乙肝血清学标志物定量和HBV DNA定量联合检测在乙肝病毒感染诊断中的应用

目的分析乙肝患者的血清标志物和乙肝病毒(HBV)DNA联合检测在HBV感染诊断中的应用价值。方法以2013年6月-2015年6月在珠海市妇幼保健院就诊的120例乙肝患者血清样本作为研究资料,分别采用ELISA定性试验和实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测HBV血清标志物(HBs Ag、抗-HBs、HBe Ag、抗-HBe、抗-HBc)和HBV DNA含量。结果Ⅰ组HBV DNA阳性率为96.15%;Ⅱ组HBV DNA阳性率为48.08%;Ⅲ组HBV DNA阳性率为4.76%。Ⅰ组HBV DNA定量显著高于Ⅱ、Ⅲ两组(P<0.01);Ⅱ组HBV DNA定量显著高于Ⅲ组(P<0.05)。HBV DNA与HBs Ag检出符合率分别为73.33%和72.50%,两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论乙肝血清标志物定量与HBV DNA定量联合检测在诊断HBV感染过程中起互相补充的作用,诊断结果更加准确,可提供更有效的参考依据。

孕早中期孕妇轻度甲状腺功能减退症的影响因素及与不良妊娠结果的关系研究

目的研究妊娠早、中期孕妇轻度甲状腺功能减退症(简称甲减)的影响因素及其与不良妊娠结果的关系。方法择取该院就诊的120例孕早中期轻度甲减孕妇作为研究组,同期孕检的30例健康孕早中期孕妇作为对照组,检测2组孕妇的血清促甲状腺激素(TSH)、游离甲状腺素(FT4)的含量,分析影响甲减的影响因素并筛选危险因素,并记录对比各组孕产妇妊娠结局的情况。结果根据多因素回归分析结果,筛选出碘摄入不足、孕前半年吸烟史、孕中半年吸烟史、孕前半年饮酒史、孕中半年饮酒史、孕前/中抑郁焦虑共7个危险影响因素;与对照组相比,不同甲减危险因素组孕妇TSH、FT4分泌量差异均有统计学意义(P<0.05),其中碘摄取不足组、吸烟史组的TSH分泌、FT4分泌异常改变更加明显(P<0.05)。与对照组相比,研究组孕妇的妊娠期糖尿病、妊娠期高血压、早产、流产、死胎的发生率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论妊娠期甲减危害大,并发症发生率高,可严重影响妊娠结局及胎儿健康,应加强妊娠期甲减的筛查与治疗。

逐步回归分析快速鉴别诊断地中海贫血与缺铁性贫血

目的快速鉴别诊断地中海贫血与缺铁性贫血。方法利用红细胞指数建立鉴别诊断地中海贫血与缺铁性贫血的逐步回归方程,并用盲法分析评价其准确鉴别性。结果该方程鉴别诊断地中海贫血与缺铁性贫血的准确度为86.82%,对地中海贫血和缺铁性贫血预测的灵敏度、特异度、约登指数分别为94.29%、79.66%、73.9和76.92%、90.52%、67.4。结论红细胞指数逐步回归方程鉴别诊断地中海贫血与缺铁性贫血简便、快速、敏感,适合基层单位开展。

2001—2009年珠海市新生儿先天性甲状腺功能减低症状况分析

目的调查分析珠海市2001—2009年新生儿先天性甲状腺功能减低症(甲低)的筛查结果,探讨新生儿疾病筛查在出生缺陷干预中的重要作用。方法筛查采用干滤纸片法测定全血中的促甲状腺素(thyroid-stimulating hormone,TSH),确诊使用化学发光法检测患儿血清中的游离T3(FT3)、游离T4(FT4)以及TSH。结果9年全市共筛查92 461例新生儿,筛查率呈逐年上升趋势,平均筛查率65.93%。检出甲低患儿47例,发病率为1/1 967,比全国1/3 009的发病率高(2=8.40,P<0.005)。结论珠海虽为海滨城市,但新生儿先天性甲低患病情况不容乐观。通过加强新生儿疾病筛查工作的普及,对先天性甲低患儿进行早期诊断、早期治疗,可有效地控制该出生缺陷给社会和家庭带来的危害。

肺炎支原体抗体两种检测方法的对比分析

目的探讨被动凝集法（PPA）和间接免疫荧光法（IIFA）在肺炎支原体（MP）感染早期诊断中的应用价值。方法对该院儿科2015年1-12月疑因MP感染的2 517例住院患儿采用PPA和IIFA检测血清MP-IgM的结果进行回顾性分析,比较两种方法检测MP-IgM阳性率的差异。结果 PPA和IIFA各检出MP-IgM阳性976例和614例,阳性检出率分别为38.77%和24.39%,PPA阳性检出率明显高于IIFA,差异有统计学意义（P〈0.05）。两法的阳性符合率为80.29%,阴性符合率为74.61%,总符合率为76.00%。同时采用两种方法检测MP-IgM,阳性检出率可达到43.58%,敏感性明显高于任一单一方法。结论 PPA检测MP-IgM较IIFA敏感,两者联合检测可以提高MP感染诊断的阳性率。

游离雌三醇在孕中期唐氏综合征筛查中的临床应用价值评估

目的探讨游离雌三醇（unconjugated estriol，uE3）在孕中期唐氏综合征（Down’s syndrome，DS）联合多指标筛查中的应用价值。方法用时间分辨荧光免疫法测定孕中期个体血清中的甲胎蛋白（AFP）、游离人类绒毛膜促性腺激素B亚单位（FhCG／3）及uE3水平，再采用随机配套的Wallac 2T专用DS风险分析软件进行数据分析，比较二联（AFP，FhCGS）和三联（AFP，F hCGβ和uE3）DS筛查的效果以评价uE3在DS筛查中的应用价值。结果通过对珠海市妇幼保健院2005年1月～2007年6月孕检的5781名孕中期的孕妇进行产前筛查，检出DS胎儿7例，漏诊1例，筛查人群中DS的发病率为1／723。以1：250作为阳性切值时，DS三联和二联筛查的筛查假阳性率分别为3．37％和7．70％，前者明显低于后者（Х^2=103．38，P〈0．005）；用两种筛查方案检出的DS阳性率分别为1．20‰和1．0‰，前者高于后者（Х^2=7．70，P〈0．01）。结论孕中期在DS二联筛查的基础上增加uE3指标，能更有效地筛查出DS。此对降低DS筛查的漏检率、减少创伤性的产前诊断都有着积极意义和实用价值。

用1升全血中平均血红蛋白密度鉴别诊断缺铁性贫血和地中海贫血特征

目的探讨1升全血中平均血红蛋白密度(MDHLWB)鉴别诊断缺铁性贫血(IDA)和地中海贫血特征(TT)的临床价值。方法根据物理学"密度"的概念建立了一个新的红细胞参数MDHLWB[MDHLWB=(MCH/MCV×10-3)×RBC计数]。随机选取经血液表型分析诊断的150例IDA和166例TT成年病例,用ROC曲线分析确定MDHLWB鉴别诊断TT和IDA的cutoff值。以分子诊断并结合铁代谢指标分析作为金标准,将MDHLWB和文献报道的IDA和TT鉴别诊断指标用于296例临床小细胞低色素贫血个体的鉴别诊断以评估MDHLWB的临床应用价值。结果 MDHLWB鉴别成年男、女IDA与TT的最佳cutoff值分别为男1.736和女1.493。MDHLWB诊断TT的敏感性(SE)、特异性(SP)、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)、诊断效率(EDF)和约登指数(Youden's index,YI)分别为96.32%、90.98%、92.90%、95.28%、93.92%和0.873,优于其他鉴别诊断指数。结论 MDHLWB可快速、有效地鉴别诊断单纯性的IDA和TT。

肺炎衣原体抗体两种检测方法的对比分析

目的探讨酶联免疫法(ELISA)和间接免疫荧光法(IIFA)在肺炎衣原体(CP)感染早期诊断中的应用价值。方法对该院儿科2015年1月至2016年7月疑因CP感染的225例住院患儿采用ELISA和IIFA检测血清CP-IgM结果进行回顾性分析,比较两种方法检测CP-Ig M阳性率的差异。结果 ELISA和IIFA各检出CP-IgM阳性81例和87例,阳性检出率分别为36.0%和38.7%,ELISA和IIFA阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05)。两法的阳性符合率为94.2%,阴性符合率为96.5%,总符合率为96.9%。同时采用这两种方法检测CP-Ig M,则阳性检出率可达到39.1%,敏感性明显高于任一单一方法。结论IIFA检测CP-IgM较ELISA敏感,两者联合检测可以提高CP感染诊断阳性率,酶联免疫法ELISA抗体诊断试剂适合在临床检测中推广应用。

抗精子抗体含量的检测及其临床意义

目的探讨抗精子抗体(AsAb)含量与不孕、不育症的关系。方法采用酶联免疫吸附(ELISA)法对不孕、不育组和对照组的血清进行抗精子抗体含量定量检测。结果不孕、不育组血清中抗精子抗体含量明显高于对照组(P<0.01)。结论抗精子抗体是引起免疫性不孕不育的常见原因之一。

反复体外受精-胚胎移植失败的患者T辅助细胞免疫应答方式的研究

目的:研究不明原因反复体外受精—胚胎移植(试管婴儿,IVF-ET)失败的患者机体T辅助细胞1(Th1)及T辅助细胞2(Th2)免疫应答方式,为治疗不明原因反复体外受精-胚胎移植失败提供理论依据。方法:将不明原因的三次及三次以上IVF-ET失败的患者作为研究对象,一个周期IVF-ET成功妊娠的患者作为对照组,抽取非治疗周期静脉血分离单个核细胞并于37℃,5%CO2培养箱中培养72h,分离上清,ELISA法测定上清液中INF-γ/IL10含量,计算INF-γ/IL10的比值,从而反映机体Th1、Th2细胞的免疫应答方式。结果:反复IVF-ET失败的患者9例中有7例TH1细胞因子(INF-γ)浓度是Th2细胞因子(IL10)的3倍,有显著性差异;反复IVF-ET失败的患者9例中有4例机体Th1细胞因子(INF-γ)是Th2细胞因子(IL10)的9倍,呈Th1强势反应,而对照组9例中仅1例且发生早期流产,有统计学意义。结论:部分反复体外受精-胚胎移植失败的患者机体Th1 Th2免疫应答失衡,呈Th1优势反应,提示细胞免疫过强。

国产ELISA试剂盒检测ξ-珠蛋白链快速筛查α-珠蛋白生成障碍性贫血的性能评价

目的评价国产酶联免疫吸附测定（ELISA）试荆盒检测ξ-珠蛋白链快速筛查a-珠蛋白生成障碍性贫血的性能。方法选择珠蛋白基因型已经基于PCR技术确诊的临床血液标本265份，其中珠蛋白基因型正常93例，静止型a-珠蛋白生成障碍性贫血（-a／aa）22例，东南亚缺失型（--SEA）a-珠蛋白生成障碍性贫血136例，HbH病7例和B-珠蛋白生成障碍性贫血并发（--SEA）a-珠蛋白生成障碍性贫血6例及HbG并发（--SEA）a-珠蛋白生成障碍性贫血1例，采用双盲方式分别用海泰生物技术股份有限公司（简称海泰生物）和美国United Biotech（简称美国UBI）公司生产的固相ELISA试剂盒检测ξ-珠蛋白链筛查a-珠蛋白生成障碍性贫血并以基于PCR技术的诊断结果作为金标准，对这两种ELISA试剂盒筛查a-珠蛋白生成障碍性贫血的性能进行评估。结果海泰生物与美国UBI生产的ELISA试剂盒均能准确地筛出（--SEA）a-珠蛋白生成障碍性贫血、争珠蛋白生成障碍性贫血并发（--SEA）a-珠蛋白生成障碍性贫血和HbG并发（--SEA）a-珠蛋白生成障碍性贫血以及正常血样，但两者既不能筛出静止型a-珠蛋白生成障碍性贫血，也不能完全检出HbH病；检测（--SEA）基因总的灵敏度、特异度、准确度、阴性预测值（NPV）、阳性预测值（PPV）和诊断效率（EDF）（分别为98％，97．5％，98．9％，98％，100％和98．9％）与后者相比（分别为98．7％，98．37％，99．2％，98．7％，100％和99．2％），差异无统计学显著性意义（P均〉0．9）。两者诊断（--SEA）a-珠蛋白生成障碍性贫血的效率均为100％。结论固相ELISA法是一种高度灵敏、高度特异和非常可靠的筛查（--SEA）a-珠蛋白生成障碍性贫血的方法。海泰生物生产的（--SEA）a-珠蛋白生成障碍性贫血ELISA检测试剂盒与同类进口产品相比，具有成本低、需要样品量少的优势，非常适合于地贫高发区大人群的a-珠蛋白生成障碍性贫血筛查。

快速诊断试剂在新生儿促甲状腺素检测中的应用

目的:评价快速诊断试剂测定新生儿促甲状腺激素(TSH)的分析性能。方法:分别用化学发光免疫测定试剂盒、时间分辨免疫荧光测定试剂盒和金标快速检测试剂盒测定相应要求标本的TSH含量。结果:金标快速检测与时间分辨免疫荧光测定及化学发光免疫测定比较,检测效果更好,特异性与敏感性都比较高。结论:金标快速检测测定TSH具有重复性好、可报告范围宽、灵敏度高等优点,适合于临床应用。

珠海地区妇幼保健院大肠埃希菌产ESBLs的基因型研究

目的 了解珠海地区妇幼保健院产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌基因特点.方法 收集珠海地区两家妇幼保健院临床分离的316株大肠埃希菌,用法国生物梅里埃公司VITEK-32全自动微生物分析仪检测其表型,再用双纸片法确定,所有产酶菌株用PCR的方法扩增其TEM,CTX M和SHV基因.结果 316株大肠埃希菌检出138株产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,占43.7％（138/316）;138株产ESBLs大肠埃希菌PCR检测的结果为TEM型阳性的有72株,CTX M型阳性的有59株,SHV型阳性的有7株,检出率分别为52.2％（72/138）,42.8％（59/138）和5.1％（7/138）;同时携带TEM型和CTX M型的共23株,占16.6％（23/138）.结论 珠海地区妇幼保健院的大肠埃希菌产ESBLs的阳性率高,其基因型别主要以TEM型和CTX-M型为主,同一菌株可携带有两种型别的ESBLs.

超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌院内感染分布及耐药性研究

目的了解该院大肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的现状并分析其耐药性,以指导临床合理使用抗菌药物。方法采用K-B法对临床分离的87株大肠杆菌进行药敏试验,并回顾性分析其在临床的分布情况,使用WHONET 5.4分析菌株药敏情况。结果 87株大肠杆菌检出41株产ESBLs,占47.26%(41/87);标本主要来自尿液、伤口分泌物(包括恶露)、痰液、血液;药敏试验显示,亚胺培南、美罗培南的敏感率为100%,哌拉西林/他唑巴坦敏感率为90.25%,阿米卡星敏感率为82.93%,呋喃妥因敏感率为73.16%,其他药物的敏感率均小于50.00%。结论该院大肠杆菌产ESBLs的阳性率处于较高水平,对亚胺培南、美罗培南以外的16种药物均存在不同程度的耐药性,医院要加强抗菌药物的分级使用管理,临床医师应结合菌株的药敏试验选择最佳的抗菌药物,以减少医院感染的发生。

多重耐药铜绿假单胞菌的金属酶表型与基因型研究

目的研究临床分离铜绿假单胞菌金属酶产生及其相关基因携带情况。方法采用头孢他啶和亚胺培南分别进行铜绿假单胞菌金属酶初筛,用2-巯基丙酸(2-MPA)或EDTA组合纸片试验检测耐亚胺培南(IMP)和耐头孢他啶(CAZ)的铜绿假单胞菌进行表型确证,初筛试验阳性菌株用PCR法检测金属酶基因型。结果多重耐药菌株金属酶初筛实验阳性率为10.9%,用CAZ/EDTA、CAZ/2-MPA、IMP/EDTA和IMP/2-MPA检测多重耐药菌株金属酶阳性率分别为7.5%、7.9%、8.8%和9.5%。PCR扩增结果ipm1和vim基因阳性率分别达10.4%、8.3%,尚未发现spm、sim1及gim阳性菌株。结论不同方法对金属酶检测结果不尽相同;携带ipm1和vim金属酶基因是该院多重耐药的铜绿假单胞菌耐碳青霉烯类的主要原因。

荧光PCR-探针熔解曲线法在缺失型α-地中海贫血快速诊断中的应用

目的探讨荧光PCR-探针熔解曲线法(PMCA)在缺失型α-地中海贫血(简称“α-地贫”)快速诊断中的应用。方法收集2019年10~12月珠海市妇幼保健院2261份血样本和35份羊水样本。通过双盲法,采用PMCA和单管多重PCR技术(gap-PCR)同时对上述2296份临床样本进行3种常见缺失型α-地贫基因检测,结果不符样本用DNA测序技术以确认。结果2296份临床样本中,除PMCA检测出1例未知突变基因之外,其余与gap-PCR检测结果一致,两者符合率为99.9%,此例经DNA测序显示在探针覆盖区域发生了单个碱基突变(A>G)。结论PMCA技术能快速准确检测3种常见缺失型α-地贫基因,可作为gap-PCR技术的替代或验证方法,也可用于大规模人群筛查及产前诊断。

酶联免疫吸附测定法和血液学分析法筛查缺失型α-地中海贫血的比较研究

目的评价并比较酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测胎胚型ζ-珠蛋白链和传统的血液学分析法在诊断缺失型α-地中海贫血(地贫)中的临床诊断价值。方法以双盲试验对287份珠海市妇幼保健院门诊需做血红蛋白(Hb)分析的血样同时采用ELISA法和血液学分析法分别检测--SEA携带者和α-地贫表型,并以基于聚合酶链反应(PCR)技术作为诊断标准,对两种方法筛查--SEA携带者的敏感度、特异度、准确性进行评估并比较其诊断--SEA携带者的临床应用价值。结果ELISA法诊断--SEA携带者总的敏感度、特异度、准确性、阴性预测值和阳性预测值分别为95·0%、100·0%、97·9%和96·5%及100·0%,显著高于血液学分析法的74·4%、96·4%、86·1%、83·5%和90·9%,P均<0·01)。ELISA法不但能有效地检出--SEA携带者,而且还能鉴定出--SEA合并β-地贫特征或异常Hb的个体,且不受缺铁的干扰,但其对HbH病和α-地贫-2和αT-地贫基因携带者的诊断价值不及血液学分析法(P均<0·05)。结论ELISA法对--SEA携带者,特别是--SEA/αα的诊断价值优于传统的血液学分析法,加之该法简便快速、经济实用且易自动化,故非常适合于(--SEA)α-地贫的大样本人群遗传筛查和临床样品的常规检测。

血液学指标对儿童不同类型地中海贫血并IDA的临床价值

目的研究不同类型珠蛋白生成障碍性贫血并发缺铁性贫血(IDA)儿童各项血液学指标的变化,为指导临床筛查和治疗奠定理论依据。方法择取2012年2月至2015年3月就诊的360例贫血患儿,通过DNA诊断法及铁代谢筛查法确定患儿的基因类型及其相应铁代谢指标情况,并将患儿分为地贫组160例、地贫合并IDA组170例和IDA组30例,同时选择30名健康儿童为对照组,检测上述各组的血液学指标并进行统计学分析。结果与对照组比较,各组地贫患儿的红细胞相关参数均有差异性(P均<0.05),其中α地贫轻型及β地贫杂合子型患儿表现小红细胞低色素症状,而α地贫Hb H型及β地贫纯合子型患儿表现中重度贫血症状;与非合并IDA组相比,合并IDA型患儿的血液学参数均有统计学意义(P均<0.05),且部分且铁代谢指标有显著性差异(P<0.05);与男性组患儿相比,女性组患儿合并IDA及IDA型的患病例数普遍高于男性组患儿例数。结论应密切关注正常儿童及地贫患病儿童的各项血液学指标变化,为贫血症的有效预防和临床筛查奠定理论基础。

红细胞指数数学模型在鉴别诊断小儿地中海贫血和缺铁性贫血中的价值

目的简便快速筛查地中海贫血患儿。方法利用红细胞指数建立鉴别诊断地中海贫血与缺铁性贫血的逐步回归方程数学模型,并用盲法分析评价数学模型的准确鉴别性。结果该模型对TT鉴别诊断的灵敏度为98.41%,特异度为33.93%;对IDA鉴别诊断的特异度为98.41%,灵敏度为33.93%。结论本数学模型鉴别诊断地中海贫血与缺铁性贫血简便、快速、敏感,适合快速筛查地中海贫血。

孕妇叶酸代谢相关基因与胎儿先天缺陷的相关性研究

目的分析叶酸代谢相关基因的多态性与胎儿先天缺陷的相互关系，探讨遗传性因素对胎儿先天缺陷的影响。方法 回顾性分析132例不良妊娠孕妇（病例组）及同期就诊的150例正常妊娠孕妇（对照组）5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因的C677T、A1298C位点和甲硫氨酸合成酶还原酶（MTRR）基因A66G位点的基因型和基因频率，及其血清叶酸、维生素B12（Vit B12）和同型半胱胺氨酸（HCY）水平之间的差异。结果 病例组的血清叶酸与Vit B12呈正相关，与HCY呈负相关，仅有胎儿骨骼系统缺陷孕妇（6例）的HCY高于对照组（t＝3.409，P〈0.05）。病例组MTHFR基因C677T、A1298C位点和MTRR基因A66G位点的基因型频率与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0.05）；以上三个基因位点的C/T、A/C、A/G基因频率与对照组比较，差异均无统计学意义（P〉0.05）。病例组和对照组MTHFR基因A1298C位点与C667T位点的不同基因型组合差异无统计学意义（P〉0.05），未见有协同作用。结论 孕妇的叶酸代谢相关MTHFR和MTRR基因的多态性对母体相应的代谢产物水平变化有一定影响，但其与胎儿先天缺陷发生的遗传学机制的相关性有待更多的大样本研究结果深入探讨。