狂犬病暴露后预防性单克隆抗体药物研究进展

简要介绍狂犬病的流行现状、发病机制、狂犬病病毒G蛋白中和抗原位点及其单克隆抗体的中和机制。重点介绍目前全球已上市或处于研发阶段的多种狂犬病病毒单克隆抗体药物的筛选发现技术、识别位点、作用方式以及体内外病毒中和效果,分析上述单克隆抗体在目前狂犬病暴露后治疗的应用推广中存在的问题,并针对当前狂犬病免疫球蛋白存在的血源供应、中和效价、质量控制及潜在病毒感染等问题,指出狂犬病病毒单克隆抗体研发的重要性,尤其是抗体的中和效价和中和广度,进而提出针对狂犬病病毒遗传谱系Ⅱ/Ⅲ的全人源单克隆抗体开发,以及针对G蛋白多个抗原位点的单克隆抗体鸡尾酒(mAb cocktail)疗法是当前在狂犬病暴露后预防性单克隆抗体药物研发中亟待解决的问题。

2.1亚型猪瘟病毒流行株E2蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定

为获得仅与我国基因2.1亚型猪瘟病毒(CSFV)流行株反应的单克隆抗体(MAb),并揭示疫苗株与流行株E2蛋白抗原氨基酸的差异,本研究利用基因2.1亚型重组质粒p FastBac1-JL23 E2通过杆状病毒表达重组E2蛋白(rE2),并采用Ni柱纯化后经SDS-PAGE检测r E2的表达及纯化效果;采用western blot鉴定r E2的反应原性。SDS-PAGE及western blot结果表明经杆状病毒表达了基因2.1亚型CSFV E2蛋白,且其纯化效果和反应原性均较好。采用杂交瘤技术制备2.1基因亚型CSFV E2蛋白的单克隆抗体(MAb),采用亲和层析法纯化该MAb,采用BCA法测定其浓度及亚类。将79株1.1、2.1、2.2和2.3基因亚型的CSFV及1.1基因亚型的HCLV株和SM株感染PK-15细胞,72 h后采用IFA检测MAb与不同基因型CSFV的反应性;采用western blot鉴定MAb与10个基因亚型共18种CSFV代表株E2蛋白的反应性。采用IFA鉴定MAb与不同基因型CSFV的中和活性。结果显示,经IFA筛选后共获得16株分泌E2蛋白MAb的杂交瘤细胞株。其中仅一株MAb TCH061与所有2.1基因亚型(2.1a、2.1b、2.1c、2.1g、2.1h、2.1i、2.1j、2.1k、2.1l、2.1m、2.1n)CSFV感染的细胞反应后出现绿色荧光,与基因1.1亚型HCLV疫苗株和SM株以及其他基因型CSFV感染的细胞反应后均无绿色荧光;western blot结果显示,该MAb能够识别2.1基因亚型CSFV E2蛋白(2.1a、2.1b、2.1c、2.1g、2.1h、2.1i、2.1j),在90 ku处出现特异性条带,而与其他基因型CSFV E2蛋白均不反应。表明TCH061为2.1基因亚型CSFV E2蛋白特异性的MAb。MAb的纯化结果显示,在50 ku和25 ku处有明显条带,其浓度为1.70μg/μL且该MAb TCH061重链为Ig G2a,轻链为κ链。中和活性结果显示,TCH061对JL^(23)株(2.1b)、GDLF1株(2.1c)有一定的中和活性,但不能中和C株。分别以GD53株E^(24)个不同区域的截短蛋白为抗原通过western blot初步确定MAb识别抗原表位的区域。利用CLC Sequence Viewer比对与MAb反应的CSFV E2蛋白氨基酸序列的差异,通过SWISS-MODEL预测MAb抗原表位的关键氨基酸位点。利用杆状病毒表达CSFV JL^(23)株各位点突变后的E2蛋白,采用western blot鉴定各突变的E2蛋白与MAb TCH061的反应性。Western blot结果显示,TCH061的抗原表位位于E2蛋白的aa1~aa90,且其识别CSFV E2蛋白P^(20)不识别L^(20)的CSFV。通过SWISS-MODEL预测E2蛋白氨基酸序列的I18、G^(19)、P^(20)、L^(21)、G^(22)、A^(23)和E^(24)在空间上比较接近;MAb TCH061与JL^(23)株I18M突变的E2蛋白反应,与G^(19)K、P^(20)L和L^(21)P突变的E2蛋白均不反应,与G^(22)K突变的E2蛋白反应性较弱,与HCLV E2蛋白不反应,但与HCLV L^(20)P突变的E2蛋白反应。证实TCH061的抗原表位为^(19)GPLG^(22),经Py MOL结构模拟确定其为空间构象表位;且除了aa^(20),其他位点在各基因型CSFV中均非常保守,表明P^(20)是2.1基因亚型CSFV流行株E2蛋白抗原表位的关键氨基酸。综上所述,本研究首次获得一株区别于CSFV疫苗株和2.1基因亚型CSFV流行株的MAb TCH061,揭示了疫苗株与流行株E2蛋白氨基酸位点的差异,为研发猪瘟疫苗和CSFV流行株感染的血清学鉴别检测方法的建立提供了重要的MAb资源。

猪精液超低温冷冻保存研究进展

猪人工授精(AI)技术已经广泛应用于畜牧业生产,但精液来源基本是17℃保存的新鲜猪精液,不利于精液长期保存和猪种资源保存。超低温冷冻保存技术是猪精液长期保存最有效的方法,冷冻精液可以实现不同地区、不同国家优良种猪精液间的交流,从而大大提高猪种资源的利用率,但冷冻解冻后的精液质量较差,受胎率、窝产仔数远低于鲜精,极大地限制了猪精液冷冻保存技术的广泛应用。本文综述了猪精液冷冻保存研究概况、猪精液冷冻损伤机理和猪精液冷冻保存影响因素,以期为猪精液超低温冷冻保存研究提供新的思路和方法。

动机性信息加工理论及其在工业与组织心理学中的应用

"团队作为信息加工者的观点"认为,团队执行复杂任务需要经过一系列认知决策,哪些信息被共享,以及信息共享和整合的质量,共同决定团队效能的高低。动机性信息加工理论则进一步提出,认知动机和社会动机共同决定了哪些信息被共享,以及信息共享和整合的质量。认知动机决定信息加工的深度,社会动机决定信息加工的方向,两种动机共同决定决策质量。这一理论可以很好地整合谈判和创造力领域的研究结果,并在团队效能领域得到很好的应用。动机性信息加工理论是对双过程模型和"团队作为信息加工者观点"的发展和整合,并为决策质量的影响因素提供新的分类框架和研究思路。

一种循环迭代的MIMO雷达发射方向图设计方法

现有多输入多输出(MIMO)雷达发射方向图设计是通过优化信号相关矩阵来逼近期望方向图,可采用凸优化方法求解,但其计算量较大,不利于工程实现。针对上述问题,该文提出一种循环迭代的MIMO雷达发射方向图设计方法。该方法以加权最小二乘为准则,通过引入辅助变量,将对信号相关矩阵的优化问题转化为关于其Hermite平方根的二次优化问题,再以循环迭代的方式进行求解。对于均匀线阵,当采用均匀加权且离散化方位角在归一化空间频率域均匀采样时,可采用快速傅里叶变换(FFT)的方式进行求解,进一步提高计算效率。仿真结果表明,该方法所得发射方向图可以很好地逼近期望方向图,且具有较高的实时性。

个体证券投资者自我效能感对赌徒谬误的影响

赌徒谬误指当某一独立随机事件发生后,人们倾向认为这一结果再次出现的概率降低。如果一连串的随机事件呈现出一定的趋势,人们倾向于认为随机事件将呈现系统性反转。证券市场中的赌徒谬误指在股票上涨(下跌)序列中做出股价将要下跌(上涨)的判断。本研究探讨股票市场特征(趋势长度及方向)及投资者的人格特征(自我效能感)对赌徒谬误的影响。以83名股票投资者为对象,采用多层线性模型进行分析,结果发现:趋势长度主效应显著,短线情境下赌徒谬误频次更高;趋势方向主效应显著,下跌情境下赌徒谬误频次更高;二者交互作用显著,在短线下跌情境下,赌徒谬误频次更高;投资者的自我效能感对股票趋势长度具有调节作用,高自我效能的投资者在短线情境下更容易出现赌徒谬误。

淋巴瘤治疗前后营养代谢及营养支持研究进展

近年来淋巴瘤发病率逐年升高,淋巴瘤患者的营养状态影响患者的生活质量,甚至决定患者对治疗的耐受情况。本文就初诊淋巴瘤患者静息能量代谢、化疗及骨髓移植对患者营养状态的影响及淋巴瘤个体化营养支持的作用进行综述。

阵列误差下的多输入多输出雷达测向技术

针对多输入多输出(Multiple-Input Multiple-Output,MIMO)雷达收发阵列同时存在阵元互耦效应和幅相误差时目标测向性能下降的问题,提出了一种基于Capon波束形成的测向算法.该方法利用Toeplitz特性降低了参数空间维数,并结合Kronecker积特性将发射和接收阵列的阵列误差去耦合,从而对收发阵列误差进行迭代补偿,最终获得目标方位角的估计.仿真结果验证了所提算法的有效性和可行性.

猪精子质量的流式细胞检测分析

本试验将流式细胞术应用于猪精子分析,同时检测精子功能的多个特性,以保证精子具备多种特性且功能完整,顺利完成授精过程。分别采用SYBR-14/PI(Propidium Iodide)、YO-PRO-1/PI、PNA/PI及Mito Tracker/YO-PRO-1 4种染色方法对荣昌猪精子的质膜完整性、细胞凋亡、顶体完整性及线粒体功能进行了检测和分析;以SYBR-14^+/PI^-表示质膜完整的活精子,YO-PRO-1-/PI-表示活精子,PNA-/PI-表示未发生顶体反应的活精子,Mito Tracker^+/YO-PRO-1-表示线粒体活性高的活精子,以上述检测指标的综合结果判定精子功能的完整性。本试验通过流式细胞术对荣昌猪精子进行质量检测和分析,结果表明,该方法可为临床诊断种猪不孕症提供理论依据,对有效治疗不孕症有重要意义。

CGRP作用下的成骨细胞蛋白质差异表达

目的:探讨降钙素基因相关肽作用下成骨细胞内蛋白质表达谱的变化。方法:传代培养MG63成骨细胞,随机分为CGRP组和对照组。提取各组成骨细胞内蛋白质,经双向电泳分离、考马斯亮蓝染色后扫描分析蛋白质表达变化,选取6个差异显著的蛋白点进行胶内酶切、肽质量指纹图谱分析和IPI数据库检索。结果:双向电泳可分离(967±17)个蛋白质,点匹配率为(85.1±1.4)%,成骨细胞6种蛋白点表达出现明显差异,与对照组比较,CGRP组6种蛋白质表达下调。质谱分析鉴定出与核糖体定位和合成的新蛋白转位有关的核糖体结合蛋白p180(p180/ribosomereceptor)及影响细胞内钙浓度的钙结合蛋白HRNRHornerin等5种蛋白质。结论:CGRP作用于成骨细胞后,成骨细胞蛋白质组变化显著,涉及与钙离子浓度变化及新蛋白转位有关的几组蛋白质,提示CGRP可能通过这几种蛋白参与第二信使及细胞因子的调节并发挥功能。

基于干扰位置预测的稳健波束形成方法

高速平台雷达阵列进行自适应波束形成时,干扰方向的快速变化和波束指向误差会导致输出信干噪比的急剧下降.针对上述问题,提出了一种基于干扰位置预测的稳健波束形成方法.该方法首先定义了归一化空间频率,对权值应用时期的干扰位置进行预测,给出零陷范围;然后采用矩阵加权的方式对零陷范围进行低增益约束并保持主瓣区域增益,从而实现干扰抑制,提高波束形成对指向误差的稳健性.仿真实验证明了所提方法的有效性.

人源抗体转基因动物平台及专利保护

回顾治疗性抗体药物从鼠源抗体、嵌合抗体、人源化抗体到全人抗体的演进历程,以及用于全人单克隆抗体发现的人源抗体转基因动物的发展过程,重点介绍目前全球常用的人源抗体转基因动物平台的特点及其核心专利保护。分析人源抗体转基因动物利用基因工程技术,利用表达人抗体的免疫球蛋白基因替换动物的免疫球蛋白基因,能够直接表达人类的抗体蛋白,研究其在全人抗体药物开发中的广泛应用。展望为解决转入的人免疫球蛋白基因与动物B细胞发育的匹配性问题,获得多样性更丰富、亲和力更高的候选抗体,需要对动物抗体产生的机制进行更加深入的基础研究,同时,在面临突发性生物安全事件时,如何快速大量的生产全人抗体,也是未来人源抗体转基因动物培育需要重点考虑的问题。

浅谈中国古典舞和西方现代舞的文化差异与借鉴吸收

现代舞的流派很多，创作理念和表现手法也不尽相同。这就要求我们在学习和引进现代舞时．要对其创作理念、表现内容进行分析，去其糟粕、取其精华。在创作上，要弘扬积极向上、勇于进取的精神．使中国古典舞沿着先进文化的方向向前发展。

降钙素家族中的肽和受体在骨代谢调节中的角色

降钙素存在于许多物种中，其中鲑鱼降钙素虽然仅分享了与人体降钙素50％的同源性，但在大多数生物化验中却显示出比人体降钙素更大的效力。降钙素家族包括许多与降钙素结构相似的肽类激素：降钙素基因相关肽（CGRP），胰淀素，肾上腺髓质素和肾上腺髓质素2（中间素）。降钙素家族的其他两个成员是肾上腺髓质素和肾上腺髓质素2。

云南大学生体育消费行为特征分析

对云南大学生(昆明地区高校)体育消费现状、消费动机调查研究,对大学生体育消费行为进行了差异化分析,在此基础上,提出了建设性的建议与对策。

基于AnyLogic的城市轨道交通站点接驳设施配置优化仿真

为解决因城市轨道交通与地面交通方式接驳设施配置不完善引起的城市交通运行效率降低问题,本文利用AnyLogic软件对成都市高升桥地铁站的接驳过程进行仿真分析,通过分析仿真结果,提出相应优化方案,并利用评价指标,综合评价优化方案对周边区域拥堵情况和接驳性能的改善效果。结果表明:优化后,共享单车车辆余数降低8.28%,乘客损失率下降14.69%;公交车平均换乘时长减少10.30 s,平均候车时长减少45.52 s;出租车的平均换乘时长为58.46 s,平均候车时长为155.58 s,站点周边区域的拥挤现象得到有效缓解,接驳设施利用效率提高,对城市轨道交通接驳体系的优化具有一定的指导意义。

身体成分与儿童血压关系的系统评价/Meta分析

背景身体成分是体内各种成分的含量,其与儿童血压的关联存在争议。目的探讨身体成分与儿童血压的关联性。设计系统综述/Meta分析。方法计算机检索中国生物医学数据库、维普中文科技期刊数据库、中国知网期刊数据库、万方数据在线知识服务平台4个中文数据库和PubMed、Web of Science和EBSCO 4个外文数据库,检索起止时间均为各数据库建库至2023年8月8日。纳入身体成分与儿童血压关系的队列研究。由2名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,对结果进行定量和定性归纳总结。主要结局指标身体成分与儿童高血压的相关性。结果共纳入9项身体成分与儿童舒张压和收缩压的纵向队列研究,其中7个队列报告了脂肪质量相关指标与儿童舒张压和收缩压的相关性,儿童期脂肪质量百分比与儿童舒张压和收缩压呈正相关,其他脂肪质量指标研究结论仍不一致。2个队列报告了非脂肪质量指标与儿童血压的相关性,研究结论不统一。3个队列报告了脂肪质量与儿童期血压偏高和高血压的发生呈正相关,但新生儿脂肪质量与6岁时高血压的风险可能为负相关。结论儿童期脂肪质量百分比与儿童舒张压和收缩压呈正相关,身体成分对儿童血压有一定影响。

昆明市普通高校网球运动发展浅析

网球运动是一项深受人们喜爱、富有乐趣的体育活动,它具有很高的锻炼价值和很强的观赏性,是一项老少皆宜的运动。近年来,随着我国高校网球运动的迅速发展,网球运动逐渐被现代大学生们喜爱和接受,并在高校中不断推广普及。本文采用文献资料法、专家访谈法、问卷调查法、数理统计法、逻辑分析法,以昆明市普通高校网球运动发展现状为切入点,通过对昆明市主要普通高校的教师、学生对网球运动的认知、网球课程的开展、场地师资情况的调查研究,对昆明市普通高校网球运动开展现状进行阐述,分析影响昆明市普通高校网球运动发展的因素,并提出相应的对策。

里约奥运会期间“CCTV5”与“新浪体育”微博报道比较分析

运用文献资料法等,以里约奥运会这一大型综合性体育赛事为例,选取"CCTV5"和"新浪体育"两个具有代表性的微博账号,对其发布情况与报道情况进行研究。研究认为:诸多传统体育媒体或体育网站在媒介融合的大趋势下纷纷注册官方微博帐号并将其作为桥头堡,促进了体育新闻内容资源的充分释放;各新兴社交媒体由于在性质、背景、主体等方面不同,所以产生了差异性。建议:要拓宽自身的信息采集渠道;丰富新闻表达形式,尽量使受众易于接受相关资讯,注重互动模式,保证产品质量等。