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甘蔗花叶病毒四川分离物的鉴定和遗传变异分析 被引量:2
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作者 李明骏 钟源 +2 位作者 廖豪杰 吴根土 青玲 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期45-53,共9页
玉米和甘蔗是西南地区两种重要的禾本科农作物,而病毒病的常年发生严重威胁着玉米和甘蔗的生产.从四川攀枝花田间采集表现花叶、褪绿、斑驳或矮化等病毒病症状的玉米样品54份和甘蔗样品42份,用小RNA深度测序结合反转录聚合酶链式反应进... 玉米和甘蔗是西南地区两种重要的禾本科农作物,而病毒病的常年发生严重威胁着玉米和甘蔗的生产.从四川攀枝花田间采集表现花叶、褪绿、斑驳或矮化等病毒病症状的玉米样品54份和甘蔗样品42份,用小RNA深度测序结合反转录聚合酶链式反应进行病毒检测,以明确引起该地区玉米和甘蔗病毒病的病原.结果显示:从玉米病株上检测到甘蔗花叶病毒(sugarcane mosaic virus,SCMV)、玉米黄花叶病毒(maize yellow mosaic virus,MaYMV)和留尼旺玉米线条病毒(maize streak Reunion virus,MSRV),3种病毒的检出率分别为66.7%,59.3%和3.7%;从甘蔗病样中检测到SCMV(52.4%)、甘蔗瓜德罗普杆状病毒A(sugarcane bacilliform Guadeloupe A virus,SCBGAV)(76.2%)和高粱花叶病毒(sorghum mosaic virus,SrMV)(28.6%).鉴于SCMV在玉米和甘蔗田间样品中的高检出率,利用其外壳蛋白基因对SCMV四川分离物的遗传变异进行综合分析.系统发育分析表明:120个SCMV中国分离物被分为5组,且其进化分组表现出宿主和地理起源的相关性,来源于玉米的SCMV四川分离物主要被聚入C组,而来源于甘蔗的SCMV四川分离物被聚入E组.核苷酸多样性分析表明:来源于玉米和甘蔗的SCMV四川分离物群体间变异度较高.FST测试表明:四川和云南两地SCMV群体间存在频繁基因流,且群体统计分析结果显示SCMV四川和云南分离物群体存在潜在的扩张趋势.该研究是对四川玉米和甘蔗上病毒病原的综合鉴定,也是对SCMV四川分离物遗传变异情况的首次报道,为SCMV病毒病的防控提供了重要参考依据. 展开更多
关键词 甘蔗花叶病毒 玉米 甘蔗 病毒检测 遗传变异
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裸仁美洲南瓜ISSR-PCR反应体系的正交优化 被引量:8
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作者 吴根土 师桂英 +3 位作者 徐秉良 薛应钰 梁巧兰 田谷 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期155-159,共5页
利用正交试验设计L16(44)对美洲南瓜ISSR-PCR反应体系的4因素(Mg2+,dNTPs,引物,Taq酶)在4个水平上进行优化试验,PCR结果用SPSS16.0统计软件分析,结果表明,各因素的不同水平对PCR反应结果都有显著影响,其中引物浓度的影响最大;本研究还... 利用正交试验设计L16(44)对美洲南瓜ISSR-PCR反应体系的4因素(Mg2+,dNTPs,引物,Taq酶)在4个水平上进行优化试验,PCR结果用SPSS16.0统计软件分析,结果表明,各因素的不同水平对PCR反应结果都有显著影响,其中引物浓度的影响最大;本研究还筛选出各反应因素的最佳水平,建立美洲南瓜IS-SR-PCR反应的最佳体系(25μL)为:0.75 U Taq酶,2.0 mmol.L-1Mg2+,300μmol.L-1dNTPs,10μmol.L-1引物和DNA模板30 ng,2.5μL 10×buffer。 展开更多
关键词 美洲南瓜 ISSR 正交设计 体系优化
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不同栽植时间和地点的香樟行道树根际土壤微生物及土壤肥力的研究
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作者 周冰颖 刘霞 +6 位作者 黄普鑫 杨晓龙 赵海舟 李杰 先旭东 青玲 吴根土 《植物医学》 2023年第5期41-50,共10页
以重庆市九龙坡区和缙云山不同栽植时间和地点的香樟树作为试验对象,通过涂布平板、土壤化学性质测定等方法分析香樟树根际土壤微生物数量、土壤化学性质差异,并对土壤综合肥力进行评价.结果表明,香樟树根际土壤微生物中细菌数量最多,... 以重庆市九龙坡区和缙云山不同栽植时间和地点的香樟树作为试验对象,通过涂布平板、土壤化学性质测定等方法分析香樟树根际土壤微生物数量、土壤化学性质差异,并对土壤综合肥力进行评价.结果表明,香樟树根际土壤微生物中细菌数量最多,细菌与放线菌的数量随着栽培年限的增加逐渐减少;重庆市九龙坡区香樟行道树土壤呈碱性状态,pH值为8.11~8.13,有机质含量偏低;而缙云山香樟树根际土壤呈碱性,pH值范围在5.2~6.46,其中缙云山-20有机质含量最高.各项指标分析显示重庆市九龙坡区和缙云山香樟树土壤肥力及土壤肥力均处于一般水平,九龙坡区行道树土壤肥力低于缙云山土壤肥力.研究结果通过比较不同地点香樟树的土壤环境,为城市行道树的种植和养护提供科学依据. 展开更多
关键词 香樟树 根际微生物 土壤化学性质 土壤肥力
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新形势下农业植物病理学课程教学改革探讨 被引量:3
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作者 吴根土 窦彦霞 +4 位作者 杨水英 李明骏 刘翠平 毕朝位 青玲 《安徽农业科学》 CAS 2020年第22期262-265,共4页
农业植物病理学是一门理论性和实践性很强的植物保护专业核心课程。长期以来,广大教师们一直在探索着如何提高教学质量,如何更好地培养学生的专业素质和实践操作能力。为提高该课程的教学质量并满足新形势下农业教育的要求,针对西南大... 农业植物病理学是一门理论性和实践性很强的植物保护专业核心课程。长期以来,广大教师们一直在探索着如何提高教学质量,如何更好地培养学生的专业素质和实践操作能力。为提高该课程的教学质量并满足新形势下农业教育的要求,针对西南大学农业植物病理学课程的教学状况,剖析了教学过程中存在的问题,并提出了相应的教学改革措施与方法,包括更新教学内容、推荐参考文献、建设教学团队、优化教学方法与手段,丰富实践内容和完善考核体系等,以期提高农业植物病理学课程的教学质量,培养满足现代农业需求的人才。 展开更多
关键词 农业植物病理学 农业教育 教学目标 教学改革
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甘肃省大丽花病毒病病原鉴定及病生理研究 被引量:1
5
作者 吴根土 徐秉良 +1 位作者 梁巧兰 徐琼 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期70-73,共4页
经对受病毒感染的甘肃省临洮县大丽花进行间接ELISA和鉴别寄主测定,结果表明黄瓜花叶病毒(CMV)是其病原之一。田间调查表明大丽花病毒病在甘肃临洮县发生普遍,发病率达36%;其主要症状有花叶、卷叶花叶、蕨叶和矮缩。不同大丽花品种之间... 经对受病毒感染的甘肃省临洮县大丽花进行间接ELISA和鉴别寄主测定,结果表明黄瓜花叶病毒(CMV)是其病原之一。田间调查表明大丽花病毒病在甘肃临洮县发生普遍,发病率达36%;其主要症状有花叶、卷叶花叶、蕨叶和矮缩。不同大丽花品种之间病毒病发病率有一定的差异,在调查的8个品种中‘鹦嘴红’发病率最低,只有7.43%,而‘洮阳荷花’发病率最高,达到42.47%。大丽花感染病毒后叶绿素(a+b)比正常的下降了23.61%;在叶片组织病变观察中,发现叶片感染病毒后叶绿体内的淀粉颗粒含量增多且肿大,油粒增多,几乎占满整个叶绿体结构。 展开更多
关键词 大丽花 病毒病 ELISA检测 组织病变
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番茄SYTA的克隆及表达分析 被引量:7
6
作者 潘琪 刘旭旭 +6 位作者 彭浩然 蒲运丹 张永至 叶思涵 吴根土 青玲 孙现超 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第15期2936-2945,共10页
【目的】克隆获得番茄 SYTA (Solanum lycopersicum SYTA,S.l SYTA),分析其基因序列生物信息学特征和预测蛋白的结构特征,明确S.l SYTA亚细胞定位和组织表达,并分析其在绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)标记的烟草花叶病... 【目的】克隆获得番茄 SYTA (Solanum lycopersicum SYTA,S.l SYTA),分析其基因序列生物信息学特征和预测蛋白的结构特征,明确S.l SYTA亚细胞定位和组织表达,并分析其在绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)标记的烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)侵染下的表达变化及其对TMV移动的影响,为明确S.l SYTA在植物病毒侵染致病过程中的作用提供理论依据。【方法】根据番茄基因组含有的SYTA同源基因序列,利用Primer Premier 5.0软件设计克隆引物,采用RT-PCR技术克隆S.l SYTA全长序列;应用生物信息学方法分析该基因的序列特征;使用MEGA 7.0对S.l SYTA蛋白序列及其同源序列进行多序列比对,并构建同源物种间系统进化树;通过与GFP蛋白融合进行亚细胞定位;利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测番茄各部位S.l SYTA的表达量以及在TMV胁迫的番茄中S.l SYTA的表达变化;构建植物瞬时表达载体p CV-SYTA-m GFP,通过农杆菌介导在本氏烟草中瞬时表达,TMV-GFP攻毒,利用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测在本氏烟中瞬时表达S.l SYTA时TMV-GFP的积累和移动情况。【结果】克隆得到1 620 bp的S.l SYTA基因开放阅读框全长,序列比对及生物信息学分析表明,其编码的氨基酸序列具有SYTs家族的典型特征,含有N端的跨膜区、胞间连接区和C端的两个C2结构域;多序列对比及系统进化树分析发现,与茄科林生烟草、绒毛状烟草等植物亲缘关系较近,与黄瓜较远;亚细胞定位显示S.l SYTA定位于细胞质膜。在番茄的根、茎和叶中S.l SYTA的表达量从高到低依次为根>叶>茎;TMV-GFP侵染番茄导致其S.l SYTA表达量在接种后第1天显著上调,在第7天降至正常水平。在S.l SYTA瞬时表达的本氏烟叶片部位接种TMV-GFP,TMV-GFP在接种第5天时已经到达新叶,而接种部位仅表达空载体对照的本氏烟新叶中未观察到TMV-GFP,且接种第5天时TMV-GFP在接种叶和新叶中的积累量均明显高于其在空载体对照处理的叶片。【结论】获得的S.l SYTA具有SYTs家族的典型特征。S.l SYTA定位于细胞质膜,S.l SYTA在番茄根中表达量最高。在TMV-GFP胁迫下,番茄中S.l SYTA表达呈现先上升后下降至正常水平。在本氏烟中瞬时表达S.l SYTA有利于TMV-GFP侵染初期的积累和移动。 展开更多
关键词 番茄 S.l SYTA 克隆 表达分析 TMV-GFP
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番茄抗性相关基因SlHin1的克隆、表达与抗病毒功能 被引量:5
7
作者 彭浩然 潘琪 +5 位作者 魏周玲 蒲运丹 张永至 吴根土 青玲 孙现超 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1242-1251,共10页
【目的】克隆番茄抗性相关基因Sl Hin1(harpin-induced gene 1),分析其生物信息学特征、组织表达和亚细胞定位情况,研究其在抗烟草花叶病毒侵染、移动中的作用,为番茄抗性育种提供理论依据。【方法】通过RT-PCR及基因克隆方法,从番茄总... 【目的】克隆番茄抗性相关基因Sl Hin1(harpin-induced gene 1),分析其生物信息学特征、组织表达和亚细胞定位情况,研究其在抗烟草花叶病毒侵染、移动中的作用,为番茄抗性育种提供理论依据。【方法】通过RT-PCR及基因克隆方法,从番茄总RNA中克隆得到基因SlHin1;应用生物信息学方法分析其DNA序列及其编码的蛋白序列特性,使用MEGA6.0对SlHIN1氨基酸序列及其同源序列进行多序列比对,并构建同源物种间系统进化树;将该基因片段通过Sal Ⅰ和Bam HI双酶切连接至荧光表达载体pCV-m GFP-C1,采用GFP标记的方法进行亚细胞定位检测,分析编码蛋白表达位置;利用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)分析该基因在番茄不同组织的表达量水平;将该基因片段通过Nco Ⅰ和Bam HI通过双酶切连接至植物表达载体pFGC5941,用土壤农杆菌EHA105瞬时过表达该基因并接种标记有绿色荧光的烟草花叶病毒侵染性克隆,以检测植株对病毒的抗性变化,间接ELISA法检测病毒的含量,探究该基因的抗病毒功能。Western blot验证SlHIN1蛋白在本氏烟内的表达情况。【结果】利用RT-PCR方法从番茄材料(Solanum lycopersicon cv.Ailsa Craig)的叶片组织中克隆得到全长为675 bp的番茄抗性相关基因Sl Hin1,将序列分别提交至Gen Bank,得到序列号KU195820。序列比对及生物信息学分析表明,其基因预测编码225个氨基酸,分子量为26.1 k D,理论等电点为9.35,结构上具有LEA-14保守结构域,不具有跨膜区段,并且位于番茄基因组10号染色体上(Solyc10g081980);多序列比对及进化树分析表明,该基因编码的蛋白与茄科植物HIN1氨基酸同源性80.0%以上而与水稻、高粱单子叶植物的亲缘关系较远;亚细胞定位显示定位在细胞膜上与PSORT Prediction预测的亚细胞定位最高概率一致;qRT-PCR结果分析表明该基因具有组织特异性,表达量在根、叶、茎间依次降低;在本氏烟中瞬时过表达SlHIN1并在表达部位接种标记有绿色荧光的烟草花叶病毒侵染性克隆,处理组本氏烟在接种病毒4 d后没有任何荧光出现,而对照组出现绿色荧光。随着接种时间推移,接种7 d后处理组叶片上零星荧光有略微的扩大,而对照组的绿色荧光已经扩散至心叶。间接ELISA检测病毒含量较对照组少,处理组的病毒扩散受到抑制。Western blot分析结果表明,显色后的硝酸纤维素膜上约在26 k D处有一特异条带,而空载体的对照无相应条带,说明SlHIN1蛋白在注射部位成功表达。【结论】Hin1在供试科植物中均存在,其中SlHin1定位在细胞膜,过表达该基因可抑制病毒扩散,推测其可能参与茄科植物对烟草花叶病毒的抗性反应,使植株获得抗性。 展开更多
关键词 番茄 SlHin1 烟草花叶病毒 表达 抗病毒
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几种化学物质诱导彩色马蹄莲对软腐病抗性的研究 被引量:6
8
作者 田谷 徐秉良 +2 位作者 梁巧兰 徐琼 吴根土 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期53-57,共5页
本试验测定了纳米硅、草酸、硅酸钠和硫酸亚铁4种化学物质在不同浓度下对彩色马蹄莲软腐病菌的室内抑菌活性和诱导抗病效果。结果表明,硫酸亚铁3种浓度对彩色马蹄莲软腐病菌均表现较强的抑制作用;1 g/L纳米硅、0.15 g/L草酸和0.2 g/L硅... 本试验测定了纳米硅、草酸、硅酸钠和硫酸亚铁4种化学物质在不同浓度下对彩色马蹄莲软腐病菌的室内抑菌活性和诱导抗病效果。结果表明,硫酸亚铁3种浓度对彩色马蹄莲软腐病菌均表现较强的抑制作用;1 g/L纳米硅、0.15 g/L草酸和0.2 g/L硅酸钠3种化学物质对软腐病菌无明显抑制作用且诱导抗病效果较好,分别达到62.28%、77.56%、88.46%;经3种化学物质诱导处理后再进行接种,诱导处理和接种期间彩色马蹄莲叶片组织内过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)酶活性均高于对照,其中硅酸钠处理后彩色马蹄莲叶片组织内POD、PAL活性高于纳米硅和草酸处理,草酸处理后叶片组织内PPO活性高于纳米硅和硅酸钠处理。 展开更多
关键词 彩色马蹄莲 细菌性软腐病菌 诱导抗病性
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核糖体失活蛋白(α-MC)亚细胞定位及对TMV的抑制作用 被引量:4
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作者 魏周玲 彭浩然 +5 位作者 潘琪 张永至 蒲运丹 吴根土 青玲 孙现超 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期840-848,共9页
【目的】克隆获得苦瓜α-MC、商陆PAP,在烟草中异源表达观察两个蛋白在细胞中的定位情况。研究α-MC对烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的抑制作用及其引起的抗性防御反应。【方法】根据已报道的商陆抗病毒蛋白PAP基因全序列和... 【目的】克隆获得苦瓜α-MC、商陆PAP,在烟草中异源表达观察两个蛋白在细胞中的定位情况。研究α-MC对烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的抑制作用及其引起的抗性防御反应。【方法】根据已报道的商陆抗病毒蛋白PAP基因全序列和苦瓜素基因全序列,设计并合成扩增PAP和α-MC基因全长引物,通过RT-PCR及基因克隆方法,从苦瓜和商陆春叶克隆得到苦瓜α-MC、商陆PAP;用Wolf PSORT预测蛋白定位,将苦瓜α-MC、商陆PAP分别融合在GFP和Ds Red2的N端,构建融合蛋白表达载体,采用GFP和Ds Red2标记进行亚细胞定位,验证预测结果;通过农杆菌介导在本氏烟中瞬时表达α-MC,再接种烟草花叶病毒,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量PCR(q RT-PCR)分别检测病毒在接种叶片的蛋白积累量和RNA表达量,分析瞬时表达α-MC的抗病毒效果。利用q RT-PCR分析植物防卫相关基因NPR1、PR1、PR2的表达,探究其抗病毒机理。【结果】克隆得到基因α-MC和PAP全长,分别为861和939 bp。Wolf PSORT预测显示α-MC和PAP主要定位于细胞质膜上。共聚焦荧光显微镜下观察发现,分别用GFP和Ds Red2标记的α-MC和PAP均定位在本氏烟叶片表皮细胞质膜上,与Wolf PSORT预测的α-MC和PAP定位结果相一致。异源表达的PAP对植物细胞毒性作用强,导致表达部位细胞坏死,异源表达α-MC的植物细胞无明显毒性,表达部位细胞完整。在本氏烟中异源表达α-MC后,再接种TMV-GFP,在紫外灯下观察发现α-MC处理后的本氏烟在接种TMV-GFP 48 h后没有出现绿色荧光,而对照组出现荧光。72 h后处理组出现零星荧光,但对照组的绿色荧光开始扩散,连续观察,处理组几乎没有变化,接种TMV-GFP 6 d后,发现处理组的绿色荧光几乎没有扩大的趋势,而对照组的绿色荧光已扩散至心叶;ELISA检测表明,在接种TMV-GFP 6 d后的叶片中,对照组与健康植物的OD492比值几乎已达到处理组的10倍以上;q RT-PCR检测TMV RNA的含量,结果显示对照组TMV RNA表达量是处理组的149倍左右,表明α-MC对TMV复制和移动均有明显抑制;q RT-PCR结果分析显示,NPR1在只注射TMV、单独表达α-MC以及表达α-MC后注射TMV的本氏烟中均被诱导表达,但后者的表达量是前两个处理的约2.5倍左右,在只接种α-MC和表达α-MC后注射TMV的本氏烟中均检测到PR1、PR2,但后者的表达量显著高出前者5—7倍,表明异源表达α-MC可诱导植物中防卫相关基因NPR1、PR1、PR2的表达,从而引起更强的防御反应。【结论】异源表达α-MC显著抑制TMV,能够激活植物防卫反应,且对植物细胞无明显毒性。研究结果为利用异源表达α-MC方法开发控制植物病毒新产品提供了参考依据。 展开更多
关键词 核糖体失活蛋白 α-MC 烟草花叶病毒 异源表达 亚细胞定位 防卫相关基因
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甜橙和柚中CTV强弱毒株系p20的遗传变异 被引量:1
10
作者 王亚飞 阮涛 +5 位作者 周彦 王雪峰 吴根土 孙现超 周常勇 青玲 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1343-1350,共8页
【目的】对7个柑橘衰退病毒(CTV)株系进行遗传变异研究,明确寄主甜橙和柚中CTV强弱毒株系p20的变异水平。【方法】运用RT-PCR、克隆及测序等技术建立CTV p20种群,并借助MEGA6构建单倍型系统发育树,运用软件DNAStar对两种寄主中CTV强弱... 【目的】对7个柑橘衰退病毒(CTV)株系进行遗传变异研究,明确寄主甜橙和柚中CTV强弱毒株系p20的变异水平。【方法】运用RT-PCR、克隆及测序等技术建立CTV p20种群,并借助MEGA6构建单倍型系统发育树,运用软件DNAStar对两种寄主中CTV强弱毒种群的遗传结构、变异水平进行分析,运用DnaSP软件对各种群进行单倍型多样性、核苷酸多样性分析和中性检验分析。【结果】构建了7个CTV p20种群,由162条序列构成,包含11个单倍型,单个种群有1个或更多单倍型出现。序列分析发现,来自不同种群的单倍型对应的原始核苷酸序列一致性为88.2%—100.0%,对应的氨基酸序列的一致性为92.3%—100.0%,最低的氨基酸序列一致性发生在CT23-1和CT9-2之间;其中单倍型PeraIAC-4、CT22和CT9-1共有50条序列,对应的原始核苷酸序列一致性为100.0%,属优势单倍型,与标准株系T36亲缘关系较近;单倍型多样性最丰富的是甜橙种群PeraIAC,单倍型多样性为0.800,而单倍型多样性最低的是柚种群CT22,单倍型多样性为0.170;相比柚种群的单倍型多样性(0.170—0.552)和核苷酸多样性(0.00032—0.05919),甜橙种群具有更为丰富的单倍型多样性(0.513—0.800)和核苷酸多样性(0.04208—0.05677)。系统发育树分析表明,来自甜橙的分离株种群结构复杂,甜橙种群中检测到的单倍型与标准株系T30、T36、VT和T3均有相关性;与标准株系T3相距很近的CT31-2与优势单倍型在系统发育树上距离最远,对应的原始核苷酸序列一致性仅为88.3%。中性检验结果表明,CTV甜橙种群趋于平衡或收缩状态,而CTV柚种群除CT23外则趋于扩张状态;其中TR-514Y、CT31和CT23种群的Tajima’s D值、Fu和Li’s D*值以及Fu和Li’s F*值均为正值且达到显著水平,而CT9种群的Tajima’s D值、Fu和Li’s D*值以及Fu和Li’s F*值均为负值且达到显著水平。运用DnaSP软件对各种群进行重组分析表明,在各种群中均未检测到重组事件发生。种群变异分析发现,各种群突变克隆百分比在0—30.8%,碱基突变频率在0—7.706×10^(-4),其中CTV甜橙强毒种群有最高的突变克隆百分比(30.8%),最高的碱基突变频率(7.706×10^(-4)),最多的碱基突变数量(11个)和最多的突变位点(7个);CTV甜橙弱毒种群的突变克隆百分比和碱基突变频率均明显低于甜橙强毒种群,CTV柚弱毒种群的突变克隆百分比和碱基突变频率略低于柚强毒种群。碱基突变类型分析发现碱基突变以碱基替代为主,其中A→G突变为优势类型,仅在柚强毒种群CT3的156和157位点间检测到一个碱基插入突变类型,为碱基A插入,未检测到碱基缺失突变类型。【结论】在寄主甜橙和柚中CTV强弱毒p20种群结构及变异存在差异,CTV甜橙种群有着更复杂的种群结构和更高的种群变异水平,且CTV强毒种群变异更大。 展开更多
关键词 柑橘衰退病毒 p20 种群 遗传变异
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氮基气氛在连续式气体渗碳和碳氮共渗炉上的应用 被引量:1
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作者 张永飞 王国梁 +1 位作者 吴根土 王乃 《金属热处理》 CAS CSCD 北大核心 1996年第9期37-39,共3页
在热处理车间技术改造中我公司建造了一条推杆式连续渗碳和碳氮共渗生产自动线,采用氮基气氛对自行车飞轮等零件进行渗碳和碳氮共渗。自动线由贯通式渗碳炉、淬火槽、后清洗机。
关键词 化学热处理 共渗炉 氮基气氛
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重庆辣椒上烟草轻型绿花叶病毒的分子检测及全基因组克隆分析 被引量:1
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作者 吴根土 徐霞 +4 位作者 陈思敏 孙淼 楚成茹 李明骏 青玲 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1-7,共7页
辣椒是重庆重要的经济作物,烟草轻型绿花叶病毒(Tobacco mild green mosaic virus, TMGMV)引起的病毒病对辣椒生产造成了严重影响.为明确TMGMV在重庆辣椒上的发生、分布情况及其基因组特征,从重庆北碚、石柱、潼南和九龙坡4个区县采集2... 辣椒是重庆重要的经济作物,烟草轻型绿花叶病毒(Tobacco mild green mosaic virus, TMGMV)引起的病毒病对辣椒生产造成了严重影响.为明确TMGMV在重庆辣椒上的发生、分布情况及其基因组特征,从重庆北碚、石柱、潼南和九龙坡4个区县采集29份疑似病毒病样品进行了RT-PCR鉴定,通过分段扩增测序的方法拼接获得病毒基因组全序列并进行了系统进化分析.检测结果表明:29份样品中有9份检测到TMGMV,检出率为31.03%,其中石柱县的检出率最高,为60.00%.序列分析发现,重庆辣椒分离物TMGMV-TN29基因组全序列具有烟草花叶病毒属(Tobamovirus)病毒典型基因组结构特征,由6 356 nt构成.系统进化分析得出,该分离物与TMGMV厦门分离物Xiamen (JX534224)具有较近的亲缘关系,核苷酸序列相似性达到99.75%. 展开更多
关键词 辣椒 烟草轻型绿花叶病毒 RT-PCR检测 全序列 系统进化分析
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转水稻条纹病毒NS3本氏烟的抗病性 被引量:1
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作者 吴根土 陈广香 +5 位作者 张珈源 胡桥 马明鸽 窦彦霞 李明骏 青玲 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1710-1720,共11页
【目的】NS3编码的蛋白是水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)RNA沉默抑制子。笔者前期研究发现,转NS3本氏烟(Nicotiana benthamiana)对RSV有一定的抗性。为深入揭示NS3在寄主体内的作用机制,本文将进一步探究转NS3本氏烟对其他烟草病... 【目的】NS3编码的蛋白是水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)RNA沉默抑制子。笔者前期研究发现,转NS3本氏烟(Nicotiana benthamiana)对RSV有一定的抗性。为深入揭示NS3在寄主体内的作用机制,本文将进一步探究转NS3本氏烟对其他烟草病害的抗性。【方法】以野生型本氏烟和转NS3本氏烟为试验材料,通过农杆菌浸润法接种马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)侵染性克隆,观察病毒症状,抽提系统发病叶片总RNA,并利用RT-qPCR方法检测病毒的相对积累量;采用灌根接种法分别接种烟草青枯病菌(Ralstonia solanacearum)、烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var. nicotianae),观察植株表型并统计发病率和病情指数。【结果】PVX侵染本氏烟后,植株叶片主要表现为花叶、褪绿等症状,NS3表达植株与野生型植株具有相同的PVX症状表现。在接种PVX 10 d后,RT-qPCR检测发现与野生型植株病毒积累量相比,NS3表达抑制了PVX在本氏烟体内的积累水平,两个转NS3株系(NS3-6、NS3-9)中PVX的相对积累量分别为野生型植株的68.17%和81.01%。青枯病菌在野生型植株和转基因植株上均引起萎蔫、猝倒等典型的病害症状,且两者的症状无明显差异。在青枯病菌侵染早期,NS3表达在一定程度上利于病菌的侵染,表现出对青枯病较为敏感;而在接种14 d,野生型植株的发病率为100.00%,病情指数为78.67,而NS3-6、NS3-9株系的发病率分别为95.00%、98.33%,病情指数分别为70.00、73.00;14 d之后发病率和病情指数逐渐升高,而NS3表达株系的病情指数均低于野生型植株。黑胫病菌在野生型植株和转基因植株上均为在茎基部出现黑褐色坏死斑等典型病害症状,且NS3表达也不影响本氏烟的症状表现。在黑胫病菌的侵染初期,NS3-6株系的发病率高于野生型植株;但在整个黑胫病发生过程中,转NS3株系的病情指数均低于野生型植株,在接种12 d,野生型本氏烟的发病率为96.67%,病情指数为77.50,而NS3-6、NS3-9株系的发病率分别为90.00%、86.67%,病情指数分别为64.17、62.08。【结论】通过病原侵染过程观察表明NS3表达在一定程度上影响了烟草病害在本氏烟上的侵染和严重程度,且对不同病原菌的影响不同。 展开更多
关键词 水稻条纹病毒 NS3 转基因本氏烟 抗病性
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党的三代领袖论教育方针
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作者 杨天平 吴根土 《河南职业技术师范学院学报(职业教育版)》 2002年第5期11-12,共2页
文章结合毛泽东、邓小平、江泽民等党的三代领导集体关于教育方针的典型表述,揭示了建国以来我国教育方针从学校教育方针到教育总方针概念的运动轨迹和变化历程,反映了我国教育发展的趋势和规律.
关键词 党的三代领袖 学校教育方针 教育总方针
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农业植物病理学实践教学模式改革探析 被引量:7
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作者 吴根土 窦彦霞 +2 位作者 毕朝位 孙现超 青玲 《现代农业科技》 2018年第10期282-283,共2页
农业植物病理学是植物保护专业的核心课程,室内实验及生产实习是整个课程实践教学的重要组成部分。为提高该课程的实践教学质量,从理论结合实际出发,结合教学目标和实践目的,对农业植物病理学的实践教学内容、形式及师资队伍建设等进行... 农业植物病理学是植物保护专业的核心课程,室内实验及生产实习是整个课程实践教学的重要组成部分。为提高该课程的实践教学质量,从理论结合实际出发,结合教学目标和实践目的,对农业植物病理学的实践教学内容、形式及师资队伍建设等进行改革探讨。本文分析了当前课程实践教学部分存在的一些问题,提出了相应的改革措施,以期为今后完善教学提供参考,从而培养符合社会需求的专业人才。 展开更多
关键词 农业植物病理学 实践教学 问题 改革措施
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用氧探头控制金属网带式淬火炉碳势的试验 被引量:1
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作者 王中玉 常保良 +2 位作者 张增歧 徐中福 吴根土 《金属热处理》 CAS CSCD 北大核心 1990年第7期16-19,共4页
本文探讨了利用氧探头控制网带式连续炉中滴注式气氛碳势的可行性。研究了甲醇、乙醇量与碳势、氧势之间的关系。用于GCr15钢制轴承零件的光亮淬火和08F、10钢制零件C-N共渗处理,在生产中获得了满意的效果。
关键词 碳势 氧势 氧探头 热处理 淬火炉
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减少钢中夹杂物的若干方法 被引量:1
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作者 吴根土 《浙江冶金》 2003年第4期17-22,共6页
参考了近年发表的30多篇文章,按铁水预处理、钢水精炼、中间包冶金和连铸等工艺过程,简述降低钢中夹杂物和生产纯净钢的实践和研究成果。
关键词 纯净钢 夹杂物 铁水 钢水 脱磷 脱氧 脱硫 炼钢
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泡沫渣行为研究 被引量:1
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作者 吴根土 《浙江冶金》 2001年第3期9-10,共2页
德国人 Matja■juhart 等用实验室装置和图像分析法研究了炼钢泡沫渣的行为。借助图像分析可以连续观察和计算泡沫渣的形成过程。介绍了熔渣成分尤其 MgO 含量对泡沫渣行为的影响。
关键词 炼钢 泡沫渣 渣成分 氧化镁 图像分析
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支持学生自主探究的策略
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作者 吴根土 《中学教研(数学版)》 2006年第2期2-5,共4页
新课改将初中数学课堂教学模式从传统的“复习引入——讲授新知——巩固提高”转变为“创设问题情境——探究问题解决——建构反思提高”,使学生初步体验到数学是一个充满着观察、实验、归纳和猜想的探索过程.反映在教材上,新教材更... 新课改将初中数学课堂教学模式从传统的“复习引入——讲授新知——巩固提高”转变为“创设问题情境——探究问题解决——建构反思提高”,使学生初步体验到数学是一个充满着观察、实验、归纳和猜想的探索过程.反映在教材上,新教材更注重学生自主探究的问题设计.无论是北师大版、华师大版,还是浙教版的教材。基本上都采用了先给出一幅或几幅图画创设情景,接着提出问题,示例学生进行实验、操作等探究活动,使学生在从事数学问题解决的实践过程中,建构数学知识。体验数学思想方法,掌握数学技能技巧.然而,如何将教材的设计意图有效地转化数学课堂教学活动,教师要透过“形式”,不要为情景而设计情景;在支持学生探究方面,切忌照本宣科、不讲策略.笔者认为耍把“情景”变为“情境”。营造出问题情境,诱发学生思考,引导、定向、驱动支持学生探究,从而提高课堂教学效率.下面是笔者在教学实践尝试中的一些想法与感受. 展开更多
关键词 自主探究 问题情境 问题解决 初中 数学教学 教学模式 数学思想方法 教学效率 问题设计
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用平面几何图形分析法解题
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作者 吴根土 《中学教研(数学版)》 1986年第2期44-44,共1页
1985年北京市中学生数学竞赛初二年级试题中有这样一道试题:'象棋比赛中,每个选手都与其他选手恰好比赛一局,每局赢者记2分,输者记0分;如果平局,两个选手每人各记一分.今有四个同学统计比赛中全部选手得分总数,分别是1979、1980、1... 1985年北京市中学生数学竞赛初二年级试题中有这样一道试题:'象棋比赛中,每个选手都与其他选手恰好比赛一局,每局赢者记2分,输者记0分;如果平局,两个选手每人各记一分.今有四个同学统计比赛中全部选手得分总数,分别是1979、1980、1984、1985.经核实确有一位同学统计无误,试计算这次比赛中共有多少名选手参加?” 展开更多
关键词 数学竞赛 图形分析 初二学生 连续自然数 竞赛题 专武 计算公式 末位数
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