气相色谱-质谱联用法检测粪便中短链脂肪酸

目的建立气相色谱-质谱联用快速检测粪便中短链脂肪酸的方法,并探讨将其应用于肠道疾病辅助诊断的可能性。方法分别取健康C57BL/6小鼠、SD大鼠和成年人志愿者粪便,以及用硫酸葡聚糖溶液诱导的肠炎模型C57BL/6小鼠的粪便;用气相色谱-质谱联用法检测上述标本中短链脂肪酸的种类和相对丰度。结果所有标本均检测出多种短链脂肪酸,其种类主要有乙酸、丙酸、丁酸和戊酸。在生理条件下,人与鼠短链脂肪酸的种类和相对丰度比都十分相似。肠炎可使粪便中除乙酸外的其他短链脂肪酸的相对丰度下降,其中,尤以丁酸下降最为明显。结论气相色谱-质谱联用法可快速检测粪便中的短链脂肪酸,并有可能应用于肠炎等肠道疾病的辅助诊断。

量子点与巨噬细胞的生物相容性

背景:与传统的有机荧光染料相比,量子点呈现出良好的生物标记特性,尤其在细胞标记、临床靶向生物成像等领域呈现出独特的光学特性。目的:观察CdS e/Zn S量子点与单核-巨噬细胞的生物相容性。方法:将巨噬细胞RAW264.7接种于96孔板中,分3组培养,分别加入0,50,100 mg/L的Cd Se/Zn S量子点干预,培养1 h或2 h,流式细胞仪检测荧光信号;培养0-24 h,流式细胞仪检测50 mg/L Cd Se/ZnS量子点标记巨噬细胞的荧光信号强度;培养18 h,定量PCR检测巨噬细胞内肿瘤坏死因子α及白细胞介素1β的水平;培养18 h,MTT法检测巨噬细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果与结论:(1)荧光信号强度与CdS e/Zn S量子点的质量浓度呈正相关,并且随着标记时间的延长,荧光信号强度增强;(2)经50 mg/L CdS e/ZnS量子点标记后,随着时间的延长,巨噬细胞的荧光信号不断增强,在18 h达到峰值;(3)与0 mg/L量子点组比较,50,100 mg/L量子点组可显著促进巨噬细胞内肿瘤坏死因子α及白细胞介素1β的表达(P<0.01或P<0.05);100 mg/L量子点组肿瘤坏死因子α表达高于50 mg/L量子点组(P<0.01);50,100 mg/L量子点组白细胞介素1β表达无差异;(4)50,100 mg/L Cd Se/Zn S量子点组细胞增殖强于0 mg/L量子点组(P<0.05),50,100 mg/L Cd Se/Zn S量子点组细胞增殖无差异;(5)50,100 mg/L Cd Se/Zn S量子点对巨噬细胞的凋亡无明显影响;(6)结果表明,Cd Se/Zn S量子点可活化巨噬细胞,促其增殖与分泌炎症因子,但不影响其凋亡。

丁酸对小鼠骨髓源树突状细胞的免疫调节作用

目的:观察肠道细菌代谢产物丁酸对体外培养小鼠骨髓源树突状细胞(Bone marrow derived dendritic cells,BMDCs)表型及功能的影响,并探讨其可能的机制。方法:利用丁酸盐对GM-CSF和IL-4体外诱导的BMDCs细胞进行处理,采用流式细胞术检测BMDCs细胞表面分子CD80、CD86、MHCⅡ、B7-DC的表达及其对T细胞增殖的影响;用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测其细胞因子IL-6、IL-12的表达;用格里斯反应(Griess reaction)和免疫印迹法(Western blot)分别检测DC细胞产生NO2-的生成和Toll样受体-4(TLR4)信号通路中ERK分子的磷酸化。结果:丁酸可下调LPS诱导的成熟BMDCs细胞CD80、CD86、MHCⅡ、B7-DC分子的表达。同时,丁酸也可抑制IL-6和IL-12的分泌,并抑制树突状细胞对OVA257-264抗原特异性T细胞的增殖。进一步的Western blot检测结果显示丁酸可抑制DC细胞TLR4信号通路中ERK分子的磷酸化。结论:丁酸可通过抑制DC细胞TLR4信号通路中ERK分子的磷酸化,下调DC细胞的免疫功能。

非创伤性股骨头坏死患者NK细胞的表型与功能

目的探讨自然杀伤细胞(NK细胞)在非创伤性股骨头坏死(non-traumatic femoral head necrosis,NONFH)患者外周血及关节液中的表型变化及RANK/RANKL/OPG表达量的变化。方法通过流式细胞术学技术对比分析两组外周血及关节液NK细胞表型变化及其表面受体HLA-DR及NKp30(CD337)表达不同,通过ELISA技术测定两组外周血及关节液中人骨保护素(osteoclastogenesis inhibitory factor,OPG)、核因子κB受体激沾因子(receptor activator of NF-κB,RANK)、核因子κB受体配体激沾因子(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)的表达差异。结果结果显示在NONFH患者中外周血及关节液中NK细胞数量明显增加,其中以CD3-CD56+NK为主,其表面受体HLA-DR显著上调,NKp30表达明显下调,OPG表达下调而RANK、RANKL明显上调。结论NK细胞参与NONFH疾病的进展过程,其表面受体HLA-DR增高而NKp30下调,同时OPG表达明显下调,RANK及RANKL表达上调。