森林草莓FveD27的表达特性和功能

【目的】新型植物激素独脚金内酯是调控植物分枝发育的关键因子,但独脚金内酯在草莓生长发育中的作用尚不清楚。揭示森林草莓(Fragaria vesca)中独脚金内酯生物合成关键基因DWARF27(D27)的表达特性及主要功能,探索FveD27在草莓分枝以及生长发育过程中的作用,为研究草莓植株构型奠定理论基础。【方法】本研究选用森林草莓作为试验材料,利用RT-PCR方法克隆FveD27的编码区序列,利用MEGA 6.0分析草莓FveD27与苹果、拟南芥等物种中D27的系统进化关系;构建FveD27与GFP的融合载体,利用注射烟草叶片的方法对FveD27进行亚细胞定位分析;通过qRT-PCR技术对FveD27在森林草莓不同器官的表达水平进行定量分析,同时构建FveD27启动子与GUS融合表达载体并通过农杆菌介导法将其转化到森林草莓中,利用GUS染色进一步分析FveD27的表达特性;构建FveD27过表达载体并通过农杆菌介导的叶盘法进行稳定遗传转化,获得FveD27过表达草莓株系。【结果】从森林草莓中克隆出编码区长度为789 bp的FveD27序列;烟草的亚细胞定位结果表明FveD27定位在叶绿体;FveD27在森林草莓组织器官中的表达量由高至低依次为幼叶、茎尖、叶柄、成熟叶、根;克隆出长度为1670 bp的FveD27启动子序列,GUS活性分析结果显示转pFveD27::GUS融合基因草莓植株的幼叶和芽等部位GUS活性较强,而成熟叶与叶柄部位GUS活性较弱,根部几乎无GUS活性,GUS染色分析揭示的基因表达结果与qRT-PCR结果相符;构建了FveD27过表达载体并通过农杆菌介导获得了过表达FveD27的草莓转基因株系,表型调查结果表明过表达FveD27能够显著抑制新茎分枝的形成,同时增加花序数量。【结论】FveD27具有调控森林草莓新茎分枝发育、花序数量等功能。研究结果可为调控草莓新茎分枝数量和产量等提供新思路。

贵州农村老年人轻度认知功能损害患病风险评估模型研究

目的通过机器学习分析脑健康生活方式相关因素和人口统计学特征,实现对贵州农村老年人轻度认知功能损害患病风险的评估效果研究。方法 2019年7—8月,采用多阶段整群抽样方法,选取贵州省1 235名60岁及以上的农村老年人为研究对象,进行问卷调查和体格检查。采用简易智能状态量表(mini-mental state examination,MMSE)进行认知功能检测,并基于12项脑健康生活方式相关因素和4项人口统计学特征进行重要特征及最优特征个数的选择。采用逻辑回归和随机森林算法构建贵州农村老年人轻度认知功能损害的患病风险评估模型,并使用精确率、准确率、灵敏度、特异度、F1分数和受试者工作特征曲线下面积(area under curve,AUC)综合评估模型效能,采用Delong法检验两模型间AUC值的差异。结果共检出轻度认知功能损害291例,总检出率为23.56%(291/1 235)。逻辑回归和随机森林模型评估贵州农村老年人轻度认知功能损害患病风险的AUC值分别为0.758和0.820,差异有统计学意义(均P<0.05)。其中随机森林模型的评估效果更佳,精确率为0.823、准确率为0.805、灵敏度为0.874、特异度为0.767、F1分数为0.838,各指标均优于逻辑回归模型;且经过10折交叉验证,随机森林模型也更具稳定性。结论脑健康生活方式相关因素结合人口学特征因素能较准确地评估贵州农村老年人轻度认知功能损害患病风险,且随机森林模型评估效能优于逻辑回归模型。