果显示白藜芦醇也能够抑制人肝微粒体中色氨酸代谢生成犬尿氨酸且具有浓度依赖性。结论白藜芦醇具有抑制IDO活性的作用,表明IDO可能是白藜芦醇发挥药理作用的一个潜在靶点,为进一步研究白藜芦醇的药理作用及色氨酸代谢提供重要依据。

吸烟导致的芳香烃受体抑制因子基因低甲基化与冠心病患者死亡风险的相关性

目的通过检测冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者芳香烃受体抑制因子(aryl-hydrocarbon receptor repressor,AHRR)(cg05575921)甲基化水平,探究AHRR基因甲基化水平与吸烟、冠心病患者心血管危险因素及死亡之间的关系。方法于2010至2013年在广东省人民医院心内科入选冠心病患者,172例死亡患者作为死亡组,209例非死亡患者作为对照组。建立焦磷酸测序法检测AHRR(cg05575921)的甲基化水平,验证吸烟与AHRR(cg05575921)甲基化水平的关系,采用线性回归分析对AHRR(cg05575921)甲基化与心肌酶、血脂和心功能的相关性进行分析,采用Logistic回归分析对AHRR(cg05575921)甲基化水平与冠心病患者全因性死亡的相关性进行分析。结果吸烟患者AHRR(cg05575921)甲基化水平显著低于戒烟患者和不吸烟患者,差异有统计学意义(P<0.0001);戒烟患者AHRR(cg05575921)甲基化水平低于不吸烟患者,差异有统计学意义(P=0.0027)。AHRR(cg05575921)甲基化水平与心肌损伤标志物[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肌酸激酶同工酶(CKMB)、乳酸脱氢酶(LDH)和α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)]和左心室收缩末期内径(left ventricular end-systolicdiameter,LVESD)呈显著负相关(P<0.005),与左心室射血分数呈显著正相关(P<0.005)。死亡患者AHRR(cg05575921)甲基化水平显著低于非死亡患者(0.6963±0.0088 vs.0.7224±0.0081,P=0.0064)。校正潜在混杂因素之后,AHRR(cg05575921)甲基化水平与死亡呈显著的负相关(OR=0.046,95%CI:0.0028~0.48965,P=0.0441)。结论吸烟导致AHRR(cg05575921)低甲基化,可能引起冠心病患者的心肌损伤指标升高并且影响心功能,从而增加冠心病患者死亡风险。

泽泻多糖对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的研究泽泻多糖对四氯化碳(CCl4)所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法分别取昆明小鼠60只,雌雄各半,随机分为6组,分别为正常组和模型组(灌胃给予蒸馏水),联苯双酯组(200 mg/kg),泽泻多糖低、中、高剂量组(300,600,1200 mg/kg),小鼠均ig给药,每天1次,连续7 d,末次给药2 h后,除正常组外,其他各组均ip CCl_4造成急性肝损伤。给药后测定小鼠肝脏系数和脾脏系数,测定CCl_4肝损伤小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆红素(T-BIL),超氧化物歧化酶(SOD)活性,测定肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,苏木素-伊红(HE)染色观察肝损伤组织病理切片。结果与正常组比较,模型组CCl4肝损伤小鼠血清中AST,ALT,TBIL活性明显升高,而SOD活性明显降低(P<0.01);肝脏组织中SOD活性明显降低(P<0.01),MDA含量明显升高(P<0.01),模型组病理学观察肝损伤均较为明显。与模型组比较,泽泻多糖中、高剂量能够明显降低AST,ALT,T-BIL活性,同时明显升高SOD活性(P<0.05,P<0.01);并能明显够升高肝组织中SOD活性和明显降低MDA含量(P<0.05),病理检查结果显示泽泻多糖具有明显的保肝作用。结论泽泻多糖多小鼠CCl4肝损伤有良好的保护作用。

基于网络药理学对连花清瘟中君药治疗COVID-19的分子机制探析

目的本研究通过对连花清瘟两味君药连翘和金银花进行网络药理分析,明确其在该方剂中治疗COVID-19的地位,探究其靶点及信号通路,阐明其作用机制。方法通过中药系统药理数据库和分析平台和Genecards数据库分别对连翘和金银花进行有效成分分析和COVID-19潜在靶基因的筛选。运用STRING数据库构建PPI网络和Cytoscape软件构建活性成分-靶点网络,通过DAVID数据库对靶点进行功能和通路富集分析。结果两味君药有效活性成分共42个,总活性成分靶基因242个,其中52个是COVID-19的潜在治疗靶标,与整个方剂靶基因库高度重合。富集到基因功能主要涉及生物过程。通路包含炎症反应,外源性凋亡信号通路,细胞对脂多糖的反应和肿瘤坏死因子信号通路等。结论连翘和金银花是连花清瘟发挥治疗作用的关键药物,主要通过酮类和植物甾醇类活性成分调节关键靶点,调控炎症反应、细胞凋亡、介导免疫反应等过程减轻肺损伤来治疗COVID-19,同时也提示以其为基础的其他相关中药方剂的开发有望成为COVID-19治疗的关键。