基于可拓语义的澄城刺绣风格迁移设计方法研究

针对目前澄城刺绣图案创新较少以及自动生成受到局限等问题,提出基于可拓语义的澄城刺绣风格迁移设计方法。首先通过调研整理澄城刺绣图案,提取图案的语义;然后对语义词汇的关联程度和设计应用价值进行分析,选择出具有最大可拓区间的语义词汇;对刺绣语义进行图解,评估词汇的辨识度和设计应用价值,获取图解的最大可拓区间,从而指导刺绣图案设计;从设计方案的语义表现程度和美观性2个方面进行优度评价;最后将优选后的图案输入到风格迁移算法、调整参数和迭代方案将澄城刺绣的风格迁移到设计的原始图案上、计算峰值信噪比(PSNR)、评估图像质量并进行优度评价,最终得到澄城刺绣风格的图案创新设计方案。结果表明该方法可以在一定程度上将澄城刺绣的风格特点转化为语义并应用到刺绣的创新设计中,为文化遗产的保护和创新提供了方法。

基于α-突触核蛋白原纤维的帕金森氏疾病模型的研究进展

帕金森氏病(Parkinson’s disease,PD)是一种常见的神经系统退行性疾病,主要病理学标志为中脑黑质致密部可见部分的一种球状包涵体,称为路易小体(Lewy bodies,LBs)。LBs的主要成分为部分中空的放射状淀粉样纤维,而该淀粉样纤维的主要成分为α-突触核蛋白(α-synuclein,AS)。AS与PD的发生有着密切的关系,是PD致病机制研究中的关键蛋白。AS的原纤维具有独特的传播特性,且能诱发产生与PD病理相类似的一系列特征,因此其可以作为建立PD模型的全新材料。本文就基于AS原纤维的PD模型的研究进展进行综述。

非人灵长类帕金森模型的研究进展

帕金森病(Parkinson’s disease,PD),作为全球第二大神经系统退行性疾病,目前已有的治疗手段仍不能从根本上逆转疾病的进程,而治疗手段的发现和评价离不开动物模型的建立,一个可靠、有效的动物模型将有利于PD的发病机制、诊断、治疗方法以及药物筛选的研究。啮齿类动物和非脊椎动物已被广泛用于建立PD模型,但其并不能完全呈现人类PD的行为学和病理特征,而非人灵长类(nonhuman primate,NHP)在生理、解剖结构和免疫等方面与人最为接近,更适合用来探索疾病机理和发现新的治疗方式,因此,本文就帕金森病NHP模型的建立方法进行综述,为帕金森病NHP模型建立提供参考。

高效制备重组人α-突触核蛋白原纤维方法的建立

通过设计PCR引物,从pcDNA3.1-α-syn载体中扩增人α-突触核蛋白的编码DNA序列,将其克隆至PGEX-5X-1载体中,成功构建了人α-突触核蛋白高效原核表达载体pGEX-5X-1-syn。转化BL21菌株后进行IPTG诱导,通过对诱导剂浓度、诱导时间和温度、纯化方法和原纤维培养条件的优化,获取了重组人α-突触核蛋白原纤维,采用硫黄素T染色和透射电镜方法确认原纤维的制备情况。结果发现,经终浓度为1.0 mmol/L的IPTG,37℃条件下诱导3 h,人α-突触核蛋白得到大量表达。采用GST融合蛋白纯化磁珠进行蛋白纯化,可快速高效获取高纯度的人α-突触核蛋白,纯化产量可达到25 mg/L。浓度为9 mg/mL的人α-突触核蛋白,在37℃,1000 r/min震荡条件下培养至6 d,可大量成功制备人α-突触核蛋白原纤维,并在透射电镜下成功观察到了原纤维的形态。α-突触核蛋白原纤维是建立PD模型的重要材料,以上结果建立了一套可快速高效制备重组人α-突触核蛋白原纤维的方法,为PD的动物模型及细胞模型的建立提供了重要的研究材料。

枯草芽孢杆菌WB600芽孢和营养体耐受凡纳滨对虾胃肠道环境及定殖存活的研究

采用体外模拟胃肠道环境与体内芽孢存活计数相结合方法,考察枯草芽孢杆菌WB600耐受凡纳滨对虾胃、肠道环境及其在凡纳滨对虾肠道内的定殖存活情况。试验结果表明,枯草芽孢杆菌WB600芽孢在不同的pH环境中均表现出很强的耐受性和良好的生长增殖趋势,而营养体的耐受性较差;在含不同浓度胰蛋白酶的模拟肠液中芽孢和营养体均能表现出良好的耐受性,其中芽孢的耐受能力更为显著;当温度高达80℃时,仍有93.9%的芽孢存活,而营养体基本失活;在虾的肠道内容物中能检测到大量的活芽孢,说明芽孢在进入虾肠道内是可以在其内存活并生长定殖的。表明枯草杆菌WB600芽孢比营养体对胃肠道环境和高温具有更强的耐受能力,且能顺利在虾肠道内定殖存活,有望在水产养殖领域发挥益生作用的同时成为新型的口服疫苗载体。

小鼠resistin基因慢病毒表达载体构建及在KMB17细胞中的表达

[目的]构建携带小鼠resistin基因的慢病毒表达载体,并高效转导靶细胞。[方法]从小鼠脂肪组织提取总RNA,经PCR扩增、酶切、连接、转化后构建重组质粒;通过293T细胞包装为重组慢病毒颗粒,然后感染KMB17细胞,检测小鼠resistin基因在靶细胞中的表达。[结果]PCR扩增到预期的342 bp大小的resistin基因目的片段;构建的重组质粒经酶切得到了342 bp大小的目的片段,测序鉴定为小鼠resistin基因序列;重组慢病毒包装可观察到很强的绿色荧光,说明具有较高的质粒转染效率;重组慢病毒感染KMB17后可检测到小鼠resistin基因转录水平和蛋白水平的表达,证明resistin基因得到有效转导并可在靶细胞中高水平表达。[结论]成功构建了携带小鼠resistin基因的慢病毒表达载体并可在KMB17靶细胞中获得高效表达。

重组人成纤维细胞生长因子21慢病毒质粒的构建及鉴定

目的构建人成纤维细胞生长因子21(human fibroblast growth factor 21,h FGF21)重组慢病毒质粒,并进行包装和鉴定。方法 PCR扩增人FGF21 ORF序列,经Eco RⅠ和Bam HⅠ双酶切后,连接至慢病毒载体PLV-EF1a-EGFP[2A]Puro,构建重组慢病毒质粒PLV-EF1a-EGFP[2A]Puro-h FGF21,经293T细胞包装为重组慢病毒颗粒,并感染KMB17靶细胞。荧光显微镜观察293T细胞中报告基因EGFP的绿色荧光,判断重组慢病毒的感染效率;RT-PCR法检测KMB17靶细胞中h FGF21基因m RNA的转录;免疫荧光和Western blot法检测KMB17靶细胞中h FGF21蛋白的表达。结果重组慢病毒质粒PLV-EF1a-EGFP[2A]Puro-h FGF21经双酶切及测序鉴定,证明构建正确,在包装细胞中获得较高的转染效率,重组慢病毒感染KMB17靶细胞72 h后,荧光显微镜下可见EGFP绿色荧光。感染组KMB17靶细胞中存在h FGF21基因m RNA的转录和蛋白的表达。结论成功构建了重组慢病毒质粒PLV-EF1aEGFP[2A]Puro-h FGF21,并于KMB17靶细胞中表达,为FGF21功能与特性的相关研究及基因工程药物的探索和研发奠定了基础。

食蟹猴体内自然成熟和体外培养成熟的卵母细胞对卵胞质内单精子显微注射(ICSI)结局的影响

目的：探讨食僖猴体内自然成熟和体外培养成熟（IVM）的卵母细胞对卵胞质内单精子显微注射（ICSI）结局的影响。方法：选取有正常月经周期和生育功能的13只健康成熟的雌性食蟹猴，使用优化的促排卵方案进行促排卵后，B超下观察用药后的卵巢情况，手术取卵后对已成熟的MⅡ期卵母细胞进行ICSI，未成熟的GV及MⅠ期卵母细胞在IVM16-38h后发育为MⅡ期卵母细胞，再进行ICSI，观察IVM及体内自然成熟的卵母细胞的受精情况和胚胎发育情况。结果：IVM为76．1％±14．9％，受精率为56．79％，卵裂率为73．91％，优质胚胎率为44．12％；体内自然成熟的卵母细胞受精率为68．52％，卵裂率为94．59％，优质胚胎率为58．57％。在受精率和卵裂率方面，两者间均有统计学差异（P〈0．05和P〈0．01），而优质胚胎率无统计学差异（P〉0.05）。结论：食蟹猴体外培养成熟的卵母细胞对ICSI结局有较大影响。

非人灵长类动物在体外受精-胚胎移植实验中的管理措施

非人灵长类动物(Non-human Primates)已被广泛应用于人类医学和生殖生物学研究,其在体外受精-胚胎移植(In Vitro Fertilization and Embryo Transfer)实验中的管理措施对实验研究的顺利进行至关重要。根据实践经验,本文对于非人灵长实验动物的饲养环境条件、日常饲喂管理、实验中动物的护理以及手术后预防性治疗等关键环节进行了叙述总结,以供参考。

单纯疱疹病毒1型及其与常见神经退行性疾病相关性的研究进展

单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus-1,HSV-1)是一种嗜神经性的DNA包膜病毒,通过感染口腔黏膜导致唇疱疹及眼部损害,可潜伏于大脑中,激活时能引起中枢神经系统的病变而发生单纯疱疹病毒性脑炎(herpes simplex virus encephalitis,HSVE)。神经退行性疾病以特异性神经元的大量丢失为主要特征,是一类进行性发展的复杂疾病,常表现为认知功能障碍、运动障碍、小脑出现共济失调、肢体震颤及眼球震颤等临床表现。常见的神经退行性疾病包括阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)、帕金森病(Parkinson disease,PD)、多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)等,这些疾病与HSV-1感染密切相关。因此,本文就HSV-1及其与常见神经退行性疾病相关性的研究进展作一综述。

食蟹猴和恒河猴卵母细胞及早期胚胎玻璃化冻存

为了节省经费和使转基因模型动物品种资源得到妥善保存,该研究利用自制的梯度浓度冷冻液和解冻液结合玻璃化方式分别冷冻和解冻了非人灵长类动物的183个卵母细胞(GV期、MI期和MII期)、114个卵裂期胚胎(2-细胞期、4-细胞期和8-细胞期)及25个桑椹期胚胎。其中食蟹猴卵母细胞67个,卵裂期胚胎45个,桑椹期胚胎11个;恒河猴卵母细胞116个,卵裂期胚胎69个,桑椹期胚胎14个。复苏后存活率分别为56/67(83.58%)、36/45(80.00%)、9/11(81.82%)、102/116(87.93%)、55/69(79.71%)和11/14(78.57%)。结果表明,快速玻璃化冷冻法简便且胚胎存活率高,是一种较好的冷冻食蟹猴和恒河猴卵母细胞及胚胎的方法。