冬凌草甲素对卵巢切除大鼠骨量丢失的作用及机制

目的探讨冬凌草甲素(ORI)对卵巢切除(OVX)大鼠骨质疏松模型骨组织病理学改变、骨微结构影响及其作用机制。方法选取由徐州医科大学动物实验室提供的8周龄雌性SD大鼠30只,参照随机化数字表分假手术(Sham)组、卵巢切除+溶剂(Veh)(OVX+Veh)组、卵巢切除+冬凌草甲素(OVX+ORI)组。OVX+ORI组予0.1%冬凌草甲素2 mg/kg腹腔注射,OVX+Veh组予相同体积的灭菌注射用水,均为每周2次,持续12周。获取各组大鼠血浆、骨组织标本。骨组织染色切片观察病理改变。微型计算机断层扫描成像行骨微结构扫描和骨密度测定。聚合酶链反应法检测骨组织中骨保护素-核因子-κB受体活化因子-核因子-κB受体活化因子配体(OPG-RANKL-RANK)信号通路和Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-Catenin)信号通路相关蛋白信使RNA相对水平。蛋白质印迹法检测获得信号通路相关蛋白表达情况。酶联免疫吸附试验方法检测血浆中骨代谢指标。两组间均数比较采用独立样本t检验。结果与OVX+Veh组比较,OVX+ORI组骨小梁断裂明显减少,完整性改善。RANKL表达量、骨硬化蛋白表达量、Ⅰ型胶原C端交联肽水平、抗酒石酸酸性磷酸酶水平OVX+Veh组高于OVX+ORI组[1.62±0.04比1.02±0.06,t=26.766,P<0.01;1.60±0.04比1.08±0.04,t=29.898,P<0.01;(61.68±6.88)ng/ml比(28.97±4.07)ng/ml,t=12.937,P<0.01;(759.44±32.47)pg/ml比(435.71±31.43)pg/ml,t=22.654,P<0.01]。骨密度、OPG表达量、wnt3a表达量、β-Catenin表达量、低密度脂蛋白受体相关蛋白5表达量、碱性磷酸酶水平、Ⅰ型原胶原N端前肽水平OVX+Veh组低于OVX+ORI组[(96.75±8.44)mg/cm3比(195.84±13.16)mg/cm3,t=-20.036,P<0.01;0.56±0.04比1.00±0.05,t=-21.267,P<0.01;0.31±0.01比0.93±0.04,t=-52.286,P<0.01;0.31±0.01比1.02±0.07,t=-30.535,P<0.01;0.32±0.03比1.00±0.03),t=-50.398,P<0.01;(15.71±3.44)ng/ml比(53.21±6.99)ng/ml,t=-15.229,P<0.01;(23.83±3.54)ng/ml比(63.95±4.17)ng/ml,t=-23.217,P<0.01]。结论冬凌草甲素可能通过抑制OPG-RANKL-RANK信号通路,同时上调Wnt/β-Catenin信号通路,改善雌激素缺乏大鼠骨量丢失,减少骨微结构破坏。

非创伤性股骨头坏死患者血清白细胞介素-33水平变化及意义

目的探讨非创伤性股骨头坏死(NONFH)患者血清白细胞介素-33(IL-33)水平变化及意义。方法选取2017年7月至2018年6月徐州医科大学附属邳州市人民医院门诊或病房诊治的NONFH患者50例为观察组(NONFH组),另选择同期体检中心接受体检的健康成年人50例为对照组。所有人员清晨空腹时采集肘静脉血2 ml,分离血清,采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)检测两组人群血清中IL-33水平并比较。同时分析NONFH组中不同致病原因、不同国际骨循环研究协会(ARCO)分期、有无塌陷对患者血清IL-33水平的影响。结果 NONFH组患者血清中IL-33水平均明显高于健康人群血清水平[(11.1±4.5)pg/ml vs(6.3±2.4)pg/ml,t=6.655,P=0.000]。激素性NONFH、酒精性NONFH、原发性NONFH患者血清IL-33水平比较无统计学差异[(10.3±8.3)pg/ml、(12.5±8.8)pg/ml、(11.7±5.9)pg/ml,F=0.478,P=0.623]。ARCOⅡ、Ⅲ、Ⅳ期患者血清IL-33水平比较无统计学差异[(11.9±8.4)pg/ml、(13.6±6.3)pg/ml、(12.1±7.5)pg/ml,F=0.278,P=0.759]。股骨头有、无塌陷患者血清IL-33水平比较无统计学差异[(11.7±6.9)pg/ml vs(9.9±4.1)pg/ml,t=1.159,P=0.235]。结论 NONFH患者的血清IL-33水平明显高于健康人群水平,提示IL-33可能作为一种促炎细胞因子参与NONFH病情活动,且与发病原因、有无股骨头塌陷、NONFH分期无关。

冬凌草甲素降低糖皮质激素诱导的大鼠股骨颈骨折风险

目的观察冬凌草甲素(ORI)对糖皮质激素诱导的大鼠股骨颈骨折风险的影响。方法将30只4月龄SPF级SD大鼠随机分为对照组(n=10)、地塞米松皮下注射组(DEX组,n=10)、地塞米松皮下注射+ORI补充组(DEX+ORI组,n=10)。对照组给予0.1 ml生理盐水肌内注射;DEX组按照1 mg/kg剂量行肌内注射,每周2次。DEX+ORI组自DEX注射(同DEX组)的第1天起,即予以腹腔注射ORI(剂量2 mg/kg,每周2次)。上午8:00准时给药,共计8周。8周后,对所有大鼠进行血清学、骨密度、骨微形态学、生物力学检测,并比较各组间差异。结果与对照组比较,DEX组大鼠血清中Ⅰ型前胶原氨基末端前肽(P1NP)水平,腰椎、股骨、胫骨的骨密度,股骨干微形态指标(骨体积分数、骨小梁数目、骨小梁厚度)和生物力学指标(股骨颈极限载荷、刚度、骨折强度)均明显降低(P<0.05),血清Ⅰ型胶原羧基端肽(CTX-1)水平、骨小梁分离度、结构模式指数明显升高(P<0.05)。与DEX组比较,DEX+ORI组血清P1NP,腰椎、股骨、胫骨的骨密度,股骨干微形态指标(骨体积分数、骨小梁数目、骨小梁厚度)和生物力学指标(股骨颈极限载荷、刚度、骨折强度)明显升高(P<0.05)、血清CTX-1水平、骨小梁分离度、结构模式指数明显降低(P<0.05)。结论ORI能够有效预防糖皮质激素诱导的大鼠股骨颈骨折,增加骨强度和骨密度,有效降低股骨颈骨折风险。