航空锂离子蓄电池组维护保障研究

针对航空锂离子蓄电池组的维护与管理需求,通过研究锂离子蓄电池工作原理、组成、功能结构,基于使用维护流程和要求,引入了一款信息化航空锂离子蓄电池组维护检测设备,重点介绍了维护检测设备的功能、结构、原理。加强航空蓄电池组的维护管理,可有效延长蓄电池组的使用寿命,确保飞行安全。

内皮细胞抑制素在毕节酵母中的表达与活性分析

采用PCR技术从人胎脑cDNA库中扩增了人内皮细胞抑制素基因。经DNA序列分析后将扩增的基因克隆至酵母载体pPIC9K,获得的重组质粒pPIC9K＿EDN转化毕节酵母GS115,构建表达内皮细胞抑制素的酵母工程菌P.pastorisGS115(pPIC9K＿EDN)。SDS＿PAGE分析结果显示:人内皮细胞抑制素在重组酵母GS115(pPIC9K＿EDN)中获得高效表达。用30L发酵罐构对建的工程菌进行高密度发酵,经甲醇诱导48h,生物量达到250OD,分泌量为150mg L,发酵液经SPStreamline,SPSepharoseFF阳离子交换柱和SepharoseHeparinHiTrap柱纯化,产物纯度达到98%。纯化产物具有免疫活性并能抑制bFGF诱导的鸡胚绒毛尿囊膜血管生成。

内皮细胞抑制素酵母工程菌的高密度发酵及产物纯化和活性分析

用 30升发酵罐研究了内皮细胞抑制素 (EDN)酵母工程菌P .pastorisGS115 (pPIC9K EDN)的高密度发酵工艺 ,摸索出发酵培养基 ,pH ,诱导时间等对菌体生长和基因表达的影响 .根据所确定的最适条件进行发酵 ,通过补料和甲醇诱导 4 8h后 ,工程菌GS115 (pPIC9K EDN)生物量的A60 0 值达到 2 5 0 ,分泌量为 15 0mg L .发酵液经StreamlineSP ,SepharoseSPFF离子交换柱和Sepharose HeparinHiTrap亲和柱纯化 ,产物纯度达 97%以上 ,回收率为 6 0 % .Western印迹结果表明 ,酵母工程菌GS115 (pPIC9K EDN)表达的重组人内皮细胞抑制素具有天然EDN的免疫原性 .MTT法和抑癌实验结果显示 :纯化产物能抑制人脐静脉内皮细胞的增殖并能抑制移植于小鼠的黑色素瘤的生长 ,其平均抑瘤率是 94 2 % .

血管生成抑制因子的研究进展

血管生成与肿瘤的生长、侵袭和转移密切相关,目前,以抑制血管生成为靶点治疗肿瘤有望成为抗肿瘤新疗法之一。近年来,研究发现了多种内源性血管生成抑制因子,其中一些已进入了临床试验阶段。本文对内源性血管生成抑制因子的结构、功能、作用机制及其在肿瘤治疗中的应用进行综述。

利用枯草杆菌整合表达嗜铬粒蛋白抗真菌片段

为实现CGA1-76片段基因在枯草杆菌中的稳定表达,将CGA1-76片段基因的表达元件重组到枯草杆菌转座子质粒pHV1249微转座子mini＿Tn10内,利用mini＿Tn10将CGA1-76片段基因的表达元件整合到枯草杆菌DB1342染色体上,用氯霉素和红霉素筛选枯草杆菌转座工程菌DB1342(TnSVTQ)。DB1342(TnSVTQ)在无选择压力条件下经10d连续传代培养,转座子内氯霉素抗性丢失率为0%,说明转座子稳定整合在DB1342染色体上。SDS＿PAGE和免疫印迹分析结果表明,在蔗糖诱导下,CGA1-76片段基因在DB1342(TnSVTQ)中获得表达,产物被分泌到细胞外。孔穴琼脂扩散法测定表达上清的抑制真菌活性,结果表明重组CGA1-76能抑制烟曲霉菌和黄曲霉菌的生长,抑菌圈直径分别为9mm和8mm。

ADK基因在酿酒酵母中的表达和ATP合成研究

采用基因工程技术 ,将催化ATP合成的酶—ADK的基因克隆进表达载体YEpN181P2获得重组质粒YEpN ADK ,转化酿酒酵母GRF18后 ,ADK基因获得表达 .用重组菌株GRF18(YEpN ADK)发酵合成ATP其产率比对照菌株GRF18提高 75% .

共激活分子及相关因子对机体抗肿瘤免疫的调节作用

肿瘤在生长过程中,由于细胞转化产生的基因毒性应激和微环境的破坏,可激活具有抗肿瘤能力的效应细胞刺激专职抗原提呈细胞,触发T细胞和B细胞的特异性免疫反应。机体尽管存在免疫监视机制,但肿瘤的存在提示了瘤细胞逃避免疫反应的能力，其中包括各种逃避免疫识别的策略，例如表达死亡配体排除病灶的免疫细胞，通过降低主要组织相容性复合物（MHC）或共激活分子削弱免疫原性，以及干扰自然杀伤细胞（NK）和NKT细胞的识别能力。尽管面临诸如此类的问题，现代免疫治疗在治疗恶性疾病方面仍然显示出发展的前景。

人纤溶酶原kringle5功能区基因在大肠杆菌中克隆和表达

目的 :构建含有人纤溶酶原kringle5功能区基因的表达质粒 ,了解在E .coli中表达情况。方法 :采用基因工程技术将人纤溶酶原kringle5功能区基因插入载体PBV2 2 0E .coRI位点 ,再转化到E .coliTGI中 ,SDS -PAGE观察基因表达。结果 :构建出表达质粒PBVK5 ,4 2℃诱导获得表达。结论 :人纤溶酶原kringle5功能区基因表达产物以可溶性蛋白形式存在 ,表达量占菌体总蛋白 9.8%。

T-bet对小鼠巨噬细胞(Raw264.7)生物学功能的影响

背景与目的:T-bet(TboxexpressedinTcells)是一种特异性调控Th1淋巴细胞的核转录因子,它广泛调控多种免疫细胞(如Th1、NK、CD8+、DC、B细胞等)的生物学活性。本研究观察转染小鼠T-bet基因(pcDNA3.0-mT-bet)对小鼠巨噬细胞Raw264.7生物学功能的影响。方法:构建含T-bet的真核表达载体pcDNA3.0-mT-bet,通过双酶切鉴定及测序、PCR鉴定其准确性,RT-PCR及Westernblot检测其在Raw264.7细胞中的表达。以PBS、pcDNA3.0空载体作为对照,将其瞬时转染入Raw264.7细胞,48h后观察其对细胞周期、细胞表面分子MHCⅠ/Ⅱ表达的影响,以及对FITC-右旋糖酐(FITC-dextran)的吞噬能力、一氧化氮(nitricoxide,NO)分泌水平及T-bet对小鼠白血病细胞L1210的杀伤活性。结果:载体pcDNA3.0-mT-bet构建成功并在Raw264.7细胞中表达;T-bet对Raw264.7细胞周期没有影响(P>0.05);经T-bet修饰后,细胞表面MHCⅠ类分子的表达(24.8±0.6)高于空载体组(20.8±0.7),有统计学意义(P<0.05);但两组间MHCⅡ类分子的表达无显著性差异(P>0.05)。T-bet修饰组吞噬Dextran的平均荧光强度(32.8±0.8)高于空载体组(28.2±0.4),有统计学意义(P<0.05)。在无脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激时,T-bet组NO的产生量[(1.7±0.6)pmol]高于空载体组,两组相比差异有显著性(P<0.05);经10μg/mlLPS持续刺激20h后,T-bet组NO的产生量[(15.6±1.6)pmol]显著高于空载体组[(10.5±1.3)pmol](P<0.05)。pcDNA3.0-mT-bet对L1210细胞的体外杀伤活性[(51.9±3.5)%]明显高于空载体组[(35.6±2.1)%],差异有显著性(P<0.05)。结论:T-bet可诱导Raw264.7细胞表达MHCⅠ类分子,增强其对Dextran的吞噬能力,促进其分泌NO,增加其对L1210细胞的杀伤活性,但对其细胞周期及MHCⅡ类分子的表达无影响。

波氏假丝酵母启动子的克隆及新霉素基因的表达

报道了波氏假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａ ｂｏｉｄｉｎｉｉ）启动子的克隆，将克隆的启动子与 Ｎｅｏ基因重组构建了 含Ｎｅｏｒ基因的表达载体ＹｅｐＮＰ１８１，转化波氏假丝酵母，实现了Ｎｅｏｒ基因在波氏假丝酵母中的表达，使波氏 假丝酵母转化子能在含Ｇ４１８的抗性培养基上生长从而建立了Ｎｅｏｒ基因──Ｇ４１８选择系统，为外源基因在 波氏假丝酵母中表达创造了条件．

人内皮抑素小环载体的构建及其在真核细胞中的表达

【目的】构建表达人内皮抑素的小环DNA载体与普通质粒,并观察其在真核细胞中的表达。【方法】从pcD- NA3.1(+)中扩增Pcmv和BGHpolyA片段,定向克隆于pSP72质粒中,构建成pSP72-Pcmv-BGHpolyA。将从pSP72-hEndo- statin-IRES-EGFP质粒中酶切得到的hEndostatin-IRES-EGFP分别克隆到pSP72-Pcmv-BGHpolyA和pcDNA3.1(+),构建成pSP72-Pcmv-hEndostatin-IRES-EGFP-BGHpolyA(pSP72-hES)和pcDNA3.1-hEndostatin-IRES-EGFP(pcDNA-hES)。对质粒pSP72-hES和p(?)C31分别做双酶切,体外连接,构建成p(?)-hES。p(?)-hES转化TOP10细菌后,通过介导分子内重组,降解细菌骨架,获取只含目的基因表达盒的小环DNA载体mc-hES。将mc-hES、p(?)-hES、pcDNA-hES分别转染CNE2细胞48 h后,通过RT-PCR和Western blot观察其表达。【结果】松建的p(?)-hES、mc-hES、pcDNA-hES序列正确,转染CNE2细胞后,3种质粒均有人内皮抑素蛋白的表达。【结论】成功构建了真核表达载体mc-hES、pcDNA-hES、p(?)-hES,经转染细胞后在mRNA和蛋白水平证实有hEndostatin的表达,且小环组明显高于其他两组。在相同情况下,小环载体的表达强度优于传统的质粒载体。

人内皮抑素小环载体在真核细胞中的生物活性

目的通过对人内皮抑素小环载体在真核细胞中的表达和生物学效应的研究,探讨小环载体作为生物治疗载体的可行性。方法将mc-hES、pcDNA-hES分别转染人肝癌细胞HepG2后,通过ELISA、RT-PCR和Westernblot观察hES表达。MTT法检测其对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的增殖抑制作用。结果 mc-hES和pcDNA-hES均能表达hES,mc-hES能明显抑制HUVEC的生长,而对HepG2无明显作用(P<0.05)。在相同条件下,小环较常规质粒在体外能快速介导转基因的表达,且较传统质粒高6～8.3倍。结论 mc-hES较普通质粒pcDNA-hES在肝癌细胞中能高效表达转基因,为小环载体进一步研究提供了很好的实验基础。

基因治疗的进展与临床应用

在过去的40多年间.基因治疗已从临床前试验研究过渡到了临床试验阶段.并应用于多种疾病治疗中.从单基因隐性遗传的血友病到与多因素相关的疾病如癌症、心血管疾病以及人类免疫缺陷病。迄今为止.在近30个国家范围内.包括已经完成或正在进行或已经获得批准在内的基因治疗临床试验超过了1650项。在这些临床试验中.绝大多数是用于肿瘤的治疗。从20世纪60年代初提出基因治疗的理论到90年代初第一例基因治疗临床试验的开展再到当前基因治疗的广泛应用.可以说基因治疗经历了一个曲折的过程。尽管这个领域至今为止还没有成熟.但是基因治疗仍然有潜力能够为肿瘤患者减轻病痛。本文主要从基因治疗的策略和载体系统的研究两大方面对该领域的进展简单综述。

LoRa的智能农业系统设计与实现

现阶段,我国农业智能化普遍采用ZigBee技术,但ZigBee由于通信频率较高、容易受到外界信号的干扰、传输距离短、网络结构复杂,无法保证传输的完整性、准确性、实用性和便捷性。针对ZigBee技术的短板,基于LoRa技术以及LoRa开放协议的智能农业系统设计成为农业生产者的理想选择。文章以LoRa技术作为支撑,设计了集低耗、高效、绿色于一体的智能化农业物联网系统。

基于CR下界无偏能量估计的高炉料面点云锐化成像

高炉雷达获取的料面信息是钢铁冶炼中布料控制的重要参数.但高炉内部环境复杂,料面具有非均匀流态化特性,传统信号处理方法难以准确稳定提取料面有效信息,会导致高炉布料误操作.本文借鉴遥感SAR雷达成像原理,设计了工业SAR扫描式雷达,多倍增加料面采样点密度,提出一种新的料面点云锐化成像算法.分析了高炉雷达料面回波信号干扰信号特征,从图像处理角度,设计多级滤波器对2D频谱图进行去噪处理分离出一条带状的料面回波信号区域.对料面距离估计问题,基于克拉美罗下界(Cramer-Rao lower bound,CRLB)提出一种先加权采样锐化料带峰脊再利用能量重心法估测料面距离频率的方法,生成3D料面点云模型,并利用CRLB评价本文算法性能.在恶劣条件下,实测高炉雷达料面回波信号的点云成像验证显示,本文方法优于传统寻峰法,能有效处理低信噪比信号,准确提取料面有效信息.同时料面距离频率估计精度更高,且相较于其他方法频率估计误差更接近CRLB下界.

基于模糊PID的环境适应型温控方法设计

环境温度是影响半导体温控的关键参数,实验表明常规模糊PID在应对大的环境温度斜率时鲁棒性能无法满足正常工作需求。针对这一问题,设计了一种新的环境适应型模糊PID控制方法,在原有的控制基础上加入基于环境温度信号反馈的模糊PID初值校正模块,并利用MATLAB对系统进行了仿真,最后在半导体激光温控平台上进行了实验验证。结果显示:相比普通的模糊控制算法,在大的环境温度斜率下,可以实现误差在±0.1℃内的稳定控制,鲁棒性明显提升。

基于机器视觉几何特征参数的大蒜根部尺寸预测

在出口大蒜的深加工工序中,如何精确快速地获取大蒜根部位置形状尺寸信息是实现自动化精准切须作业的关键步骤.以大蒜根部蒜胡的形状尺寸预测为研究目标,利用机器视觉技术提取大蒜的12个绝对形状特征建立大蒜特征训练集,通过建立回归预测模型,实现大蒜蒜胡周长的预测,并完成实验测试.测试结果表明,所建立的BP神经网络模型的预测值与实际值之间的平均绝对百分比误差为3.59%,SVR模型得到的平均绝对百分比误差为4.62%,两类预测模型均可实现对大蒜根部蒜胡周长的预测.

戛纳广告奖的游戏规划

六月的戛纳，阳光灿烂，天海蔚蓝，海风轻拂着棕榈阔叶，正是度假的好季节。因着全球广告人参加2001年第48届戛纳国际广告节，宁静的海滨小城热闹非凡。随着网页广告，报纸与海报等平面广告颁奖晚会的举行，更是热度急升。

大佛水治疗变应性鼻炎50例临床疗效观察

“大佛水”鼻喷雾剂,是近几年治疗变应性鼻炎比较新型的制剂。通过一年来对50例患者作了临床观察结果证实其有效率达96％,治愈率达60％。该药为长效鼻腔喷雾剂,一瓶15毫升药水可用一年,使用方便简单,是在社区医疗实践中值得推广使用的集预防、治疗、康复于一体的理想的鼻用新剂型。

比较代谢组学分析阿维拉霉素高产突变株代谢途径

阿维拉霉素(avilamycin,AVI)是一种寡糖类抗生素,因其具有较强的革兰氏阳性细菌抑制能力,被广泛应用于畜禽养殖。但传统的育种技术与不成熟的发酵工艺已成为限制其国产化的关键因素。基于已获得的利用核糖体工程技术改造的高产阿维拉霉素突变菌株,本研究采用比较代谢组学技术探究其与出发菌株的胞内代谢差异。利用GC-MS技术对发酵至第4、6、8天的菌丝体进行分析,共检测出112种化合物,经NIST谱库对比后精确匹配到29种胞内代谢物。二维主成分分析(principal component analysis,PCA)表明突变菌株与出发菌株的不同时间点代谢物有明显差异,通过正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)得到11种胞内差异代谢物。KEGG代谢通路富集显示阿维拉霉素的合成主要与碳水化合物代谢和氨基酸代谢密切相关,且进一步筛选出6种关键差异代谢物:L-缬氨酸、L-丝氨酸、L-丙氨酸、D-半乳糖、D-纤维二糖和D-葡萄糖。突变菌株中这些代谢物的上调增强了其代谢流,使其在罐上发酵8d时,阿维拉霉素产量较出发菌株提高76.86%。本研究的开展为后续阿维拉霉素发酵工艺理性优化提供了参考。