溶藻弧菌外膜蛋白对凡纳滨对虾免疫功能的影响

应用溶藻弧菌外膜蛋白(Outer membrane protein,OMP)注射凡纳滨对虾Penaeus vannamei,测定其对凡纳滨对虾免疫指标的影响以及对凡纳滨对虾的免疫保护作用。注射OMP0.5、1.0和1.5mg.ml-1后3个实验组的凝集效价均显著高于对照组(p<0.05),但实验组之间差异不显著,而血清溶菌活力在注射后急剧上升,在6h时达到最高,随后下降,到96h时基本恢复正常。0.5和1.0 mg.ml-1OMP组的抗菌活力在12h时达到最高值,且在12—72 h之间均明显高于对照组和1.5 mg.ml-1组(p<0.05)。血清溶血活力在注射后3h达到最高值,在1—96h内,实验组的溶血活力维持较高水平,均高于对照组。0.5、1.0和1.5mg.ml-13个OMP实验组对凡纳滨对虾的免疫保护率分别为65.9%、75.6%和70.7%。

石斑鱼鱼虱病的病理学研究

本文报道南海鱼虱[CaligusnanhaiensisWu＆Pan]，引起的石斑鱼鱼虱病病理变化的研究结果。南海鱼虱对青石斑鱼[Epinephelusawoara（TemmincketSchlegel）]的危害主要是由于桡足幼体或对寄主组织的大量摄食，导致鳃部组织的完整性受到破坏，使寄主的生理功能受损害而引起病变。患病鱼的红细胞数、血清钠、钾、钙、血糖、尿素氛、胆固醇、白蛋白和总蛋白的含量与健康鱼比较，仅见红细胞数减少和血清钙的增加变化明显。

石斑鱼鱼虱病的研究──Ⅰ.南海鱼虱,新种Caligus nanhaiensis n.sp.

记述华南地区网箱养殖石斑鱼鱼虱病病原──南海鱼虱，新种Caligusnanhaiensisnsp．形态的光镜和电镜观察结果，并对南海鱼虱与相似种C．seriolaeYamaguti，1936和C.tanagoYamaguti，1939的形态特征进行详细比较。

石斑鱼鱼虱病的研究 Ⅴ.盐度对南海鱼虱存活的影响

记述了盐度对南海鱼虱CaligusnanhaiensisWu＆Pan不同发育期的影响。在盐度为10以上时，南海鱼虱的幼虫和成虫对盐度的变化有较大的忍耐性，盐度在10—40之间对幼虫和成虫存活没有明显的影响，24h的实验表明，存活率均为100％。然而，虫卵对盐度的变化较为敏感，虫卵孵化的最适盐度范围为20—35，超出此范围虫卵孵化受到影响。当盐度为10时，虽然孵化率可达100％，但孵出的幼虫活动能力差，多数附着于卵囊上而不能正常活动，不久即死亡。盐度为40时，卵子几乎不能孵化。在淡水中，虫卵、幼虫和成虫均不能正常生存。

南海鱼类寄生粘孢子虫的研究——Ⅰ.角形虫属五新种

在南海鱼类胆囊中发现寄生粘孢子虫(Myxosporidia)角形虫属Ceratomyxa五新种。其中的肾形角形虫C.reniforma和石斑角形虫C.epinephela寄生于赤点石斑鱼Epinephelus akaara,桂山角形虫C.guishanensis寄生于青石斑鱼E.awoara,陈氏角形虫C.cheni寄生于黄鳍鲷Sparus lalus,(鱼祭)角形虫C.clupanoda寄生于斑(鱼祭)Clupanodon punctatus。

南海鱼类寄生粘孢子虫──Ⅱ．篮子鱼两极虫与尖吻鲈尾孢虫两新种

篮子鱼两极虫，新种Ｍｙｘｉｄｉｕｍｓｉｇａｎｕｍｓｐ．ｎｏｖ．寄生于篮子鱼Ｓｉｇａｎｕｓｓｐ．胆囊。孢子缝面观菱形，正面观椭圆形。孢子表面具有６条条纹。孢子长１１．４μｍ，宽６．９μｍ；极囊直径３．３μｍ；囊间距２．８μｍ。尖吻鲈尾孢虫，新种Ｈｅｎｎｅｇｕｙａｌａｔｅｓａｓｐ．ｎｏｖ寄生于尖吻鲈Ｌａｔｅｓｃａｌｃａｒｉｊｅｒ鳃部。孢子呈倒梨形。孢子长８．９μｍ，宽５．７μｍ，厚４．９μｍ；极囊长２．８μｍ，宽１．８μｍ；尾长１６．０μｍ。

短吻鲾寄生粘孢子虫拟单囊虫属—新种

1989年8月,从大亚湾短吻鲾Leiognathus brevirosiris的胆囊中发现粘孢子虫拟单囊虫属一新种,定名为鲾拟单囊虫Coccomyxa leiognatha sp.nov.,该种孢子前部较宽大,中后部窄小,外观似手榴弹状,体前部具一棒状或椭圆形极囊。

人工养殖鲍的疾病及其防治技术

鲍肉质鲜美，营养丰富，且具有较高的药用价值，自古以来誉以海之珍品，是目前全球海水养殖动物中名贵的品种之一。我国近几年来也开始发展鲍的人工养殖，特别是福建、辽宁、山东、广东、海南等地沿海，鲍养殖发展非常迅速，各地已形成了较大的生产规模。然而，随着鲍养殖规模的不断扩大和集约化程度的提高，水质环境和养殖条件难以满足需要，

地衣芽孢杆菌胞外产物消化活性的研究

将地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis的胞外产物置于不同的pH、温度和金属离子条件下,分别测定其蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活性的变化。结果表明,当pH为7.5—8.5时胞外产物表现出较高的蛋白酶和淀粉酶活性,胞外产物消化脂肪的最适pH为9.0—10.0。胞外产物水解淀粉、脂肪和蛋白质最适温度分别为60—80、40—60和50—70℃,60℃时蛋白酶活力最大。试验测定了8种金属离子对胞外产物活性的影响,发现Mg2+、Zn2+Cu2+可抑制其水解蛋白质,而Ca2+、Fe3+、Mn2+和Ba2+却无此影响;在胞外产物消化脂肪底物时Co2+、Fe3+、Mn2+和Ba2+均能抑制其活力,而Mg2+、Zn2+能使其消化活力升高,与前者相比,金属离子对淀粉水解的影响相对较小,仅Cu2+有一定的抑制作用,其它离子对其均无明显的影响。还研究了不同胞外产物浓度与生物学活性的相关性,发现当反应体系中胞外产物浓度升高时水解蛋白质的活力会相应降低,但对脂肪的消化活力则与胞外产物的浓度呈正相关。反应体系中胞外产物的浓度在0—132.4μg.ml-1时其水解淀粉的活力随浓度的升高而升高,浓度为191.0μg.ml-1时活力最大,浓度大于191.0μg.ml-1时活力不再变化,稳定在一个较高的水平。

盐度和营养对凡纳滨对虾蜕壳和生长的影响

采用实验生态学方法以初始体质量为(2.01±0.02)g的凡纳滨对虾为研究对象,投喂不同蛋白水平饲料,实验周期30 d,研究了盐度和饲料蛋白水平对凡纳滨对虾蜕壳和生长的影响。实验采用5×3析因设计,盐度梯度设置为6、12、18、24、30五个水平,饲料蛋白水平梯度设置为30%、36%、42%三个水平。结果表明:(1)对虾蜕壳相对增重率呈现出随盐度上升而降低的变化趋势,以盐度为6时蜕壳相对增重率为最高。盐度和饲料蛋白水平及其交互作用对实验对虾蜕壳相对增重率影响差异显著(P<0.05);对虾的特定生长率随盐度升高而上升,盐度和饲料蛋白水平对特定生长率影响差异显著(P<0.05),其交互作用对特定生长率影响差异不显著。(2)实验对虾的蜕壳频率,在低盐度水平下随盐度的增加而显著增加(P<0.05),盐度18时蜕壳频率达到最高,之后随盐度的升高蜕壳频率下降,差异不显著。各盐度水平下,以中等蛋白质水平饲料组(36%)对虾蜕壳频率较高。方差分析表明,盐度和饲料蛋白水平对蜕壳频率影响差异显著(P<0.05),其交互作用对蜕壳频率影响差异不显著。(3)对虾蜕壳间期随盐度升高呈先延长后缩短的变化趋势。盐度对对虾蜕壳间期影响差异显著(P<0.05),饲料蛋白水平单因子以及它和盐度的交互作用对对虾蜕壳间期影响不显著。

饵料系列对军曹鱼仔鱼生长、消化酶活力和体成分的影响

饵料是鱼类早期发育最重要的条件之一,并且随着个体发育,饵料类别不断变化。为了评定各种饵料的效果并筛选得到军曹鱼仔鱼早期发育阶段适宜的饵料组合,进行了本实验。军曹鱼仔鱼在750L桶中孵出并暂养2d,然后在水泥池中培育4d(3—6日龄),并投喂轮虫;在第7日龄,将240尾仔鱼随机平均分配至12个70L桶中,共分4组,每组3桶;7—15日龄,4组仔鱼分别投喂轮虫、卤虫无节幼体、桡足类和桡足类投;16—42日龄,分别投喂轮虫、卤虫无节幼体、桡足类和鱼糜。第42日龄,将全部仔鱼取样、称重并于-80℃保存备用。鱼体匀浆、离心后的上清液作为粗酶液用以测定蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等消化酶活力,还测定了粗蛋白、粗脂肪等主要体成分,并统计了生长指标。结果表明:(1)组IV的生长表现最佳;(2)组III的成活率最高;(3)饵料对三种酶的活力和体成分都有极显著的影响;(4)组III的蛋白酶活力、组I的淀粉酶活力和脂肪酶活力最高,尤其是组I的淀粉酶活力比其他各组高出6.8—11.9倍;(5)各组鱼体的粗蛋白含量均较相应饵料的低,而粗脂肪含量则比饵料的高。因此,可以认为:仔鱼长期饥饿时,消化酶可能存在补偿性分泌,并优先利用糖类和脂肪作为能源;军曹鱼仔鱼对脂肪的沉积效率较蛋白高。

海水鱼类寄生甲壳动物生物学研究现状及其存在问题

对海水鱼类寄生甲壳动物生活史、环境因子对鱼虱发育的影响、鱼虱的种间进货关系、形态结构与功能、生殖器官与繁殖等生物学问题研究现状进行描述，并对存在问题及今后的研究方向进行探讨。

美国红鱼血细胞观察

测定了美国红鱼(学名眼斑拟石首鱼Sciaenops ocellatus)的血液指标,红细胞密度为(1.95±0.37)×106个.mm-3,白细胞密度为(2.08±0.43)×104个.mm-3;血红蛋白含量为(6.65±1.06)g.L-1,红细胞渗透脆性为(0.40±0.06)g%,沉降速率为(1.15±0.10)mm.h-1。对美国红鱼外周血液进行涂片观察,在涂片上可区分出红细胞以及6种白细胞:血栓细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞和嗜碱性粒细胞;它们在总的白细胞中所占比例分别为(68.42±11.62)%、(14.50±9.25)%、(1.46±1.80)%、(13.01±7.73)%和(2.6±3.76)%,嗜碱性粒细胞的含量极少,不到1%;在涂片上还发现了较多未成熟的红细胞。对肝脏、脾脏、头肾和肾脏等4种造血组织中血细胞的发生过程进行了观察和测定。观察发现,眼斑拟石首鱼的头肾和肾脏可以产生各种类型的血细胞,是主要的造血器官;脾脏是产生淋巴细胞的重要场所;而肝脏则在眼斑拟石首鱼粒细胞发生中扮演重要角色。

军曹鱼血液指标及血细胞发生的观察

测定军曹鱼的血液指标,红细胞密度为2．69±0．86×106个/mm3,白细胞密度为1．50±0．09×104个/mm3;血 红蛋白含量为7．42±0．22g/L,红细胞渗透脆性为0．43±0．07g％,红细胞沉降速率为1．18±0．46mm/h。观察军曹鱼 外周血液涂片,可区分出红细胞、血栓细胞、淋巴细胞、嗜中性粒细胞和单核细胞,但没有发现嗜酸性粒细胞和嗜碱 性粒细胞。在外周血液涂片观察中还发现了较多未成熟的红细胞和嗜中性粒细胞以及少量正在分裂的红细胞。 血栓细胞、淋巴细胞、嗜中性粒细胞和单核细胞在白细胞中所占比例分别为61．20±6．30％,16．60±3．28％,16．00± 3．61％和6．20±3．90％。对肝脏、脾脏、头肾和中肾等四种造血组织进行了涂片观察,军曹鱼的血细胞主要在头肾 和肾脏产生;脾脏是军曹鱼粒细胞发生的另一个场所,而肝脏也具有产生粒细胞和淋巴细胞的作用。

中草药复合益生菌制剂对凡纳滨对虾生长、抗病力及水质的影响

将枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌等比例混合,制成芽孢杆菌制剂;将芽孢杆菌制剂与粪肠球菌、嗜酸乳杆菌等比例混合制成复合益生菌制剂;将分别用3种芽孢杆菌发酵的中草药等比例混合制成中草药芽孢杆菌制剂;将分别用5种益生菌发酵的中草药等比例混合,制成中草药复合益生菌制剂。在饲料中分别添加4种益生菌制剂（活菌为2×10~7 cfu/g）,研究4种制剂对凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）生长、抗病力及水质的影响。结果表明：1）4种益生菌制剂均可提高凡纳滨对虾的成活率、增重率和饲料利用率（P〈0.05）,中草药益生菌制剂组的促生长效果优于益生菌制剂组,以中草药复合益生菌制剂组促生长效果为最佳（P〈0.05）;2）4种益生菌制剂均可维持对虾养殖水体p H值、氨态氮和亚硝酸盐含量的稳定（P〈0.05）,中草药益生菌制剂对水质的改良效果优于益生菌制剂（P〈0.05）;3）用1×10~8 cfu/m L的哈维氏弧菌（Vibro harveyi）菌液浴浸泡凡纳滨对虾10 d,凡纳滨对虾的累计死亡率由大到小依次为中草药复合益生菌制剂组（31.11%）、复合益生菌制剂组（35.56%）、中草药芽孢杆菌制剂组（37.78%）、芽孢杆菌制剂组（44.44%）、对照组（93.33%）。在饲料中添加一定比例的中草药复合益生菌制剂可提高凡纳滨对虾的生长指标、改善养殖水体环境、提高对虾的抗病力。

流沙湾7种海藻栽培比较及其对栽培海区水质的影响

为改善流沙湾当前不合理的养殖结构,用传统的筏式栽培方法,于2008年10月—2009年8月在流沙湾进行了长心卡帕藻Kappaphycus alvarezii、亨氏马尾藻Sargassum henslowianum、全缘马尾藻S.integerrimum、多胞马尾藻S.polyporum、硇洲马尾藻S.naozhouense、半叶马尾藻S.hemiphyllum和羊栖菜Hizikia fusiforme等7种大型经济海藻的栽培,观察了各种野生马尾藻的繁殖周期和栽培物候学,比较了各种栽培藻类与其野生种群的物候,测定了藻类栽培海区和邻近海区的水质。结果表明,长心卡帕藻、亨氏马尾藻、全缘马尾藻、多胞马尾藻、硇洲马尾藻、半叶马尾藻和羊栖菜栽培产量(以鲜重计)分别为6.3、5.2、5.2、3.5、2.5、2.3、0.9kg.m-2;除营养繁殖的长心卡帕藻外,各种藻繁殖期较自然海区均有不同程度的提前;藻类栽培海区的水质明显优于邻近海区。通过经济价值、栽培产量和生长期的长短等综合比较分析,认为流沙湾等粤西地区可以栽培的经济海藻有长心卡帕藻、全缘马尾藻和硇洲马尾藻。

海水网箱养殖军曹鱼弧菌病病原的分离及其特性

从海水网箱养殖的患病军曹鱼 (Rachycentron canadum)的肾脏、肝脏等实质器官及腹水中分离出 1株致病菌即JA- 4 6菌。其特点如下 :革兰氏阴性短杆菌 ,极端单鞭毛 ,大小为 (1～ 2 )μm× (0 .5～ 1)μm,氧化酶和过氧化氢酶阳性 ,有运动性 ,最适温度 2 8～ 30℃ ,需盐生长 ,未见发光 ,对弧菌抑制剂 0 / 12 9敏感 (15 0 mg/ L) ,发酵葡萄糖不产气 ,在TCBS上菌落呈黄色。经 API- 2 0 E系统试剂盒检测和 ATB自动鉴定系统鉴定 ,该菌为创伤弧菌 (Vibrio vulnificus) ;其半数致死量 (L D50 )为 4 .1× 10 4 个细菌。药敏试验结果表明 ,氯霉素、复方新诺明、庆大霉素、环丙沙星、红霉素、氟哌酸、先锋霉素和丁胺卡那霉素等 8种药物对该菌株有抑制作用 。

卵形鲳鲹结节病病原的分离与鉴定

从湛江港、阳江闸坡海水网箱养殖的患结节病卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)中分离一株细菌,回归感染结果证明该菌是引起卵形鲳鲹结节病的病原,对卵形鲳鲹半致死浓度为45 g-1。该菌株呈革兰阳性,好氧,具有弱抗酸性,菌体呈短杆状或细长分枝状,过氧化氢酶阳性,氧化酶阴性,还原硝酸盐,不水解酪素、黄嘌呤、酪氨酸、淀粉、明胶,以柠檬酸盐为唯一碳源生长。对其16S rDNA序列作Blast分析,构建系统进化树。结果表明,该菌株与诺卡氏菌属的菌株亲缘关系最近,且与鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolea JCM 3360T)的16S rDNA序列同源性高达99%。综合患病鱼的症状及病原菌形态、生理生化特性及16S rDNA序列的结果,该菌被鉴定为鰤鱼诺卡氏菌(N.seriolea)。

大口黑鲈3个养殖群体的遗传多样性分析

该研究通过毛细管电泳法筛选微卫星引物,从GenBank的51对微卫星引物中共筛选出12对具有特异性和多态性的引物,并合成荧光标记引物,对广东大口黑鲈(Micropterus salmoides)主养区3个养殖群体进行STR分型,以分析其遗传多样性。结果显示所检测的12个微卫星位点中,3个位点呈现高多态性,4个具有中度多态性,其余5个位点为低多态性。3个群体的遗传多样性水平偏低,期望杂合度(He)分别为0.312 5、0.360 6和0.328 4。群体间遗传分化指数及AMOVA分析显示,群体间遗传分化属于低水平,遗传变异有85.83%是由群体内不同个体间的差异造成的。群体间遗传距离分析显示,3个养殖群体间的遗传距离和遗传相似度比较接近。遗传结构分析表明3个养殖群体来自于同一个亚群。研究结果提示现阶段中国大口黑鲈养殖群体的遗传多样性已显著下降,因此在选育种过程应高度重视提高与维持种群遗传多样性的问题。

不同蛋白质源部分替代鱼粉对褐点石斑鱼幼鱼生长性能、体组成以及血清生化指标的影响

本试验旨在研究不同蛋白质源部分替代鱼粉对褐点石斑鱼幼鱼生长性能、体组成以及血清生化指标的影响。配制5组等氮等能饲料,对照组饲料(D1)含68%的鱼粉,试验组饲料(D2～D5)是在对照组饲料的基础上分别用豆粕替代10%的鱼粉、豆粕替代20%的鱼粉、啤酒酵母替代10%的鱼粉、玉米蛋白粉替代10%的鱼粉。选取体重在15 g左右的褐点石斑鱼幼鱼180尾,随机分为5组,每组3个重复,每个重复12尾。试验期为8周。结果表明:在生长性能方面,与对照组相比,D2、D3组的增重率、摄食率、特定生长率、粗蛋白质表观消化率差异不显著(P>0.05),而D4、D5组的上述指标均显著降低(P<0.05)。与D2、D3组相比,D4组的特定生长率显著降低(P<0.05),肝体指数显著升高(P<0.05);D5组的摄食率、特定生长率、蛋白质效率和粗蛋白质表观消化率显著降低(P<0.05),饲料系数、肝体指数显著升高(P<0.05)。在体组成方面,D5组全鱼和肌肉中粗蛋白质含量显著低于对照组和D2、D3组(P<0.05);D4组肌肉中粗脂肪含量显著低于对照组和D2组(P<0.05)。在血清生化指标方面,D3组血清总蛋白、球蛋白、葡萄糖含量显著低于对照组(P<0.05),而白球比显著高于对照组(P<0.05);对照组、D4组血清甘油三酯含量显著高于D3、D5组(P<0.05);各组间血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性没有显著差异(P>0.05)。由此得出,作为鱼粉的替代品,豆粕比啤酒酵母和玉米蛋白粉能更好地满足褐点石斑鱼幼鱼的营养需求;从主要生长指标不受影响的角度考虑,褐点石斑鱼幼鱼饲料中可以用豆粕替代20%的鱼粉。