HACCP体系在控制湿粉生产过程中米酵菌酸形成的应用

危害分析与关键控制点(HACCP)是一种针对食品生产加工过程控制的预防性管理体系,可以有效提升食品企业的食品安全管理水平。该研究以广州一家湿粉生产企业为示范研究,针对湿粉生产过程发生的椰毒假单胞菌污染及其代谢产生剧毒素米酵菌酸的危害进行潜在危害分析,确定了生产过程的关键控制点,建立关键控制点(CCP)的监控、纠偏与验证程序,并提出防控措施,制定HACCP计划表,通过HACCP体系应用加强对湿粉生产过程的管控,保障湿粉质量安全。

改进QuEChERS-气相色谱-质谱法测定不同脂肪含量牛奶中19种酯类风味物质

采用改进 QuEChERS- 气相色谱 - 质谱法(GC-MS)技术测定不同脂肪含量牛奶中 19 种酯类风味物质,研究 牛奶中酯类风味物质与脂肪含量的关系。样品中的酯类风味物质经乙腈提取和 PSA 净化,净化后的样液经滤膜过滤后采 用气相色谱 - 质谱法测定。19 种酯类风味物质经 DB-FFAP 色谱柱分离,单离子监测模式测定,外标法定量。结果表明, 19 种酯类风味物质在 5.0~500.0 μg/L 质量浓度范围内具有很好的线性关系,相关系数均高于 0.999。通过牛奶样品的加标回 收试验,19 种酯类风味物质的平均回收率在 74.7%~109.2% 之间,日内精密度(n=6)在 1.9%~8.5% 之间,方法检出限和 定量限分别为 3.5~14.0 μg/kg 和 10.0~40.0 μg/kg。实际样品检测发现牛奶中检出的 δ- 葵内酯、γ- 十二内酯和 δ- 十二内酯的 含量与脂肪含量正相关,且全脂纯牛奶>低脂纯牛奶>脱脂纯牛奶;此外,部分牛奶样品可能添加有香精香料,导致 γ- 壬 内酯和 γ- 十一内酯的含量明显升高。该方法快速简便、准确度高、重现性好,可满足不同脂肪含量牛奶中 19 种酯类风味 物质的检测要求。

γ-癸内酯的生物合成途径及产量提升策略研究进展

γ-癸内酯(γ-Decalactone,GDL),是一种含有椰子、奶油和桃子风味的内酯类化合物,天然存在于水果及发酵产品中,广泛应用在食用香料、化妆品和化工等行业。自然界中γ-癸内酯的存量已经不能满足消费者日益增长的需求,化学合成的γ-癸内酯是没有光学活性的消旋体,安全性低,对环境不友好,而通过微生物合成的γ-癸内酯,与从植物、水果中提取获得的天然γ-癸内酯相比,结构相似,具有天然等同性,深受消费者喜爱。因此,微生物合成γ-癸内酯具有广阔的研究前景。该文综述了γ-癸内酯的生物合成途径,并对目前的产量提升策略如基因工程、菌株诱变、增加底物分散度、优化发酵条件、细胞固定化和原位分离技术等进行了总结,并在最后讨论了生物合成γ-癸内酯存在的问题和未来的展望。

表面增强拉曼光谱法测定食品接触用塑料材料及制品中4,4'-二氯二苯砜的迁移量

建立了食品接触用塑料材料及制品中4,4′-二氯二苯砜迁移量的表面增强拉曼光谱测定方法。首先对制备的金纳米颗粒(AuNPs)进行表征,并通过理论计算对4,4′-二氯二苯砜的拉曼特征峰进行归属。随后参照GB 31604.1-2015和GB 5009.156-2016的规定进行食品接触用塑料材料及制品中4,4′-二氯二苯砜的迁移实验,将迁移液与AuNPs混合后进行SERS测试,并采用高效液相色谱法进行验证。4,4′-二氯二苯砜的特征峰(748 cm^(-1))强度与4,4′-二氯二苯砜质量浓度在0.05~10 mg/L范围内呈现良好的线性关系,相关系数为0.9928,回收率为85.2%~93.4%,相对标准偏差为4.2%~6.6%,与HPLC方法结果基本一致。使用所建方法对5个不同品牌聚苯砜奶瓶中的4,4′-二氯二苯砜迁移量进行测定,结果均未检出。该方法具有快速、准确、操作简单等优点,可为食品接触用塑料材料及制品中4,4′-二氯二苯砜的检测提供技术参考。

基于表面增强拉曼光谱技术测定聚亚苯基砜奶瓶中4,4′-联苯二酚的迁移量

目的基于Ag纳米粒子(Ag nanoparticles,AgNPs)的表面增强拉曼光谱(Surface enhanced Raman spectroscopy,SERS)技术,建立测定聚亚苯基砜奶瓶中4,4′-联苯二酚迁移量的方法。方法参照GB 31604.1—2015、GB 5009.156—2016,对聚亚苯基砜奶瓶中4,4′-联苯二酚的迁移行为进行研究,将获得的迁移液经0.22μm滤膜过滤后,与AgNPs混合,然后进行SERS测试,并采用高效液相色谱法(High performance liquid chromatography,HPLC)进行验证。结果所制备的AgNPs分布均匀、重现性好,针对4,4′-联苯二酚的最低检测质量浓度可达1 mg/L。在质量浓度范围1~50 mg/L内,1278 cm−1处的峰强度与4,4′-联苯二酚的浓度具有良好的线性关系,相关系数为0.9904。在聚亚苯基砜奶瓶中4,4′-联苯二酚的回收率为88.6%~92.8%,相对偏差为4.02%~6.50%,且与HPLC方法的结果基本一致。结论该方法具有快速、准确、操作简单等优点,可为食品接触材料及制品中的4,4′-联苯二酚检测提供技术参考。

固相萃取-超高效液相色谱分离测定洗涤用品中4种荧光增白剂

建立了固相萃取净化结合超高效液相色谱-二极管阵列检测器(UPLC-DAD)同时检测洗衣液、洗衣粉等洗涤用品中荧光增白剂351、85、28和71的分析方法。样品经2%(体积分数)甲酸水溶液-甲醇提取,经WAX固相萃取小柱净化后,采用Phenomenex Synergi Max-RP色谱柱(150 mm×2.0 mm),以乙腈-10 mmol/L乙酸铵为流动相实现待测物(包括顺式和反式异构体)的良好分离,以二极管阵列检测器检测,结合保留时间和光谱图定性,以标准曲线定量。结果表明,4种荧光增白剂在0.05～180 mg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999 3;方法定量限(S/N=10)为1.5～15 mg/kg;添加水平为5～1 500 mg/kg时,回收率为84.9%～105%,相对标准偏差(RSD,n=6)为3.2%～6.1%。应用本方法分析了15个样品,阳性样品检出率为53.3%。该法前处理简单,回收率高,精密度好,适用于洗涤用品中4种荧光增白剂的测定。

液相色谱串联质谱法测定化妆品中的双酚A、辛基酚及壬基酚

建立了护肤化妆品中双酚A、辛基酚和壬基酚的超高效液相色谱串联质谱分析方法。样品经二氯甲烷提取,氨基固相萃取柱净化后,用甲醇定容,采用Waters UPLC BEH C18色谱柱,以甲醇-0.05%氨水为流动相,梯度洗脱分离后,串联四极杆质谱多反应监测方式检测,以保留时间和子离子比定性,外标法定量。在优化条件下,该方法 5 min内可完成4种待测物的分析。双酚A、辛基酚和壬基酚在0.5～50.0μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,方法的定量下限(LOQs)均为0.5μg/kg;在加标水平为0.5、1.0、10.0μg/kg时,护肤霜和护肤水样品中4种待测物的平均加标回收率为80%～96%,相对标准偏差(n=6)小于15%。该方法准确、快速、灵敏,适用于护肤化妆品中双酚A、辛基酚和壬基酚的快速确认和定量检测。

牛皮革PCR鉴别方法研究

本研究比较了不同的DNA提取方法,最终运用苯酚-氯仿抽提法成功地从牛皮革样品中提取获得质量较高的DNA,建立了牛皮革DNA的提取方法。该方法充分考虑了皮革材料的特殊性,利用裂解缓冲液释放皮革中的核酸,采用高浓度盐溶液除去溶液中的蛋白质,用苯酚、氯仿混合溶液进一步除去蛋白,最终获得纯化的皮革DNA。根据牛线粒体基因序列设计特异性的扩增引物,成功地从皮革样品DNA中扩增出271 bp的牛内源基因片段。本方法通过分析皮革样品中的遗传学信息来鉴定皮革种类,特异性强、灵敏度高,可广泛应用于皮革的鉴别与分类中。

超声萃取结合超高效液相色谱法测定皮革中10种防霉剂

建立了皮革样品中10种防霉剂(氨基苯磺酰胺、苯并咪唑、BIT、MBT、IPBC、PCMC、水杨酰苯胺、OPP、TCMTB和OIT)的超高效液相色谱(UPLC)检测方法。样品经甲醇超声萃取,T3色谱柱分离后,甲醇和0.1%甲酸水为流动相梯度洗脱,二极管阵列检测器测定。在优化条件下,10种防霉剂在一定的浓度范围内线性关系良好,相关系数(r^2)均不小于0.999 3,除IPBC的方法定量下限(S/N=10)为190.0 mg/kg外,其余9种防霉剂的方法定量下限为4.0~8.0 mg/kg,平均回收率为81.3%~104.9%,相对标准偏差(RSD,n=6)为4.7%~11.2%。该方法前处理简单、分离效果好,适用于皮革样品中10种防霉剂的同时测定。

固相萃取结合气相色谱-质谱法测定皮革中的14种阻燃剂

采用固相萃取结合气相色谱-质谱（GC-MS）技术,建立了皮革中14种多氯联苯及磷酸三酯类阻燃剂（TEP,TBP,TCEP,PCB18,TCPP,PCB101,PCB153,PCB138,TPh P,TEHP,PCB180,o-TTP,m-TTP,p-TTP）的高通量检测方法。皮革样品经乙腈超声提取后,采用Florisil固相萃取柱净化,经DB-5MS色谱柱分离,GC-MS的选择离子监测（SIM）模式监测,以保留时间和特征离子比值定性,外标法定量。14种阻燃剂在一定浓度范围内线性关系良好,相关系数（r2）均大于0.998,方法检出限为25.0-50.0μg/kg,平均回收率为82.0%-112.8%,相对标准偏差（RSD,n=6）为2.1%-9.4%。方法的前处理简单快速,灵敏度高,适用于皮革中14种阻燃剂的同时测定。

高效液相色谱法测定洗发护发类化妆品中米诺地尔

采用反相高效液相色谱法测定洗发护发类化妆品中米诺地尔的含量。试样经质量分数为1%三氯乙酸溶液提取,MCX固相萃取小柱净化,在C18柱上以质量浓度为2 g/L的己烷磺酸钠溶液（pH 3.0）和乙腈为流动相进行梯度洗脱,紫外检测波长为230 nm。该方法在质量浓度为0.2-20μg/mL范围内线性关系良好,加标回收率为83.1%-97.7%,相对标准偏差为2.9%-6.6%,检出限为1 mg/kg。该方法适用于洗发护发类化妆品中米诺地尔的测定。

QuEChERS/超高效液相色谱-串联质谱法测定动物源食品中氟啶虫胺腈和氟吡呋喃酮残留量

建立了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定动物源食品中氟啶虫胺腈和氟吡呋喃酮残留量的方法。样品中的氟啶虫胺腈和氟吡呋喃酮经乙腈超声提取和分散固相萃取净化,净化后的样液经滤膜过滤后采用UPLC-MS/MS法测定。以乙腈和5 mmol/L乙酸铵-0.1%甲酸水溶液为流动相,采用ACQUITY UPLC?HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)分离,电喷雾离子化、正离子扫描方式和多反应监测模式检测,外标法定量。结果表明,氟啶虫胺腈和氟吡呋喃酮在0.25~20.0μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r^(2))分别为0.999 3和0.999 1,方法检出限和定量下限分别为1.0μg/kg和5.0μg/kg。实际样品的平均加标回收率为90.1%~113%,相对标准偏差(RSD)为2.5%~7.8%。该方法快速简便、准确度和灵敏度高、重现性好,可满足动物源食品中氟啶虫胺腈和氟吡呋喃酮残留的检测要求。

羊皮革PCR鉴别方法研究

针对羊革,运用苯酚-氯仿2次纯化法成功地从羊革样品中获得质量相对较高的DNA,建立了羊革PCR的鉴定方法。该方法充分考虑了皮革材料的特殊性,利用裂解缓冲液释放皮革中的核酸,采用苯酚、氯仿混合溶液2次纯化的方法除去蛋白,最终获得纯化的皮革DNA。根据羊线粒体基因序列设计特异性的扩增引物,成功地从皮革样品DNA中扩增出294bp的羊内源基因片段,检测率达到62.5%。本方法通过分析皮革样品中的遗传学信息来鉴定皮革种类,特异性强、可作为皮革材质鉴别的一种手段。

超高效液相色谱法测定染发剂中的非那西丁

建立了一种测定染发剂中非那西丁的超高效液相色谱（UPLC）分析方法。染发剂样品经体积分数为70％的甲醇水溶液提取，再用正己烷进行反萃取后，采用BEHC18色谱柱，以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱分离，结合保留时间和光谱图定性，以标准曲线定量。实验结果表明：非那西丁质量浓度在0．5—50．0mg·L^-1内与峰面积线性关系良好，相关系数大于0．9993；方法检出限（SIN=3）为3．0mg·kg^-1；加标量为10，20和50mg·kg^-1时，平均回收率为85．6％～97．9％，相对标准偏差（RSD，n=6）为3．7％～5．3％。

超高效液相色谱法同时测定护肤品中的川芎嗪、甘草苷与荷叶碱

建立了一种同时测定水剂、乳液、膏霜、啫喱类护肤品中川芎嗪、甘草苷和荷叶碱的超高效液相色谱（UPLC）分析方法。不同基质样品经甲醇超声提取后,采用Waters BEH C18色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.7μm）,以0.05%磷酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱分离,二极管阵列检测器检测,结合保留时间和光谱图定性,以标准曲线定量。实验结果表明,3种待测物在0.05~50.0 mg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数为0.999 4~0.999 9;川芎嗪、甘草苷和荷叶碱的方法检出限（S/N=3）分别为0.6、0.6、0.3 mg/kg,方法定量下限（S/N=10）分别为2.0、2.0、1.0 mg/kg;加标水平为1~200 mg/kg时,3种待测物的平均回收率为85.6%~98.2%,相对标准偏差（RSD,n=6）为1.1%~6.1%。该法前处理简单、回收率高、精密度好,适用于不同护肤品中川芎嗪、甘草苷和荷叶碱的测定。

高效液相色谱法测定化妆品中乙内酰脲

建立了高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-PDA)测定化妆品中乙内酰脲的方法。取1.0g样品,加入10mL乙腈,均质、离心、上清液浓缩、水溶解后,用C18固相萃取小柱净化,用水定容。经C18液相色谱柱分离,以甲醇和水为流动相,梯度洗脱,检测波长为210nm。在1～20mg/L范围内,色谱峰面积与乙内酰脲的质量浓度线性关系良好,相关系数为0.999 8,平均回收率为85.6%～95.5%,相对标准偏差4.1%～5.2%,方法检出限为0.08mg/kg。该法被成功用于水剂化妆品和霜类化妆品中乙内酰脲的测定。

Eu^（3＋）、Tb^（3＋）与1－乙酰乙酰吲哚、1，10－邻菲啰啉二元、三元体系在溶液中荧光光谱研究

观察了以不同比例溶解在乙醇中的ＥＵ（３＋）、Ｔｂ（３＋）、１－乙酰乙酰吲哚（ＨＬ）和１，１０－邻菲啉（Ｐｈｅｎ）的荧光光谱．结果表明ＨＬ能有效地把吸收的能量传递给Ｔｂ（３＋），而不能有效地传递给Ｅｕ（３＋）．讨论了ＨＬ和Ｐｈｅｎ对Ｅｕ（３＋）、Ｔｂ（３＋）的配位作用及其对Ｅｕ（３＋）或Ｔｂ（３＋）所组成的三元体系中敏化发光性能的影响．

稀土与吡啶甜菜碱和2，2′－联吡啶配合物的研究

合成了稀土离子（Ｌａ３＋，Ｎｄ３＋，Ｅｕ３＋，Ｇｄ３＋，Ｔｂ３＋，Ｅｒ３＋）与吡啶乙酸内盐（Ｃ５Ｈ５Ｎ＋ＣＨ２ＣＯ２－，ｐｙｂ）及２，２′－联吡啶（ｂｐｙ）的三元配合物．通过元素分析、红外光谱等测试手段，确定配合物的组成为ＲＥ２（ｂｐｙ）５（ｐｙｂ）４（ＣｌＯ４）６·５Ｈ２Ｏ．测定了Ｅｕ３＋配合物的晶体结构，属三斜晶系．通过ｆ－ｆ超灵敏跃迁光谱及荧光光谱讨论了配合物化学键的离子性特点．

含RE^（3＋），Cu^（2＋）杂金属配合物合成与表征

以吡啶乙酸内盐，简称ｐｙｂ）为配体，在ｐＨ２．５和３．５下分别合成了２类配合物。经过元素分析和红外光谱等分析，确定了配合物的组成分别为ＲＥＣｕ（Ｐｙｂ）_５（ＣｌＯ_４）_５·ｎＨ_２Ｏ（ＲＥ＝Ｌａ，Ｃｅ，Ｎｄ，Ｓｍ，Ｇｄ，Ｄｙ，Ｅｒ，Ｙ）和ＲＥ_６Ｃｕ_（１２）（ＯＨ）_（２４）（Ｐｙｂ）_（１２）（ＣｌＯ_４）_（１８）·ｎＨ_２Ｏ（ＲＥ＝Ｌａ，Ｃｅ，Ｎｄ，Ｓｍ，ｎ＝３２；ＲＥ＝Ｇｄ，Ｄｙ，ＥｒＹ，ｎ＝２８），观察了Ｎｄ^（３＋）的水溶液中，分别加入Ｐｙｂ，Ｐｙｂ和Ｃｕ^（２＋）或Ｍｎ^（２＋），Ｎｉ^（２＋），Ｐｒｂ［三甲基按丙酸内盐，（ＣＨ_３）_３Ｎ~＋，简称Ｐｒｂ］，Ｐｒｂ和Ｃｕ^（２＋）后，ｆ－ｆ超灵敏跃迁吸收光谱的变化。结果表明，在ｐＨ２．５和３．５下，Ｃｕ^（２＋）均使Ｎｄ^（３＋）·ｐｙｂ体系超灵敏跃迁的振子强度增大，且增大值相同，Ｃｕ^（２＋）对Ｎｄ^（３＋）－Ｐｒｂ体系、Ｍｎ^（２＋）（或Ｎｉ^（２＋））对Ｎｄ^（３＋）－Ｐｙｂ体系超灵敏跃迁吸收光谱均无影响，讨论了超灵敏跃迁振子强度变化与杂金属配合物形成的关系。

基于特征肽段结合超高效液相色谱-串联质谱法的乳制品真实性鉴别方法研究

目的基于超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)建立乳制品中乳铁蛋白、乳桥蛋白、奶牛A1β-酪蛋白和A2β-酪蛋白、水牛A2β-酪蛋白的检测方法,开展市售乳制品中功能性蛋白质检测和乳制品真实性鉴评分析。方法乳蛋白经酶解后,应用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(ultra performance liquid chromatography-triple quadrupole-Orbitrap high resolution mass spectrometry,UPLC-Q/Orbitrap HRMS)和UPLC-MS/MS筛选获得可用于定性定量分析的特征肽段,基于UPLC-MS/MS建立同时检测LF、LPN、奶牛A1β-CN、奶牛A2β-CN和水牛A2β-CN的方法并应用于乳制品检测。结果5种待测蛋白在相应的浓度范围内线性关系良好(r^(2)>0.99),加标回收率在82.1%~105.5%之间,相对标准偏差均小于5%,78份乳制品的检测结果表明同类样品LF含量差异较大,不同类液体乳中LPN均值差异不大。结论本方法性能良好,适用于乳制品中乳桥蛋白等功能性蛋白的同时检测,也可以实现乳制品中乳蛋白物种来源的鉴别。