目的探讨狂犬病毒采用鸡胚细胞在摇摆式反应器培养的工艺,为狂犬病毒的培养提供一种简便的新工艺。方法2021年4月选取发育良好的9~11d鸡胚,在无菌环境下将其制备成原代鸡胚细胞后,将狂犬病毒CTNCEC25株和原代鸡胚细胞接种于一次性反应袋...目的探讨狂犬病毒采用鸡胚细胞在摇摆式反应器培养的工艺,为狂犬病毒的培养提供一种简便的新工艺。方法2021年4月选取发育良好的9~11d鸡胚,在无菌环境下将其制备成原代鸡胚细胞后,将狂犬病毒CTNCEC25株和原代鸡胚细胞接种于一次性反应袋中,置于摇摆式反应器进行培养,通过对细胞密度(2.0×10^(6)、3.0×10^(6)、4.0×10^(6)和5.0×10^(6)个/ml)、感染复数(multiplicity of infection,MOI)(0.001、0.010、0.030、0.050、0.100)、溶氧(50%、70%、30%)、温度(32℃、33℃和34℃)等关键参数进行摸索,从而获得狂犬病毒最适的培养条件,并按照最适的培养条件培养3批病毒液验证该培养条件的稳定性。结果狂犬病毒CTNCEC25株在摇摆式反应器培养的最佳细胞密度为4.0×10^(6)~5.0×10^(6)个/ml、MOI为0.010~0.100、培养48h后的溶氧为50%、48h后的培养温度为32~34℃,采用该条件培养获得的病毒收获液滴度均在8.0lgFFU/ml以上,远高于中国药典规定的6.0lgFFU/ml。结论通过本研究,建立了狂犬病毒CTNCEC25株在摇摆式反应器的培养工艺,为鸡胚细胞狂犬病疫苗产业化生产提供了参考。展开更多
文摘目的探讨狂犬病毒采用鸡胚细胞在摇摆式反应器培养的工艺,为狂犬病毒的培养提供一种简便的新工艺。方法2021年4月选取发育良好的9~11d鸡胚,在无菌环境下将其制备成原代鸡胚细胞后,将狂犬病毒CTNCEC25株和原代鸡胚细胞接种于一次性反应袋中,置于摇摆式反应器进行培养,通过对细胞密度(2.0×10^(6)、3.0×10^(6)、4.0×10^(6)和5.0×10^(6)个/ml)、感染复数(multiplicity of infection,MOI)(0.001、0.010、0.030、0.050、0.100)、溶氧(50%、70%、30%)、温度(32℃、33℃和34℃)等关键参数进行摸索,从而获得狂犬病毒最适的培养条件,并按照最适的培养条件培养3批病毒液验证该培养条件的稳定性。结果狂犬病毒CTNCEC25株在摇摆式反应器培养的最佳细胞密度为4.0×10^(6)~5.0×10^(6)个/ml、MOI为0.010~0.100、培养48h后的溶氧为50%、48h后的培养温度为32~34℃,采用该条件培养获得的病毒收获液滴度均在8.0lgFFU/ml以上,远高于中国药典规定的6.0lgFFU/ml。结论通过本研究,建立了狂犬病毒CTNCEC25株在摇摆式反应器的培养工艺,为鸡胚细胞狂犬病疫苗产业化生产提供了参考。
