人肝癌干细胞标志物在大鼠肝癌中的表达

目的:分析8种人肝癌干细胞标志物在化学药物诱导的大鼠原发性肝癌中的表达情况。方法:应用二乙基亚硝胺及N-亚硝基吗啉建立化学药物诱导的大鼠原发性肝癌模型。用免疫组织化学方法检测8种人肝癌干细胞标志物CD133、CD90、CD44、腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)、上皮细胞黏附分子(EpCAM)、甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)、OV6和乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenases,ALDH)在大鼠肝癌组织及癌旁组织中的表达,并通过13点评分法及Image-Pro Plus 6.0软件对图像进行半定量分析。结果:ABCG2、CD133、CD44和AFP在肿瘤组织中的表达显著高于癌旁组织,其余4个标志物无显著差异。结论:化学药物诱导的大鼠肝癌细胞中含有肿瘤干细胞标志物阳性细胞。

声脉冲辐射力成像评价肝纤维化和肝硬化的临床价值

目的探讨声脉冲辐射力成像(acoustic radiation force impulse,ARFI)技术在无创评估慢性肝病患者肝纤维化及肝硬化严重程度的临床应用价值。方法采用ARFI技术检测159例患者的肝脏弹性参数(Vs),以肝纤维化病理分期为金标准进行分组,其中69例肝硬化患者根据Child-Pugh评分进一步分为代偿期或失代偿期肝硬化组。比较肝弹性参数与肝纤维化程度和肝静脉压力梯度(hepatic vein pressure gradient,HVPG)的相关性。结果 ARFI所测各组肝Vs分别为:S0期(1.06±0.13)m/s、S1期(1.16±0.07)m/s、S2期(1.30±0.18)m/s、S3期(1.52±0.26)m/s和肝硬化组(1.88±0.41)m/s[代偿组(1.87±0.13)m/s、失代偿组(2.12±0.41)m/s]。除S0与S1期外,其余各组间弹性参数差异均有统计学意义(P<0.05)。ARFI诊断不同分期的受试者工作特征曲线下面积分别为0.952(S≥S2)、0.942(S≥S3)、0.914(肝硬化)和0.740(失代偿期肝硬化);对应的肝Vs最优值分别为1.26、1.37、1.50和1.84 m/s,相应的敏感度分别为85.2%、88.9%、80.0%和72.0%,特异度分别为99.7%、86.2%、87.8%和70.5%。对肝失代偿期患者,肝Vs与HVPG相关系数为0.748,以2.03 m/s为截点值判断临床严重门脉高压(HVPG≥16 mmHg)的曲线下面积为0.964,敏感度和特异度分别为93.3%和99.3%。结论 ARFI技术不仅可间接评估慢性肝病患者的肝纤维化程度,并可进一步评估肝硬化严重程度,为临床提供重要的治疗和预后指导信息。

CD90和CD44在人肝癌组织中的表达及临床意义

目的:研究肝癌干细胞(liver cancer stem cells,LCSCs)表面标志物:CD90和CD44在人肝癌组织中的表达情况及其与肝癌复发的关系。方法:收集20例已经随访1年以上的原发性肝细胞肝癌患者经手术切除的组织标本。20例患者中,术后1年内复发和无复发各10例。标本用石蜡包埋,以1μm的厚度连续切3片。1片做HE染色,用于病理诊断。另外2片则用作免疫组织化学检测,以观察CD90和CD44的表达情况,在显微镜下观察、摄片,检测各标志物在肝癌组织的阳性率,并比较它们在复发病例和无复发病例间的表达差异。结果:CD90和CD44在不同个体的肝癌组织中表达有差异,两者的阳性率均为0.13%～4.10%。CD90和CD44的表达与肝癌的预后有一定的关系,CD90在复发组的表达显著高于无复发组,且复发组CD90或CD44阳性的LCSCs的临近血管率均显著高于无复发组。结论:肝癌患者肿瘤组织中的LCSCs有明显异质性,且它们可同时表达多种肿瘤干细胞标志物。LCSCs标志物的阳性率及其与血管的关系和肝癌复发有一定关系。

第12例 咽痛 发热 血肌酐升高

1 病史摘要 14岁,男性, 因＂咽痛、发热1周,SCr升高3 d＂入复旦大学附属中山医院（我院）.入院前1周,出现发热,伴咽痛、腰部酸痛、恶心和呕吐,至私人诊所予利巴韦林及头孢唑啉治疗3 d后症状无好转,转至当地市医院就诊,查BP 160/70 mmHg,SCr 878 μmol·L-1;尿常规：蛋白（＋）;血常规：Hb 128.4 g·L-1,WBC 6.04×109·L-1,N 0.50.予抗感染、降压等治疗后咽痛有好转,SCr未下降、仍有低热,至我院进一步诊治.病程中,患儿无咳嗽、咳痰、气促,无皮疹、关节疼痛和双下肢水肿等症状.

整合素受体β3亚单位在非酒精性脂肪性肝病肝组织中的表达

目的观察在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)不同疾病状态中整合素受体β3亚单位的表达情况。方法清洁级雄性新西兰白兔30只,随机分成两组,一组饲以正常饮食(n=6),另一组饲以高脂饮食(n=24)。高脂饮食组分别在饲养1、2、3个月时随机处死8只白兔,取肝组织行HE染色和天狼星红染色,根据病理结果计算NAFLD活动度积分(NAS)。Western印迹和实时PCR检测肝组织内整合素受体β3亚单位蛋白和mRNA表达,免疫组织化学检测β3亚单位在肝脏细胞内的表达情况。结果根据病理结果,高脂饮食白兔分成3组:单纯脂肪肝组(n=10)、无纤维化的NASt组(n=6)和伴有纤维化的NASH组(n=8),NAS积分分别为2.43±0.79,5.38±1.30和5.13±1.05。与正常对照组相比,单纯脂肪肝组整合素受体β3亚单位的蛋白和mRNA表达差异无统计学意义,而NASH-组的表达明显增加,并且随着肝纤维化的加重,表达量增加更显著(均P<0.05)。此外,与正常对照组相比,单纯脂肪肝组肝组织内表达整合素受体β3亚单位的细胞无明显增多;而NASH组阳性细胞显著增多(均P<0.05),其中伴有纤维化的NASH组阳性细胞最多;这些阳性细胞主要分布于肝细胞间隙内。结论与正常对照组和单纯脂肪肝组相比,NASH组肝组织内有着更显著的整合素受体β3亚单位的表达,并且表达量随着肝纤维化的出现而进一步增加。

肠菌移植治疗肠易激综合征的研究进展及展望

肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)是以反复发作的腹痛伴排便习惯改变为特点的功能性胃肠病,目前尚无有效治疗方法,严重影响患者生活质量.IBS的病理生理机制未明,既往研究提示肠道菌群失调可能参与IBS发病,而以调节肠道菌群为靶点的肠菌移植(fecal microbiota transplantation,FMT)有望成为IBS重要的治疗策略.本文从多方面总结了肠道菌群参与IBS发病的可能机制,并对FMT治疗IBS的研究进展进行综述,对影响FMT疗效的因素进行了讨论,以期为今后以肠道菌群为靶点的IBS治疗策略提供参考.

促红素衍生肽对刀豆蛋白A诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用

目的探讨外源性给予人工合成的促红素衍生肽(HBSP)对刀豆蛋白A(Con A)诱导的急性免疫性肝损伤的保护作用。方法采用小鼠尾静脉注射Con A建立急性肝损伤模型,造模后2 h给予HBSP治疗(采用尾静脉注射,8nmol/kg,每6小时1次),造模后6、12、24 h分别测定小鼠血清中ALT、AST水平,并进行肝组织病理学检查评估肝损伤程度。测定造模后12 h肝组织中IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ、IL-12、IL-4、IL-10、TGF-β表达水平,通过TUNEL及免疫组化检测(分裂型Caspase-3)评估肝脏内肝细胞凋亡情况。结果在Con A诱导的急性肝损伤小鼠模型中,HBSP给药组血清ALT和AST水平显著低于Con A模型组,并且小鼠肝组织炎症坏死程度明显低于Con A模型组。同时,80 nmol/kg的HBSP给药显著提高了注射致死剂量Con A小鼠的生存率。此外,HBSP在mRNA水平抑制肝脏中促炎因子(IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ、IL-12)的表达,促进抑炎因子(IL-4、IL-10)的表达,并显著抑制Con A诱导的急性肝损伤相关的细胞凋亡。结论 HBSP对Con A诱导的急性肝损伤具有较好的保护作用,其机制可能与其抑制炎性反应及肝细胞凋亡有关。

利福昔明联合肠菌移植治疗腹泻型肠易激综合征的临床疗效及安全性

目的:评价利福昔明联合肠菌移植治疗腹泻型肠易激综合征的疗效及安全性。方法:选择合适的腹泻型肠易激综合征患者,给予利福昔明与肠菌移植联合治疗。随访6个月,观察治疗前后患者腹部不适及排便异常有无改善,同时行心理学评价,并收集肠菌标本进行测序。结果:共入组7例患者,总治疗次数11次。联合治疗对腹泻症状改善效果显著,总体有效率71.4%,显效高峰在2周～1个月,不超过3个月;患者伴发的焦虑或抑郁情绪改善。不良反应以短期腹泻最多见。所有经治者肠道微生态均发生改变,而后随时间推移向基线回归。供菌者的肠菌组成与疗效及肠菌移植治疗的不良反应密切相关。结论:联合治疗有一定疗效且较为安全,并能影响经治者的肠道微生态,但维持时间短,病情易复发。

粪菌移植治疗腹泻型肠易激综合征患者的临床及护理实践

目的:探讨经鼻肠管滴注行粪菌移植治疗腹泻型肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)患者的护理措施,观察粪菌移植后患者的腹泻症状及舒适度的改善情况。方法:回顾分析2016年4月至10月复旦大学附属中山医院消化科收治的腹泻型肠易激综合征并行粪菌移植治疗的7例患者的相关资料。总结采用的一系列护理措施,记录患者住院期间的不良反应,比较粪菌移植前后患者的日排便次数、Bristol粪便性状评分(Bristol stool form scale,BSFS)与Kolcaba简化舒适状况量表(general comfort questionnaire,GCQ)评分。结果:通过一系列临床治疗及护理干预,患者粪菌移植后日排便次数和BSFS均显著降低(P<0.01),GCQ评分显著升高(P=0.004)。粪菌移植后部分患者出现恶心、呕吐、发热、腹泻加重等不良反应。结论:粪菌移植可使患者的腹泻症状好转、舒适度提高,规范化的护理措施值得临床推广。

肝肺综合征研究进展

肝肺综合征(hepato-pulmonary syndrome,HPS)是在慢性肝病和(或)门脉高压的基础上出现肺内血管异常扩张、气体交换障碍、动脉血氧合作用异常,导致低氧血症及一系列的病理生理变化和临床表现,是终末期肝脏病的严重肺部并发症。动物实验表明肺微血管扩张、血管新生和血管内单核巨噬细胞聚集是导致气体交换异常的主要原因,但具体机制仍不明确。目前HPS尚缺乏有效的治疗药物,肝移植仍是最有效的治疗方法。本研究将重点讨论HPS的发病机制和临床诊治相关的新进展。

慢性乙型肝炎患者肝纤维化无创诊断模型的建立和验证

肝纤维化是许多慢性肝病的共同病理过程，大量临床研究表明肝纤维化可减轻或逆转。肝纤维化的早期诊断，对判断慢性肝病的疾病进展、临床结局、选择抗肝纤维化治疗药物及其疗效考核具有重要临床意义。目前肝穿刺病理检查仍然是诊断肝纤维化的金标准。但肝穿刺是一种有创检查，有一定的并发症发生率，患者依从性较差；存在抽样误差和观察者误差；

肠道微生态在肠易激综合征及其相关精神心理障碍中的作用与研究进展

IBS是一种常见的功能性胃肠病，主要以腹痛、腹胀和排便异常为临床表现。目前，IBS病因尚不清楚，近年来认为肠道微生态在其中扮演了重要角色。IBS患者共病精神心理障碍尤其是焦虑、抑郁的比例较普通人群显著升高，且与反复发作的消化道症状相互促进；同时肠道菌群失调可引起情志变化。随着对脑一肠一微生物轴研究的深入，联系三者的内在机制被不断阐明。现从肠道微生态在IBS及其相关精神心理障碍中的作用方面，对近期的相关文献进行综述。

免疫调节因子分泌型纤维介素蛋白2在慢性乙型肝炎长期抗病毒治疗中的动态变化

目的分析慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前后外周血中分泌型纤维介素蛋白2（sFGL2）表达水平的变化。方法纳入2013年7月至2014年12月就诊的初治慢性乙型肝炎患者（采用恩替卡韦进行抗病毒治疗）和健康对照者。收集患者基线及随访期的临床资料，并以ELISA法检测所有纳入对象的血浆sFGL2水平。所有患者基线时均行肝活组织穿刺检查，部分患者于治疗后78周行第2次肝活组织穿刺检查，采用免疫组织化学法检测肝组织内sFGL2的表达。统计学方法采用t检验、Wilcoxon法和相关性分析。结果共纳入71例慢性乙型肝炎患者和20名健康对照者。基线时，慢性乙型肝炎患者血浆sFGL2水平为105．6μg／L（78．3μg／L，151．6μg／L），高于健康对照者的25．2μg／L（18．8μg／L，34．3μg／L），差异有统计学意义（χ^2=5．887，P〈0．01）；肝硬化组患者血浆sFGL2水平为146．0μg／L（111．3μg／L，166．8μg／L），高于非肝硬化组的79．0μg／L（65．4μg／L，107．4μg／L），差异有统计学意义（χ^2=4．912，P〈0．01）。血浆sFGL2水平与肝脏硬度值、肝组织炎症及纤维化分期均呈正相关（r=0．426、0．240、0．655，P均〈0．05）。治疗后26、52周的血浆sFGL2水平分别为89．1μg／L（69．8μg／L，125．5μg／L）、75．8μg／L（53．4μg／L，98．9μg／L），呈逐渐下降趋势（治疗后26周比基线Z=-4．499，P〈0．01；治疗后52周比26周Z=-4．762，P〈0.01）。基线时，肝硬化组肝组织中sFGL2表达阳性细胞数为33．0±10．4，高于非肝硬化组的17．6±6．7，差异有统计学意义（t=7．541，P〈0.01）；与基线状态（24．5±2．0）相比，治疗78周时肝组织中的sFGL2阳性细胞数（11．3±1．6）减少，差异有统计学意义（t=11．980，P〈0.01）。结论慢性乙型肝炎患者外周血sFGL2水平与肝脏炎症及纤维化程度密切相关，长期抗病毒治疗后血浆sFGL2水平显著下降。

重症急性胰腺炎相关肾损伤的发病机制和诊疗进展

急性肾损伤是重症急性胰腺炎(SAP)的常见并发症,即使轻微的肾损伤也可导致患者的病死率升高.提高医护人员对急性肾损伤的认识,早期预防、准确诊断、恰当干预急性肾损伤能提高SAP生存率.临床虽已建立一系列基于生物化学和影像学的早期诊断策略,但其大规模应用仍需大样本的临床验证.目前临床仍缺乏治疗SAP相关肾损伤的有效药物,肾脏替代疗法是当前的主要手段,其治疗模式和干预时机有待于今后高质量的临床研究进一步探索和验证.

肝腹水与流失的蛋白质

肝硬化是腹水最主要的病因,约占腹水患者的70%。肝硬化失代偿期的腹水(简称肝腹水),简而言之,即漏入到腹腔内的水分超过腹腔对水分的重吸收,导致腹腔内的水分蓄积。患者主要表现为腹胀,腹围增大,小便量减少,有时还会伴随双下肢的凹陷性水肿。如果腹水伴随细菌感染,临床上称为自发性细菌性腹膜炎,是肝硬化相关严重并发症之一,病死率较高。腹水量较多时,可以通过体格检查来发现,少量腹水则需通过超声等检查来识别。