顺铂处理后剪接因子SRSF12 mRNA异构体在多种细胞中的变化

目的用梯度浓度顺铂处理多种细胞后检测剪接因子SRSF12的mRNA异构体并分析其变化.方法用梯度浓度顺铂处理肺癌细胞A549和H1299、人胚肾细胞293FT以及宫颈癌细胞系Si Ha、Ca Ski、C33A细胞后提取总RNA,利用半定量RT-PCR检测分析SRSF12基因mRNA异构体及相对水平的变化.结果在除Caski细胞外的5种细胞中检测到了2种异构体(Isoform-a、b),且随着处理顺铂浓度的增加,Isoform-a的比例有增加趋势,Isoform-b的比例变化在A549及293FT细胞中变化不明显,在H1299及C33A细胞中渐弱,在Siha细胞中表达较弱且2种异构体均有渐弱趋势.结论在顺铂处理后,SRSF12的表达不仅具有组织特异性还具有细胞特异性.

阿帕替尼联合大剂量丹参酮IIA对肺腺癌A549细胞株凋亡及Bim异构体的影响

目的:观察阿帕替尼与丹参酮IIA单药及不同时序联合用药方案对人肺腺癌细胞A549凋亡的影响,并探究其作用机制。方法:培养肺癌A549细胞,用梯度浓度的阿帕替尼(0、5、10、20、40、80μmol/L)及丹参酮IIA(0、5、10、20、40、80μmol/L)分别处理A549细胞,应用CCK8法检测其对细胞增殖的抑制作用;流式细胞技术(Annexin V/PI双染法)检测不同用药组作用48 h后的细胞凋亡率;半定量RT-PCR检测凋亡相关基因Bim异构体的表达情况。结果:阿帕替尼及丹参酮IIA单药对A549细胞的增殖均有抑制作用,且呈现浓度依赖性。两种药物联合使用时,联合用药组增殖抑制和凋亡率优于单药组和改变药物顺序的序贯组。结论:阿帕替尼与丹参酮IIA单药以及联合用药均可抑制A549细胞的增殖并促进凋亡;最佳联合方案为阿帕替尼联合丹参酮IIA同时使用,细胞凋亡率最高;其作用机制之一可能是联合用药通过转录和mRNA选择性剪接来上调Bim L基因的表达,从而促进细胞凋亡。