铜绿假单胞菌中exoU、lasI基因的表达及耐药性研究

本文旨在探讨铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)中exoU与lasI基因的表达及耐药特点。样本选取2019年6月—2020年12月邢台医学高等专科学校第二附属医院收集和分离的640株铜绿假单胞菌,主要来自痰液(51.56%)、血液(22.19%)及脓液(15.16%)标本。结果显示,exoS+/exoU-铜绿假单胞菌在各标本中检出率最高。携带exoU的铜绿假单胞菌对亚胺培南、氨基糖苷类、氟喹诺酮类、大环内酯类抗菌药物均具有较高的耐药率(P<0.001),而lasI缺失的铜绿假单胞菌对各类抗菌药物的耐药率则显著降低(P<0.001)。携带exoU或exoS基因的铜绿假单胞菌转录调控相关基因ptrA、exsA的表达与exoU或exoS的表达呈显著负相关(P<0.001)。lasI缺失的铜绿假单胞菌下游毒力基因lasA、aprX的表达水平显著降低(P<0.001),且lasA、aprX的表达水平与lasI呈显著正相关(P<0.001)。结果提示,exoU基因表达与铜绿假单胞菌的耐药性显著相关,而ptrA可能是exoU的潜在负调控基因,lasI缺失明显抑制铜绿假单胞菌群体感应系统毒力基因的表达及耐药性的产生。

异柠檬酸脱氢酶突变对骨巨细胞瘤增殖水平的影响

[目的]探讨异柠檬酸脱氢酶(IDH)132、140、172位精氨酸突变对骨巨细胞瘤细胞增殖水平的影响。[方法]纳入2020年1月-2022年1月骨巨细胞瘤患者76例,检测骨巨细胞瘤组织和血清中IDH1和IDH2的基因序列和IDH底物2-羟基戊二酸(2HG)的水平。构建IDH1和IDH2敲除的骨巨细胞瘤细胞GCT-404细胞系,转染IDH野生型或突变型后检测细胞的增值水平。根据转染的IDH1或IDH2的基因型进行实验分组:(1)IDH1野生型组;(2)IDH2野生型组;(3)IDH1 R132H组;(4)IDH2 R140Q组;(5)IDH2 R172S组。[结果]骨巨细胞瘤患者中IDH突变型占比32.89%,野生型占比67.11%。IDH野生型患者肿瘤组织和血清中2HG的水平低于IDH突变型患者[(0.22±0.07)nmol/mg vs(2.58±0.24)nmol/mg,(1.73±0.29)μmol/L vs(9.89±1.08)μmol/L,P<0.05]。相比于IDH野生型,IDH1 R132H、IDH2 R140Q或IDH2 R172S显著促进GCT-404细胞的增殖(2.20±0.09 vs 4.25±0.12,P<0.05)和2HG水平(31.34±5.33 vs 56.32±8.32,P<0.05)。敲除IDH1或IDH2后,GCT-404细胞中2HG的水平显著下降(25.78±4.56 vs 10.22±2.04,P<0.05)。2HG处理后,GCT-404细胞的增殖水平均显著上升(1.56±0.08 vs 2.41±0.10,P<0.05)。相比于IDH野生型,IDH1 R132H、IDH2 R140Q或IDH2 R172S显著增加GCT-404细胞中HIF1A的表达。敲低HIF1A后GCT-404细胞的增殖水平显著下降(1.50±0.04 vs 0.94±0.03,P<0.05)。[结论]IDH1 R132H、IDH2 R140Q或IDH2 R172S通过调控2HG水平和HIF1A水平能显著增强骨巨细胞瘤细胞的增殖水平。

骨髓涂片联合骨髓活检在弥漫性大B细胞淋巴瘤临床分期诊断中应用效果分析

探讨骨髓涂片联合骨髓活检在弥漫性大B细胞淋巴瘤临床分期诊断中应用效果。方法 选取2017年6月-2019年6月我院124例弥漫性大B细胞淋巴瘤患者作为研究对象,均进行骨髓涂片、骨髓活检切片检查。观察并比较不同检测方案的检出率、灵敏度、临床分期诊断正确率。结果 在检出率、灵敏度指标方面,单纯骨髓活检切片分别为58.87%、63.71%,单纯骨髓涂片为51.61%、54.03%,联合检测为85.48%、93.55%(P<0.05);在分期诊断正确率指标方面,单纯骨髓活检切片分别为71.43%、63.33%、64.29%、46.67%,单纯骨髓涂片为61.90%、56.67%、57.14%、40.00%,联合检测为85.71%、86.67%、92.86%、80.00%(P<0.05);单纯骨髓涂片、单纯骨髓活检切片、联合检测的患者检查满意度分别为83.06%、81.45%、95.97%(P<0.05)。结论 骨髓涂片联合骨髓活检在弥漫性大B细胞淋巴瘤临床分期诊断中应用效果显著,能够显著提高检出率,减少漏诊,提高弥漫性大B细胞淋巴瘤IV期诊断正确率,有利于临床分期的诊断。

KIAA1456靶向调控Notch通路抑制非小细胞肺癌

[目的]探讨KIAA1456通过靶向Notch调控对非小细胞肺癌生长、侵袭的影响。[方法]设置H1299细胞组、KIAA1456 mimics组、KIAA1456 inhibitor组,各组细胞培养48 h;培养结束后,CCK-8测量细胞增殖,流式细胞仪测定细胞凋亡水平,Transwell实验测定细胞侵袭水平,RT-PCR法及蛋白印迹法测定细胞KIAA1456、Notch1 mRNA与蛋白水平。[结果]KIAA1456 mimics组OD值、存活率、单克隆形成数目、穿膜数低于H1299细胞组,KIAA1456 inhibitor组OD值、存活率、单克隆形成数目、穿膜数高于H1299细胞组、KIAA1456 mimics组。KIAA1456 mimics组凋亡率、KIAA1456 mRNA和蛋白高于H1299细胞组(P<0.05),KIAA1456 inhibitor组凋亡率、KIAA1456 mRNA和蛋白低于H1299细胞组、KIAA1456 mimics组(P<0.05)。KIAA1456 mimics组高于H1299细胞组(P<0.05),KIAA1456 mimics组Notch1 mRNA和蛋白低于H1299细胞组(P<0.05),KIAA1456 inhibitor组Notch1 mRNA和蛋白高于H1299细胞组、KIAA1456 mimics组(P<0.05)。[结论]KIAA1456能抑制非小细胞肺癌H1299细胞增殖侵袭,促进其凋亡;其机制可能与KIAA1456抑制Notch通路的激活有关。

过表达APOLD1抑制骨折后深静脉血栓形成

[目的]探究APOLD1对骨折后深静脉血栓形成和NF-κB信号通路的影响。[方法]将大鼠随机分为3组(每组n=10):假手术(Sham)组、ADV-NC组和ADV-APOLD1组。通过病理染色分析静脉组织病理变化。通过蛋白免疫印迹分析NF-κB信号通路的变化。酶联免疫吸附剂测定分析血清中炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α和组织因子的水平。通过多功能血液凝固分析仪检测凝血功能相关指标变化(凝血酶原时间、凝血酶时间、活化部分凝血活酶时间以及D-二聚体水平)。[结果]和ADV-NC组比较,ADV-APOLD1组下腔静脉有部分血栓形成(98.27±1.26 vs 173.29±6.23;P<0.05),少量血管壁炎性细胞浸润、炎症因子水平(IL-1β、IL-6和TNF-α)和组织因子水平显著降低(5.92±0.15 vs 11.29±0.23;4.05±0.06 vs 7.09±0.03;7.19±0.32 vs 13.01±0.13;226.18±10.13 vs 399.02±10.03;P<0.05)、凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间水平显著增加,D-二聚体水平降低。此外,和ADV-NC组比较,ADV-APOLD1组的右下肢静脉组织中NF-κB p65磷酸化水平降低(0.57±0.06 vs 0.81±0.02;P<0.05)。[结论]过表达APOLD1能够抑制骨折后深静脉血栓形成,这一过程可能与抑制NF-κB信号通路相关。