甘油对人的红细胞冷冻干燥保存效果的影响

就甘油对人红细胞冷冻干燥保存效果的影响进行了实验研究。实验中先用不同浓度的甘油对红细胞进行处理,用PVP、柠檬酸钠、蔗糖和胎牛血清作为冻干保护剂对红细胞进行冻干保存,冻干后的样品用质量浓度为30g/L的N aC l复水,用血球分析仪和光镜进行检测。实验结果表明:用甘油进行处理后,红细胞的回收率明显高于没有用甘油处理的红细胞组。其中,采用质量浓度为400 g/L的甘油处理后,红细胞冻干回收率达到51.4%。

胞内海藻糖对红细胞冷冻干燥保存效果的影响

冷冻干燥是长期保存人体红细胞最理想的方法之一。利用孵育的方法将非渗透性保护剂海藻糖载入人体红细胞中,以含海藻糖的保护剂对红细胞进行冻干保存实验,研究胞内海藻糖浓度对红细胞冻干保存的影响。在37℃下,以不同浓度海藻糖溶液(400mM,600mM,800mM,1000mM)对红细胞孵育7h。结果表明,随胞外海藻糖浓度的增加,胞内海藻糖的浓度相应升高,试验中海藻糖浓度最高达到35mmol/L。对新鲜与孵育后红细胞在相同条件下进行冻干实验,结果表明,孵育后的红细胞冻干回收率随胞内海藻糖浓度增加而增加,表明胞内海藻糖在冻干过程中对红细胞有保护作用。

甘油预处理对红细胞冷冻干燥保存作用的实验研究

探索使用甘油作保护剂提高人体红细胞冷冻干燥保存效果的可能性。甘油预处理红细胞的目的是增加细胞质浓度,减小细胞的冷冻损伤。实验分为3组:新鲜对照组、20%甘油组与40%甘油组,冻干保存前后分别检查红细胞相关指标。结果表明,20%与对照组无显著差别;40%甘油组的冻干细胞回收率与血红蛋白回收率分别维持在冷冻干燥前的55.37±4.26%和53.49±3.85%,非常显著高于对照组(P<0.01);渗透脆性与超氧化物歧化酶(SOD)活性均显著高于对照组(P<0.05),但与新鲜红细胞无显著差异。研究结果为使用甘油作红细胞的冻干保护剂提供了理论基础。

甘油对冷冻干燥保存红细胞抗氧化酶活性的影响

为研究甘油对冷冻干燥保存红细胞的作用机制,测定不同时期冷冻干燥保存-复水的红细胞回收率及超氧化物歧化酶(Superoxide d ismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(G lutathione peroxi-dase,GSH-Px)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)的酶活性。结果显示,保存在25℃下,前90天内的SOD、GSH-Px与CAT的酶活性变化不大,酶活率保持在90%以上;随保存时间延长,180天后细胞回收率由初始的83.5%降低至48.5%,SOD、GSH-Px、及CAT的酶活率分别降低了25.6%、21.5%和18.4%。本实验发现保存过程是引起冻干红细胞SOD、GSH-Px、及CAT酶活性下降的主要原因。

海藻糖载入红细胞及其冷冻干燥的实验研究

冷冻干燥保存是长期保存人体红细胞的理想方案之一。冻干保护剂海藻糖渗入细胞内后,对细胞膜和细胞内物质有保护作用,其中的一个作用是增加细胞质的浓度,使冻干过程容易形成稳定的玻璃态。应用高渗法处理红细胞,通过考察胞内海藻糖含量、红细胞冻干后的存活率、腺苷三磷酸酶(ATPase)、超氧化物歧化酶(SOD)活力以及细胞形态变化,研究胞内海藻糖含量对红细胞冻干后活性的影响。结果显示:海藻糖对红细胞冻干具有明显的保护作用,随胞内海藻糖浓度升高,其保护性能逐渐增强;43.8mmol/L的胞内海藻糖浓度对红细胞保护最好,细胞存活率达到53.6%,形态保持良好,ATP和SOD活力均在正常的范围内。